《萜及其皂苷》PPT课件

Chemistry of Natural Medicines第七章第七章 三萜及其苷类三萜及其苷类 Triterpenoids教教 学学 内内 容容1、熟悉三萜类化合物的定义、生源途径、分布、熟悉三萜类化合物的定义、生源途径、分布 和生理活性。和生理活性。2、掌握三萜类化合物的分类和结构类型。、掌握三萜类化合物的分类和结构类型。3、掌握三萜及其苷类化合物的理化性质与显色、掌握三萜及其苷类化合物的理化性质与显色 反应。反应。4、熟悉三萜及其皂苷的提取和分离方法。、熟悉三萜及其皂苷的提取和分离方法。一、定一、定 义义 三萜类化合物（三萜类化合物（triterpenoidstriterpenoids）：）：母体骨架由母体骨架由 30 30 个个C C原子组成的萜类化合原子组成的萜类化合物及其衍生物。物及其衍生物。即：由即：由6 6个异戊二烯骨架构成的天然有机个异戊二烯骨架构成的天然有机化合物及其衍生物。化合物及其衍生物。第一节第一节 概概 述述二、分布及存在二、分布及存在v三萜类化合物在自然界有广泛的资源分布。在植物、三萜类化合物在自然界有广泛的资源分布。在植物、菌类、蕨类、动物、海关生物中均有发现，尤以双子菌类、蕨类、动物、海关生物中均有发现，尤以双子叶植物中分布最多，如石竹科、五加科、豆科、远志叶植物中分布最多，如石竹科、五加科、豆科、远志科、桔梗科等。科、桔梗科等。v许多常见的植物如：人参、甘草、紫苏、黄芪、桔梗许多常见的植物如：人参、甘草、紫苏、黄芪、桔梗等都含有多种三萜的苷元及苷。等都含有多种三萜的苷元及苷。紫苏紫苏黄芪黄芪v三萜类化合物自然界有的以三萜类化合物自然界有的以游离状态游离状态存在，存在，有的以苷的形式存在。有的以苷的形式存在。v游离三萜主要来源于菊科、豆科、大戟科、游离三萜主要来源于菊科、豆科、大戟科、楝科、卫茅科、茜草科、橄榄科、唇形科楝科、卫茅科、茜草科、橄榄科、唇形科 等植物。等植物。v三萜皂苷在豆科、五加科、葫芦科、毛莨三萜皂苷在豆科、五加科、葫芦科、毛莨 科、石竹科、伞形科、鼠李科、报春花科科、石竹科、伞形科、鼠李科、报春花科 等植物分布较多。等植物分布较多。v三萜苷元结构较大，极性较低。但其与糖结合成三萜苷元结构较大，极性较低。但其与糖结合成苷后，极性增大、水溶性增大，其水溶液振摇后苷后，极性增大、水溶性增大，其水溶液振摇后能产生类似能产生类似 肥皂溶液的肥皂溶液的持久性泡沫持久性泡沫，故三萜苷故三萜苷类亦称为三萜皂苷类亦称为三萜皂苷 (Triterpenoid (Triterpenoid saponins)saponins)。v大多数三萜苷类苷元上又含有羧基，有时又称为大多数三萜苷类苷元上又含有羧基，有时又称为酸性皂苷。酸性皂苷。皂苷(按苷元分)三萜皂苷甾体皂苷皂苷少数三萜皂苷甾体皂苷酸性皂苷：多数三萜苷类，其结构中含有羧基中性皂苷：三、三萜皂苷的组成三、三萜皂苷的组成v苷元：苷元：常见四环三萜、五环三萜苷元。常见四环三萜、五环三萜苷元。v糖：糖：常见有葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖、常见有葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖或其它戊糖。多为单糖或低聚糖。木糖或其它戊糖。多为单糖或低聚糖。v糖醛酸：糖醛酸：常见有葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸等。常见有葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸等。v酰基：酰基：某些苷元或糖上连有。某些苷元或糖上连有。四、结构分类四、结构分类主要按苷元的碳环的骨架来分类。主要按苷元的碳环的骨架来分类。无环三萜无环三萜单环三萜单环三萜双环三萜双环三萜三环三萜三环三萜四环三萜四环三萜五环三萜五环三萜2030192123242526272928221例：例：无环三萜无环三萜鲨烯鲨烯(squalene)二环三萜：二环三萜：HOOCCOOH榔色酸榔色酸(lansic acid)三环三萜：三环三萜：OH龙涎香醇龙涎香醇(ambrin)蓝刺头OPPFPP焦磷酸酸金合欢酯OPPO2,3-环氧鲨烯 squalene-2,3-epoxide第二节第二节 三萜类化合物的生物合成三萜类化合物的生物合成O O P PO O P P焦焦磷磷酸酸金金合合欢欢酯酯焦焦磷磷酸酸金金合合欢欢酯酯+鲨鲨烯烯2,3-2,3-环氧鲨烯主要有以下两种立体构型及生物合成示例环氧鲨烯主要有以下两种立体构型及生物合成示例HOHHHRprotosterol cation IHORORchair-boat-chair-boatH+第第I种立体途径：种立体途径：ROH+HOHHHRprotosterol cation IIchair-chair-chair-boatHOR第第II种立体途径：种立体途径：v原萜烷碳正离子原萜烷碳正离子I I、II II(protosterol cation I、protosterol cation II)是生物合成环状三萜类化合物的关键中间体。是生物合成环状三萜类化合物的关键中间体。原萜烷碳正离子经进一步甲基重排、原萜烷碳正离子经进一步甲基重排、H的移位、再的移位、再环合等形成了不同结构的四环三萜、五环三萜等萜环合等形成了不同结构的四环三萜、五环三萜等萜类化合物。类化合物。一、达玛烷一、达玛烷(dammarane)(dammarane)型型母体结构母体结构：由原萜烷碳正离子：由原萜烷碳正离子IIII形成。形成。达达玛玛烷烷d da am mm ma ar ra an ne e第三节第三节 四四 环环 三三 萜萜Tetracyclic Triterpenoids结构特点结构特点：环：环：A/B、B/C、C/D环互为反式构型。环互为反式构型。甲基：甲基：C4：2个个CH3；C8：-CH3；C10：-CH3；C14：-CH3。侧链：侧链：C17：-8个个C的侧链；的侧链；C20为手性为手性C，可能为可能为R或或S构型。构型。123456789101112131415161718192021222324252627282930达达玛玛烷烷d da am mm ma ar ra an ne e达达玛玛烷烷d da am mm ma ar ra an ne e人参皂苷：人参皂苷：HOOHHO361220242520(S)-protopanaxadiol 原人参二醇 20(S)-protopanaxatriol 原人参三醇HOOHOHHO3612202425 若在若在C-3C-3、C-6 C-6 或或C-20C-20分别连有不同的糖基则形成了分别连有不同的糖基则形成了人参中的多种三萜皂苷人参中的多种三萜皂苷(ginsenosides)(ginsenosides)。(书书p275p275上上)OHO糖1220242520(S)-原人参二醇皂苷20(S)-原人参三醇皂苷H+OHHO20OHOH20苷键断裂及C20差向异构化生成一对对映体H+H+OH20OSSRSOH20OR环合环合20(S)-panaxadiol人参二醇20(S)-jpanaxadiol人参三醇20(R)-panaxadiol人参二醇20(R)-panaxadiol人参三醇二、羊毛脂烷二、羊毛脂烷(lanostane)型型母体结构母体结构：由原萜烷正离子：由原萜烷正离子I I经基团移位形成。经基团移位形成。HORHH81314151617HO*20Rprotosterol cation I结构特点：结构特点：环：环：A/B、B/C、C/D环均为反式构型。环均为反式构型。甲基：甲基：C-4：2个个CH3；C-10：-CH3；C-13：-CH3；C-14：-CH3。侧链：侧链：C-17：-R；C20为为R构型的手性构型的手性C。H123456789101112131415161718192021232627282930羊毛脂烷 lanostane302726252423222120191817161514131211109876543212928Ganodenic acid CGanodenic acid CC CO O2 2H HO OO OO OO OH HH HH HO OH H从中药灵芝中分离得到的四环三萜化合物：从中药灵芝中分离得到的四环三萜化合物：灵芝灵芝三、甘遂烷三、甘遂烷(tirucallane)型型 母体结构母体结构：由原萜烷碳正离子：由原萜烷碳正离子IIII经基团移位形成。与羊毛经基团移位形成。与羊毛脂烷型连接顺序相同，但空间构型不同。脂烷型连接顺序相同，但空间构型不同。HO*20protosterol cation IIHORHH8131417201417H13SH1234567891011121314151618192021222324252627282930甘遂烷 tirucallane结构特点：环：环：A/B、B/C、C/D环为反式构型。环为反式构型。甲基：甲基：C-4：2个个CH3；C-10：-CH3；C-13：-CH3；C-14：-CH3。侧链：侧链：C-17：-R；C20为为S构型的手性构型的手性C。*具体例子具体例子(书书p279)。H1234567891011121314151618192021222324252627282930甘遂烷 tirucallaneH HH HC CH H3 3O OO OH H724320173-oxotirucalla-7,24-dine-23-ol3-oxotirucalla-7,24-dine-23-ol从藤桔属植物从藤桔属植物Paramignya monophylla的果实分离得到：的果实分离得到：四、环阿尔屯四、环阿尔屯(cycloartane)型型 母体结构：由原萜烷碳正离子母体结构：由原萜烷碳正离子I I经基团移位形成。经基团移位形成。基本骨架与羊毛脂烷型很相似，主要差别在于结基本骨架与羊毛脂烷型很相似，主要差别在于结构中含有一个三元构中含有一个三元C C环。环。H123456789101112131415161718192021232627282930环阿尔屯 cycloartane结构特点：结构特点：在在C9、C10、C19之之间形成一个三元间形成一个三元 C环，环，类似环丙烷结构，其它类似环丙烷结构，其它与羊毛脂烷型相同，属与羊毛脂烷型相同，属于羊毛甾烷类化合物的于羊毛甾烷类化合物的变型。变型。H123456789101112131415161718192021232627282930羊毛脂烷 lanostane*具体例子略具体例子略(书书p280)p280)。H123456789101112131415161718192021232627282930环阿尔屯 cycloartane24203H HH HO OG Gl lu uO OH HO OH HR R2561619109R=xyl(2,3-diAc)R=xyl(2,3-diAc)Astragaloside IAstragaloside I从中药黄芪（从中药黄芪（Astragalus membranaceus中分离到的黄芪苷中分离到的黄芪苷 I：五、葫芦烷五、葫芦烷(cucurbitane)型型母体结构：由原萜烷碳正离子母体结构：由原萜烷碳正离子I I经基团移位形成。经基团移位形成。HORHHHH81314151617protosterol cation I5HOHR1391420R*结构特点：环：环：A/BA/B、B/CB/C、C/DC/D均互为反式构型；均互为反式构型；甲基：甲基：C-4C-4：2 2个个CHCH3 3；C-9C-9：-CH-CH3 3；C-13C-13：-CH-CH3 3；C-14C-14：-CH-CH3 3。侧链：侧链：C-17C-17：-R-R；C20C20为为R R构型的手性构型的手性C C。HHH123456789101112131415161718192021232627282930葫芦烷 cucurbitane520HHH H O OO OO O H HO OO O H HO O A A c c2361191823162519C Cu uc cu ur rb bi it ta ac ci in n I Ia aH H O O从雪胆属植物从雪胆属植物Hemsleya amabilis中分离得到的中分离得到的 雪胆甲素：雪胆甲素：六、楝烷六、楝烷(meliacane)型型 母体结构母体结构：由原萜烷碳正离子：由原萜烷碳正离子II经基团移位形成。与甘遂经基团移位形成。与甘遂烷结构类似。烷结构类似。此类化合物母体此类化合物母体C为为26个，少于个，少于30个，但从生源上看，个，但从生源上看，甘甘遂烷被认为是其前体化合物，遂烷被认为是其前体化合物，经过氧化、降解、重排等衍经过氧化、降解、重排等衍生而来。生而来。此类化合物又称降四环三萜类此类化合物又称降四环三萜类(nor-tetracyclic triterpeoids)。结构特点：结构特点：环：环：A/B、B/C、C/D均环互为反式构型。均环互为反式构型。甲基：甲基：C-4：2个个CH3；C-8：-CH3；C-10：-CH3；C-13：-CH3。侧链：侧链：C-17：-R；C20为为S构型的手性构型的手性C。与甘遂烷构型不同点：与甘遂烷构型不同点：C8-H与与C14-CH3互换；互换；C17-R烃烃基少了基少了4个个C。H12345678910111213141516181920212223242526*2017H13S8楝烷 meliacaneH HH HO OO OM Me eO OC CM Me eO OO OO OO O1 1-m me et th ho ox xy y-1 1,2 2-d di ih hy yd dr ro oe ep po ox xy ya az za ad di io on ne e从楝科植物从楝科植物Azadirachta indica中分离得到：中分离得到：楝科植物楝科植物一、齐墩果烷一、齐墩果烷(oleanane)(oleanane)型型 又称又称-香树脂烷香树脂烷(-amyrane)型。型。在自然界分布极为广泛，呈游离状态或成酯、在自然界分布极为广泛，呈游离状态或成酯、或成苷存在。或成苷存在。第四节第四节 五五 环环 三三 萜萜Pentacyclic Triterpenoids母体结构：由原萜烷碳正离子母体结构：由原萜烷碳正离子IIII环合形成。环合形成。HOHHHprotosterol cation IIHOHHHHOHHHHOHHHH+结构特点：结构特点：环：环：A/B、B/C、C/D互为互为反式构型，反式构型，D/E互为顺式构型。互为顺式构型。甲基：甲基：C-4：2个个CH3；C-8：-CH3；C-10：-CH3；C-14：-CH3；C-17：-CH3；C-20：2个个CH3。HHHH123456789101112141516171819202122232425262728293013齐墩果烷 oleanane123452423678269101112131427151617281819212220252930HOCOOHH 齐墩果酸 oleanolic acid1213172820例：例：OROHOOCH3121317203011 R=H 甘草次酸甘草次酸(glycyrrhetinic acid)R=-D-gluA-2-D-gluA-甘草酸甘草酸(glycyrrhizic acid)(甘草皂苷或甘草甜素甘草皂苷或甘草甜素glycyrrhizin)例：例：CH2R1OR3HOR231211131728R1=H or OHR2=OHR3=糖柴胡皂苷 saikosaponin例：例：柴胡柴胡*具体例子略具体例子略(书书p285)p285)。HHHH123456789101112141516171819202122232425262728293013乌苏烷 ursane123452423678269101112131427151617281819212220252930二、乌苏烷二、乌苏烷(ursane)型型 又称又称-香树脂烷香树脂烷(-amyrane)型。型。母体结构：可认为是齐墩果烷型母体结构：可认为是齐墩果烷型20位上偕位上偕二甲基中的一个甲基移位形成的二甲基中的一个甲基移位形成的。结构特点结构特点：环：环：A/B、B/C、C/D互为反式构型，互为反式构型，D/E互为顺式构型。互为顺式构型。甲基：甲基：C-4：2个个CH3；C-8：-CH3；C-10：-CH3；C-14：-CH3；C-17：-CH3；C-19：-CH3；C-20：-CH3。HHHH123456789101112141516171819202122232425262728293013乌苏烷 ursane123452423678269101112131427151617281819212220252930HOHHHCOOHH312281317乌苏酸(熊果酸)ursolic acid例：例：H HO OH H2 2C CH HH HH HC CO OO OH HH HO OH HO OAsiatic acidAsiatic acid例：例：从积雪草（从积雪草（Centella asiatica）中分离到的）中分离到的 积雪草酸积雪草酸积雪草积雪草HOHHHprotosterol cation IIHOHHHHOHHHH+三、羽扇豆烷三、羽扇豆烷(lupane)(lupane)型型 母体结构：由原萜烷碳正离子母体结构：由原萜烷碳正离子IIII环合形成。环合形成。E E环为五元环。环为五元环。生物合成途径：生物合成途径：14589101314171819202324252627282930HHH123456789101112131415161718192021222324252627282930羽扇豆烷 lupane立体构型：立体构型：结构特点：环：环：A/B、B/C、C/D、D/E互为反式构型，互为反式构型，E环为五元环；环为五元环；甲基：甲基：C-4：2个个CH3；C-8：-CH3；C-10：-CH3；C-14：-CH3；C-17：-CH3。侧链：侧链：C-19位上有一个位上有一个-异丙基。异丙基。HHH123456789101112131415161718192021222324252627282930羽扇豆烷 lupane例：例：从羽扇豆（从羽扇豆（Lupinus luteus）中分离得到的）中分离得到的 HOR羽扇豆醇 lupeol R=CH3白桦醇 betulin R=CH2OH白桦酸 berulinic acid R=COOH羽扇豆羽扇豆例：例：从白头翁从白头翁(Pulsatilla chinensis)中分离得到的中分离得到的23-羟基白桦酸羟基白桦酸CH2OHHOHHCOOH12345678910111213141516171819202122232425262728293023-hydroxybetulinic acid白头翁白头翁 母体结构：可认为是由齐墩果烯母体结构：可认为是由齐墩果烯-甲基甲基移位形成的。移位形成的。HHH458910121413HHH123456789101112141516171819202122232425262728293013木栓烷 friedelane齐墩果烯齐墩果烯立体途径示意：立体途径示意：四、木栓烷四、木栓烷(friedelane)型型12(13)结构特点：环：环：A/B、B/C、C/D互为反式构型，互为反式构型，D/E为顺式；为顺式；甲基：甲基：C-4：-CH3；C-5：-CH3；C-9：-CH3；C-13：-CH3；C-14：-CH3；C-17：-CH3；C-20：2个个CH3。154892510121327142615172818192023242930木栓烷 friedelaneH HC CO OO OH HH HH HO OO OTriptergoneTriptergone例：例：从雷公藤（从雷公藤（tripterygium wilfordii）中分离得到的）中分离得到的 雷公藤酮雷公藤酮*六、其它类型六、其它类型 除上述几种三萜的主要结构类型外，还有其它除上述几种三萜的主要结构类型外，还有其它的立体异构体、的立体异构体、甲基移位异构体、扩环衍生物、甲基移位异构体、扩环衍生物、降解衍生物、裂环衍生物等等。降解衍生物、裂环衍生物等等。一、物理性质一、物理性质 1 1、状态、状态 三萜苷元一般有完好的结晶。三萜苷元一般有完好的结晶。苷由于分子量较大，不易结晶，多为无定苷由于分子量较大，不易结晶，多为无定形粉末。形粉末。第五节 三萜类化合物的理化性质 2 2、味觉、味觉 大多数大多数 三萜类化合物味苦而辛辣，对粘膜三萜类化合物味苦而辛辣，对粘膜有较强刺激性，如刺激鼻粘膜后引起喷嚏有较强刺激性，如刺激鼻粘膜后引起喷嚏 (少少数例外，如：甘草皂苷对粘膜刺激较弱且有显数例外，如：甘草皂苷对粘膜刺激较弱且有显著的甜味著的甜味)。3 3、旋光、旋光 均有旋光性。均有旋光性。4 4、溶解性、溶解性 苷元不溶于水，可溶于石油醚、乙醚、苯、氯苷元不溶于水，可溶于石油醚、乙醚、苯、氯仿等极性小的有机溶剂。仿等极性小的有机溶剂。苷有强吸湿性。一般溶于水，易溶于热水、苷有强吸湿性。一般溶于水，易溶于热水、稀醇、热甲稀醇、热甲(乙乙)醇、正丁醇、戊醇等，不溶于极醇、正丁醇、戊醇等，不溶于极性较小的有机溶剂。性较小的有机溶剂。皂苷在含水的丁醇、皂苷在含水的丁醇、戊醇戊醇中溶解度较大。中溶解度较大。三萜皂苷有助溶性，可促进其它成分在水中三萜皂苷有助溶性，可促进其它成分在水中的溶解。的溶解。*5 5、水解性、水解性 皂苷易被酸或酶水解，所以提取分离时要注意，皂苷易被酸或酶水解，所以提取分离时要注意，否则会引起如苷元的脱水、双键移位、取代基移否则会引起如苷元的脱水、双键移位、取代基移位、构型转化等化学变化，得不到原生苷或苷元。位、构型转化等化学变化，得不到原生苷或苷元。二、表面活性性质二、表面活性性质v皂苷有降低水溶液表面张力的作用，其水溶液皂苷有降低水溶液表面张力的作用，其水溶液经剧烈振摇后能产生持久性泡沫经剧烈振摇后能产生持久性泡沫(15min以上以上)，而且不因加热而消失而且不因加热而消失 (此与蛋白质产生的泡沫此与蛋白质产生的泡沫相区别相区别)。v皂苷水解为苷元后，表面活性作用亦消失。皂苷水解为苷元后，表面活性作用亦消失。1g中药粉末 +10ml水10min滤出水液振摇若产生持久性泡沫(15min)以上,则认为含有皂苷类成分取两支试管，分别加入：1.5ml 0.1M HCl +3滴中药水提液振摇1min2.5ml 0.1M NaOH +3滴中药水提液振摇1min观察泡沫持续时间观察泡沫持续时间若两管产生的泡沫持续时间相同，则药材中含有三萜皂苷；若碱管产生的泡沫持续时间几倍于酸管，则药材中含有甾体皂苷。如何区别三萜皂苷与甾体皂苷：如何区别三萜皂苷与甾体皂苷：三、颜色反应三、颜色反应化学检识化学检识 三萜皂苷三萜皂苷(元元)可在无水可在无水条件下，与强酸如：硫酸、条件下，与强酸如：硫酸、磷酸，磷酸，中强酸如：三氯乙中强酸如：三氯乙酸，酸，Lewis酸如：酸如：ZnCl2、AlCl3、SbCl3、SbCl5等作用，等作用，产生一系列的产生一系列的 颜色变化颜色变化 或荧或荧光，放置后逐渐褪色。光，放置后逐渐褪色。+多烯碳正离子可以利用此性质来检识或鉴别皂苷。可以利用此性质来检识或鉴别皂苷。*注注 意：意：v全饱和的、全饱和的、3-位上又无羟基或羰基的三萜类化位上又无羟基或羰基的三萜类化合物无此性质。合物无此性质。v甾体皂苷有类似的反应现象。甾体皂苷有类似的反应现象。1、醋酐、醋酐-浓硫酸反应浓硫酸反应Liebermann-Burchard Reaction样品溶于醋酐黄红紫兰逐渐褪色三萜皂苷样品溶于醋酐 兰绿逐渐褪色甾体皂苷浓H2SO4-醋酐(20:1)浓H2SO4-醋酐(20:1)2、五氯化锑反应、五氯化锑反应Kahlenberg Reaction样品醇溶液兰、紫、灰试管：滤纸或TLC：样品点样1、喷SbCl5或SbCl3的氯仿溶液2、加热6070oC 兰、灰、灰紫色斑点SbCl5或SbCl3的氯仿溶液3、三氯乙酸反应、三氯乙酸反应Rosen-Heimer Reaction滤纸或TLC：样品点样1、喷25%三氯乙酸-乙醇溶液2、加热60oC显红紫色斑点100oC显红紫色斑点 三萜皂苷甾体皂苷4、氯仿、氯仿-浓硫酸反应浓硫酸反应 Salkowski Reaction样品氯仿溶液氯仿层：红或兰硫酸层：绿色荧光浓H2SO45、冰醋酸、冰醋酸-乙酰氯反应乙酰氯反应 Tschugaeff Reaction样品冰醋酸溶液淡红紫红乙酰氯 +ZnCl2四、四、溶血作用溶血作用v皂苷的水溶液大多能破坏红细胞而有溶血作用。皂苷的水溶液大多能破坏红细胞而有溶血作用。v溶血作用的强弱用溶血指数表示。溶血作用的强弱用溶血指数表示。v溶血指数：在一定条件下，能使血液中红细胞溶溶血指数：在一定条件下，能使血液中红细胞溶 解的最低浓度。解的最低浓度。如溶血指数：薯芋皂苷为如溶血指数：薯芋皂苷为 1:400000，甘草皂苷为，甘草皂苷为 1:4000。溶血现象的原理：溶血现象的原理：皂苷能与细胞中的胆甾醇皂苷能与细胞中的胆甾醇(cholesterol)结合结合成不溶性的分子复合物，成不溶性的分子复合物，破坏了血红细胞的正破坏了血红细胞的正常渗透，使细胞内渗透压增加而崩解。常渗透，使细胞内渗透压增加而崩解。v利用溶血现象可以对皂苷成分进行定性检识。利用溶血现象可以对皂苷成分进行定性检识。v利用溶血现象还可以粗略测定皂苷的含量利用溶血现象还可以粗略测定皂苷的含量(与与 标准品皂苷对照标准品皂苷对照)。皂苷的溶血也与分子结构有关：皂苷的溶血也与分子结构有关：v如：某些双糖链皂苷无溶血，但水解为如：某些双糖链皂苷无溶血，但水解为单糖链皂苷后具有溶血作用。单糖链皂苷后具有溶血作用。v如：如：A环上含有极性基团一般有溶血作用，环上含有极性基团一般有溶血作用，苷元苷元3-OH、16-OH或或C=O时溶血作时溶血作用最强等等。用最强等等。v如：由如：由20(S)-原人参三醇衍生的皂苷有溶血原人参三醇衍生的皂苷有溶血性质，而由性质，而由20(S)-原人参二醇衍生的皂苷则原人参二醇衍生的皂苷则有抗溶血性质。有抗溶血性质。v所以人参总皂苷并不能表现溶血性质。所以人参总皂苷并不能表现溶血性质。原人参三醇原人参三醇另另：v植物粗提物中其它一些成分也有溶血作用，如：植物粗提物中其它一些成分也有溶血作用，如：某些植物的树脂、脂肪酸、挥发油等。某些植物的树脂、脂肪酸、挥发油等。v鞣质则能凝集血红细胞而抑制溶血。鞣质则能凝集血红细胞而抑制溶血。v所以，要判断是否由皂苷引起的溶血，除进一步所以，要判断是否由皂苷引起的溶血，除进一步提纯再检查外，还可以结合其它方、法如与胆甾提纯再检查外，还可以结合其它方、法如与胆甾醇沉淀法醇沉淀法(沉淀后滤液无溶血、沉淀分解后有溶沉淀后滤液无溶血、沉淀分解后有溶血血)来判断。来判断。五、与胆甾醇生成分子复合物沉淀五、与胆甾醇生成分子复合物沉淀三萜皂苷胆甾醇胆甾醇甾体皂苷沉淀沉淀(稳定性较差)（稳定）皂苷可与胆甾醇生成分子复合物沉淀。此性质皂苷可与胆甾醇生成分子复合物沉淀。此性质可用于三萜皂苷和甾体皂苷的检识和提取分离。可用于三萜皂苷和甾体皂苷的检识和提取分离。六、与金属盐的沉淀反应六、与金属盐的沉淀反应 皂苷可以与一些金属离子如皂苷可以与一些金属离子如:Pb2+、Ba2+、Cu2+等生成络合物沉淀，利用此性质可进行皂苷的提取等生成络合物沉淀，利用此性质可进行皂苷的提取和初步分离。和初步分离。酸性皂苷硫酸铵或醋酸或其它中性金属盐类沉淀中性皂苷碱式醋酸或Ba(OH)2或其它碱性金属盐类沉淀一、苷元的提取与分离一、苷元的提取与分离 利用苷元的溶解性质。利用苷元的溶解性质。三萜苷元极性较低，易溶解在弱极性的有机三萜苷元极性较低，易溶解在弱极性的有机溶剂如：石油醚、苯、乙醚、氯仿等，在水、正溶剂如：石油醚、苯、乙醚、氯仿等，在水、正丁醇溶解较难。丁醇溶解较难。第六节第六节 三萜类化合物三萜类化合物 的提取与分离的提取与分离 1、用乙醇、甲醇等溶剂提取，提取后直接用色谱、用乙醇、甲醇等溶剂提取，提取后直接用色谱法进行分离。法进行分离。2、用醇提取后，、用醇提取后，提取物采用极性由低至高的有机提取物采用极性由低至高的有机溶剂如溶剂如 石油醚、乙醚、石油醚、乙醚、氯仿、乙酸乙酯等分类萃氯仿、乙酸乙酯等分类萃取，然后再用色谱等方法分离。取，然后再用色谱等方法分离。3、粗提物制成衍生物再进行分离。、粗提物制成衍生物再进行分离。如：与如：与CH2N2、(CH3C)2O 等反应后再进行分离。等反应后再进行分离。4、将皂苷先水解后，再选用有机溶剂分类提取、将皂苷先水解后，再选用有机溶剂分类提取分离。分离。*注意：注意：如欲得到原生苷元，要注意水解条件，可如欲得到原生苷元，要注意水解条件，可采用温和的采用温和的 酸水解、酸水解、Smith氧化裂解、酶水解等。氧化裂解、酶水解等。5、分离方法多采用色谱方法。、分离方法多采用色谱方法。如：硅胶柱色谱、如：硅胶柱色谱、p-TLC、p-HPLC等。等。二、三萜皂苷的提取与分离二、三萜皂苷的提取与分离 利用苷的溶解性质。利用苷的溶解性质。皂苷易溶解在热水、稀醇、甲皂苷易溶解在热水、稀醇、甲(乙乙)醇、正丁醇、戊醇中，几乎不溶解在醇、正丁醇、戊醇中，几乎不溶解在 石油醚、石油醚、乙醚、乙醚、氯仿、苯等低极性的有机溶剂中。氯仿、苯等低极性的有机溶剂中。主要采用醇或水提取，再采用适当方法分离。主要采用醇或水提取，再采用适当方法分离。1 1、正丁醇萃取法、正丁醇萃取法 人参根粗粉甲醇或乙醇提取提取液浓缩浸膏加水，再用乙醚萃取脱脂水液用水饱和的正丁醇萃取正丁醇液减压蒸干人参总皂苷例：例：2 2、有机溶剂分段沉淀法、有机溶剂分段沉淀法甲醇或乙醇提取提取液适当浓缩，活性炭脱色，远志粗粉过滤滤液浓缩至一定体积加少等量丙酮，静置过滤沉淀(粗品皂苷)例：例：3 3、碱水提取法、碱水提取法 利用皂苷含有酸性羧基的性质，可用稀碱水利用皂苷含有酸性羧基的性质，可用稀碱水溶液提取后再加酸沉淀法得到。溶液提取后再加酸沉淀法得到。H HC CO OO OH HH HH HO OO OTriptergoneTriptergone4 4、铅盐沉淀法、铅盐沉淀法粗皂苷的乙醇溶液过量饱和中性醋酸铅沉淀加适量乙醇和水溶液通H2SPbS沉淀滤液浓缩酸性皂苷滤液过量饱和碱性醋酸铅滤液沉淀加适量乙醇和水溶液通H2SPbS沉淀滤液浓缩中性皂苷5 5、胆固醇沉淀法、胆固醇沉淀法粗皂苷的水溶液沉淀水液胆甾醇（水溶性杂质）石油醚或乙醚索氏回流提取醚液皂苷6 6、色谱分离法、色谱分离法 如：硅胶柱色谱、如：硅胶柱色谱、p-TLC、p-HPLC、大孔吸附树脂、大孔吸附树脂、分配色谱、液滴逆流色谱分配色谱、液滴逆流色谱(DCCC)等等。C18-H 248249nmC18-H 242243nm C=C-C=O:242250nmOH111213 HH OOOHHOHOOHC CCCO 1213O1213 华山 20032003年暑假年暑假 GOODBYEGOODBYE