细菌的遗传分析ppt课件0002

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第第7章章 细菌的遗传分析细菌的遗传分析了解细菌在遗传学研讨中的意义及其研讨方法了解细菌在遗传学研讨中的意义及其研讨方法掌握细菌重组的特点以及如何利用中断杂交、掌握细菌重组的特点以及如何利用中断杂交、转化和转导进展基因定位和作图转化和转导进展基因定位和作图 1第一节第一节 细菌的细胞和染色体细菌的细胞和染色体一、细菌细胞一、细菌细胞细菌细胞比较小,平均每个细胞含有细菌细胞比较小,平均每个细胞含有12条染色体,没有核膜,具有拟核条染色体,没有核膜,具有拟核2细菌染色体大多是双细菌染色体大多是双链环状的链环状的DNA分子,分子,无蛋白质与之结合;无蛋白质与之结合;通常含有一个或多个通常含有一个或多个环状质粒;环状质粒;比较容易接受其它比较容易接受其它DNA片段的插入片段的插入二、细菌染色体及其遗传特点二、细菌染色体及其遗传特点3供体菌和受体菌供体菌和受体菌DNA片段从供体菌转移到受体菌中,这种片段从供体菌转移到受体菌中,这种转移过程是单向的。转移过程是单向的。4内基因子内基因子(endogenote)和外基因子和外基因子(exogenote)只需偶数次交换才干产生有活性的重组子只需偶数次交换才干产生有活性的重组子相反的重组子相反的重组子(reciprocal recombinant)不出现,不出现,所以在选择培育基上只出现一种重组子所以在选择培育基上只出现一种重组子细菌重组中,细菌重组中,有两个特点有两个特点5A genetic exchange occurs between the main bacterial chromosome and a circular DNA(plasmid)that entered the recipient cell.6第二节第二节 大肠杆菌的突变型及挑选大肠杆菌的突变型及挑选一、大肠杆菌的突变类型一、大肠杆菌的突变类型1.合成代谢功能的突变型合成代谢功能的突变型(anabolic function mutants)合成代谢功能合成代谢功能(anabolic functions):野生型:野生型(wild type)在根本培育基上具有合成一切代谢和生长所在根本培育基上具有合成一切代谢和生长所必需的有机物的功能。必需的有机物的功能。营养缺陷型营养缺陷型(auxotroph):野生型品系的某个必需:野生型品系的某个必需基因发生突变,导致不能完成一个特定的生化反基因发生突变,导致不能完成一个特定的生化反响,从而妨碍整个合成代谢功能的实现。响,从而妨碍整个合成代谢功能的实现。7野生型野生型菌落菌落同一菌落同一菌落无性分裂无性分裂原养型原养型不同菌落不同菌落突变突变营养缺陷型营养缺陷型营养缺陷型细菌表型的命名:营养缺陷型细菌表型的命名:突变型:突变型:Met、Thi、Pur 野生型:野生型:Met、Thi、Pur 82.分解代谢功能的突变型分解代谢功能的突变型(catabolic functional mutation)分解代谢功能分解代谢功能(catabolic function):指野生型指野生型E.coli能利能利用比葡萄糖复杂的不同碳源,转化成葡萄糖或其他简用比葡萄糖复杂的不同碳源,转化成葡萄糖或其他简单的糖类,也能把复杂的氨基酸或脂肪分子降解成乙单的糖类,也能把复杂的氨基酸或脂肪分子降解成乙酸或三羧酸循环的中间产物的功能酸或三羧酸循环的中间产物的功能突变型:突变型:Lac、ara、lacZ、lacY野生型:野生型:Lac、ara、lacZ、lacY93.抗性突变型抗性突变型细菌由于某基因的突变而对某些噬菌体或抗菌素细菌由于某基因的突变而对某些噬菌体或抗菌素产生抗性产生抗性(resistant)。突变型:突变型:Strr、T1r野生型:野生型:Strs、T1s10细菌中常用的假设干突变型基因符号ara阿拉伯糖不能利用met甲硫氨酸缺陷型arg精氨酸缺陷型pur嘌呤缺陷型ade腺嘌呤缺陷型pyr嘧啶缺陷型bio生物素缺陷型str链霉素抗性cys半胱氨酸缺陷型thi硫胺缺陷型gal半乳糖不能利用thr苏氨酸缺陷型lac乳糖不能利用ton噬菌体T1抗性leu亮氨酸缺陷型trp色氨酸缺陷型11二、突变型的挑选二、突变型的挑选1.糖发酵性突变株糖发酵性突变株Lac的挑的挑选选Lac Lac依红依红-美蓝美蓝 (EMB培育基培育基)金属光泽紫色菌落金属光泽紫色菌落(Lac)白色菌落白色菌落(Lac)2.营养缺陷型突变的挑选营养缺陷型突变的挑选营养缺陷型突变营养缺陷型突变(X射线、紫外线等射线、紫外线等)完全培完全培育基育基不能生长不能生长的菌落的菌落鉴定突变型鉴定突变型根本培根本培育基育基印迹法印迹法根本培育根本培育基基aa一切菌落一切菌落12第三节第三节 大肠杆菌的性别大肠杆菌的性别1.The discovery of conjugation(接合生殖接合生殖)In 1946,J.Lederberg&E.L.Tatum discovered that E.coli cells can exchange genetic material through the process of conjugation and published in Nature.13菌株菌株A和菌株和菌株B杂交,产杂交,产生野生型生野生型met+bio+thr+leu+(出现频率为出现频率为10-7)这种可以在根本培育基上生这种可以在根本培育基上生长的细菌是由于营养上的互长的细菌是由于营养上的互补呢补呢(即一些物质从一个菌株即一些物质从一个菌株的细胞中走漏出来而为另一的细胞中走漏出来而为另一菌株的细胞所吸收菌株的细胞所吸收)?还是遗?还是遗传物质重组产生的?传物质重组产生的?菌株菌株A:met-bio-thr+leu+菌株菌株B:met+bio+thr-leu-Davis U-tube阐明野生型是遗传阐明野生型是遗传物质交换产生的物质交换产生的152.F因子与高频重组因子与高频重组(1)F因子因子一种环状DNA分子,6104bp,大约占E.coli染色体全长的2,可编码94个蛋白质分子,与细菌的结协作用有关;供体细胞含有F因子,称为F菌株,受体细胞不含F因子,称为F菌株;16F因子构造图因子构造图:F因子包含3个区域:转移起点;致育基因,编码构成F纤毛的蛋白质;配对区,使F因子可以与细菌染色体中多处序列配对,经过交换整合到染色体中。17F+菌株与菌株与F-菌株的接合菌株的接合18F因子的特点因子的特点:F因子具有构成性伞毛的因子具有构成性伞毛的基因,使得基因,使得F与与F结合;结合;F与与F、F与与F间间不结合不结合FF杂交杂交19F因子的繁衍因子的繁衍:细菌分裂使得细菌分裂使得F细菌产生细菌产生F细菌,细菌,F细细菌产生菌产生F细菌;细菌;F细菌丧失细菌丧失F因子,成为因子,成为F细菌细菌(acriflavine处置处置);F细菌与细菌与F细菌混合培育时,细菌混合培育时,F细菌可细菌可以转变为以转变为F细菌;细菌;F与与F杂交,只需杂交,只需F因子的传送,细菌的因子的传送,细菌的染色体并不转移,二者的重组频率只需染色体并不转移,二者的重组频率只需10-6,因此因此F品系称为低频重组系品系称为低频重组系Lfr。20 (2)高频重组高频重组(Hfr)nIn 1950,Cavalli-Stbrza treated an F+strain of E.coli K12 with nitrogen mustard,a potent chemical known to induce mutations.nFrom these treated cells,he recovered a strain of donor bacteria that underwent recombination at a rate of 10-4.nIn 1953,W.Hayes isolated another strain demonstrating a similar elevated frequency.nBoth strains were designated Hfr,or high-frequency recombination.Because Hfr-cells behave as chromosome donors,they are a special class of F+cells.21FFFHfrFF一切一切很少很少22F因子整合到因子整合到细菌染色体细菌染色体Hfr与受体细与受体细菌染色体的等菌染色体的等位基因间可以位基因间可以重组重组(10-2)23F细胞得到的只是部分细胞得到的只是部分F因子,其他部分依赖于整因子,其他部分依赖于整条条Hfr染色体的转移。这样在染色体的转移。这样在HfrF-杂交后代大多杂交后代大多数重组子仍为数重组子仍为FHfr细胞和细胞和F-细胞之间的接合,普通很少有整条细胞之间的接合,普通很少有整条Hfr染染色体转入色体转入F细胞细胞(pilus容易断裂容易断裂),因此:,因此:F受体细胞只接受部分的供体染色体,这样的细胞称受体细胞只接受部分的供体染色体,这样的细胞称为部分二倍体为部分二倍体(partial diploid)或半合子或半合子(merozygote)HfrFF很少很少?24第四节第四节 中断杂交与重组作图中断杂交与重组作图Wollman and Jacob(1954)设计实验,证明基因从设计实验,证明基因从Hfr细胞按细胞按次序转入次序转入F细胞,可以根据基因进入细胞,可以根据基因进入F细胞的时间和次细胞的时间和次序制造基因图谱。序制造基因图谱。一、中断杂交实验原理一、中断杂交实验原理F.JacobE.Wollman25Hfr thr+leu+azirlac+gal+strsF-thr-leu-azislac-gal-strr间隔一定时间取样,搅间隔一定时间取样,搅拌以中断杂交,稀释菌拌以中断杂交,稀释菌液,防止再度配对液,防止再度配对根本培育基根本培育基链霉素链霉素重组子重组子thr+leu+strr中断杂交实验中断杂交实验26中断杂交实验结果中断杂交实验结果基因基因转入时间转入时间(min)频率频率thr+(苏氨酸苏氨酸)8100leu+(亮氨酸亮氨酸)8.5100azs(叠氮化钠叠氮化钠)990Tis(T1s)1170lac+(乳糖利用乳糖利用)1840gal+(半乳糖利用半乳糖利用)2525二、中断杂交作图二、中断杂交作图27(T1S)28O azi ton lacgalF致育因子致育因子(F+)最后转移到受体,是线性染色体最后转移到受体,是线性染色体的最后一个单位。的最后一个单位。09111825Oazitonlacgal根据中断杂交技术作出的根据中断杂交技术作出的E.coli连锁图连锁图基因图距单位是分钟基因图距单位是分钟29不同不同Hfr菌株进展中断杂交实验,都可以作成菌株进展中断杂交实验,都可以作成连锁图,可是基因转移的顺序、转移起点和转连锁图,可是基因转移的顺序、转移起点和转移方向却很不一样。移方向却很不一样。Why?大肠杆菌的染色体呈环形大肠杆菌的染色体呈环形表表 几个几个 Hfr 菌株的基因顺序菌株的基因顺序 菌株菌株 转转 移移 顺顺 序序 Hfr H O thr azi lac tsx gal trp mal xyl metB thi F C O tsx lac azi thr thi metB xyl mal trp gal F J4 O thi metB xyl mal trp gal tsx lac azi thr F P72 O metB thi thr azi lac tsx gal trp mal xyl F 30几个几个 Hfr 菌株的基因顺序菌株的基因顺序 菌株菌株 转转 移移 顺顺 序序 Hfr H O thr azi lac tsx gal trp mal xyl metB thi F C O tsx lac azi thr thi metB xyl mal trp gal F J4 O thi metB xyl mal trp gal tsx lac azi thr F P72 O metB thi thr azi lac tsx gal trp mal xyl F 3132重组作图重组作图(recombination mapping)是根据基因间重是根据基因间重组率进展基因定位组率进展基因定位三、重组作图三、重组作图33Hfr lac+ade+strs lacadestrr F例如:有两个基因,例如:有两个基因,lac和和ade,根据中断杂交实验,根据中断杂交实验,知道这两基因是严密连锁的,而且知道这两基因是严密连锁的,而且ade是在是在lac之后之后进入进入F受体的。受体的。相互作用相互作用60分钟分钟根本培育基根本培育基(链霉素链霉素)重组子重组子lac+ade+strr34Hfr lac+ade+转入受体细胞后的表现转入受体细胞后的表现A.由于供体由于供体Hfr转入片断不能独立复制,假设未进入转入片断不能独立复制,假设未进入F受体受体的基因组中去,那么在以后的细胞分裂中就丧失了的基因组中去,那么在以后的细胞分裂中就丧失了B.如已进入如已进入F基因组,而且在缺乏腺嘌呤的培育基上表型基因组,而且在缺乏腺嘌呤的培育基上表型为为F lacade,阐明是这两个基因之外发生双交换的产,阐明是这两个基因之外发生双交换的产物,在物,在lacade两基因之间并未发生重组两基因之间并未发生重组35因此因此lac与与ade之间的图距应为:之间的图距应为:Lac-adelac-ade+lac+-ade+lac-ade+100lac-ade+ade+100C.只需在缺乏腺嘌呤的完全培育基上选出只需在缺乏腺嘌呤的完全培育基上选出lac ade才是其真正的重组子才是其真正的重组子36假设基因间隔较远用中断作图很有效;如基因间假设基因间隔较远用中断作图很有效;如基因间隔较近,用中断杂交不准确隔较近,用中断杂交不准确中断杂交可为重组作图提供某些基因之间的连锁中断杂交可为重组作图提供某些基因之间的连锁关系及其前后次序的根据关系及其前后次序的根据重组作图与中断杂交作图重组作图与中断杂交作图37重组特点:重组特点:高等生物双交换的频高等生物双交换的频率大大低于单交换率大大低于单交换微生物那么四交换大微生物那么四交换大大低于双交换大低于双交换利用三点检验定位严密连锁基因利用三点检验定位严密连锁基因381、a+b+c-a-b-c+(正交组正交组合合)2、a-b-c+a+b+c-(反交组反交组合合)关键是确定哪个基因处于中间,关键是确定哪个基因处于中间,a-b-c还是还是a-c-b?Donor Recipientacbacb39cross 1:a+b+c-a-b-c+cross 2:a-b-c+a+b+c-If order is a-b-c,then the frequency of a+b+c+in cross 1=a+b+c+in cross 2;If order is a-c-b,then the frequency of a+b+c+in cross 1 a+b+c+in cross 242带有细菌基因的环状带有细菌基因的环状F因因子称为子称为F因子因子(F-factor)1.F因子因子F因子在细菌染色体上因子在细菌染色体上插入位置不同而构成不同插入位置不同而构成不同的的Hfr品系,由此可构成品系,由此可构成不同的不同的F因子因子第五节第五节 F因子和性导因子和性导不同的不同的F因子携带细菌的不同基因因子携带细菌的不同基因假设假设F因子本身的基因丧失,转移就能够停顿因子本身的基因丧失,转移就能够停顿F因子不存在蛋白质外壳的包装问题,可以携带不因子不存在蛋白质外壳的包装问题,可以携带不同长度的同长度的DNA片段片段F因子和因子和F一样能把一样能把F因子转移给因子转移给F细胞,同时也细胞,同时也能转移细菌基因,其结果使能转移细菌基因,其结果使F变成变成F菌株,并构成菌株,并构成部分二倍体部分二倍体F因子的特点:因子的特点:442.性导性导(sexduction)性导指利用性导指利用F因子将供体细胞的基因因子将供体细胞的基因导入受体构成部分二倍体的过程导入受体构成部分二倍体的过程HfrFconjugationFFsexductionthr+leu+strsthr-leu-strr45A Hfr:thr+leu+strsF:thr-leu-strrB:F:thr+leu+strsF:thr-leu-strr根本培育基根本培育基(strr)挑选出挑选出F:thr+leu+strr挑选出挑选出F:thr+leu+strrF无活无活性性F有活性有活性F-F-46性导在大肠菌株的遗传学分析中的作用性导在大肠菌株的遗传学分析中的作用1.由性导构成的部分二倍体假设不发生重组,那么:由性导构成的部分二倍体假设不发生重组,那么:F因子能自主复制,可在细菌细胞中延续下去因子能自主复制,可在细菌细胞中延续下去性导所构成的部分二倍体可用作不同突变型之间的互补性导所构成的部分二倍体可用作不同突变型之间的互补检验,以确定两个突变型是同一基因或是两个不同基因检验,以确定两个突变型是同一基因或是两个不同基因察看由性导构成的杂合部分二倍体中某一性状的表现,察看由性导构成的杂合部分二倍体中某一性状的表现,可以确定这一性状其等位基因的显隐性关系可以确定这一性状其等位基因的显隐性关系不同的不同的F因子带有不同的细菌因子带有不同的细菌DNA片段,因此利用不片段,因此利用不同的同的F因子可以测定不同基因在一同性导的频率,并因子可以测定不同基因在一同性导的频率,并以此来作图以此来作图472.假设部分二倍体中出现重组,那么:假设部分二倍体中出现重组,那么:F因子同受体细菌染色体之间发生单交换,构成因子同受体细菌染色体之间发生单交换,构成Hfr品系,同时品系,同时F因子上所携带的基因发生重组因子上所携带的基因发生重组假设发生双交换,假设发生双交换,F因子的细菌基因和受体染色因子的细菌基因和受体染色体上的等位基因之间发生交换体上的等位基因之间发生交换,那么构成新的那么构成新的F品品系系48三种不同的致育因子的相互关系三种不同的致育因子的相互关系F+HfrFF-4950第六节第六节 转化与转导作图转化与转导作图一、细菌的转化与作图一、细菌的转化与作图受体部位受体部位(receptor site):外源:外源DNA片段进入受体细菌片段进入受体细菌构成暂时性通道的特定区域构成暂时性通道的特定区域感受态细胞感受态细胞(competence cell):能接受外源:能接受外源DNA分子分子并被转化的细菌细胞并被转化的细菌细胞感受态因子感受态因子(competence factor):促进转化作用的酶或:促进转化作用的酶或蛋白质分子蛋白质分子外源外源DNA的转化过程:的转化过程:双链双链DNADNA分子与受体部位进分子与受体部位进展可逆性结合;展可逆性结合;DNADNA分子进入细胞,并要防分子进入细胞,并要防止受体止受体DNADNA酶的消化;酶的消化;双链双链DNADNA转变为单链转变为单链DNADNA,其中一条链被降解;其中一条链被降解;另一条链与染色体同源区另一条链与染色体同源区域构成杂合域构成杂合DNADNA分子;分子;杂合杂合DNADNA经复制、分别后构经复制、分别后构成子代的转化子。成子代的转化子。5152利用转化作图n察看两个基因同时转化的频率,判别两者能否连锁;n确定连锁关系后,经过转化后外源片段与受体基因发生重组来确定遗传间隔。n同时转化的两个基因不一定都是连锁的,如何判别两个基因是位于同一片段还是位于不同的片段同时转化一个宿主细胞?A BBAABAB稀释稀释10倍倍后再转化后再转化ABABABABABAB转化转化AB共转化共转化频率频率AB共转化频率共转化频率也下降也下降10倍倍BABABBAAAB转化转化AB共转化共转化频率频率稀释稀释10倍倍后再转化后再转化AB共转化频共转化频率下降率下降100倍倍Naster等用枯草杆菌的一个菌株等用枯草杆菌的一个菌株trp2+his2+tyr1+作作为供体,提取为供体,提取DNA向受体向受体trp2-his2-tyr2-转化转化,计算计算基因之间的重组值基因之间的重组值2390/17990=0.13418+1180+685+107=239011940+3660=15600his2-tyr18125/20192=0.402600+1180+3660+685=812511940+107=12047trp2-tyr16785/19905=0.342600+107+3660+418=678511940+1180=13120trp2-his2重组体数重组体数/总数总数(+-)或或(-+)(+)重组值重组值重组型重组型亲本型亲本型11801072600418685366011940总数总数tyr1his2trp2转化体类别转化体类别座座 位位(供体供体)trp2+his2+tyr1+trp2-his2-tyr1-(受受体体)3个基因的次序为:个基因的次序为:trp2 his2 tyr1trp2his2tyr1341356二、转导与作图二、转导与作图转导转导(transduction)是指以噬菌体为媒介,将细菌的小是指以噬菌体为媒介,将细菌的小片段染色体或基因从一个细菌转移到另一细菌的过程片段染色体或基因从一个细菌转移到另一细菌的过程Norton Zinder and Lederberg(1952)were investigating possible recombination in the bacterium salmonella typhimurium(鼠伤寒沙门氏菌鼠伤寒沙门氏菌)LA22:phetrptyr+his+LA2:phe+trp+tyrhis57LA22:phetrptyr+his+LA2:phe+trp+tyrhis根本培育基根本培育基无无无无野生型野生型105These observations at first suggested that recombination involved was the type observed earlier in conjugative strains of E coli.5859进一步实验过滤因子属大肠杆菌的进一步实验过滤因子属大肠杆菌的P22(沙门氏沙门氏杆菌噬菌体杆菌噬菌体)过滤因子的大小和质量与过滤因子的大小和质量与P22一样一样过滤因子用抗过滤因子用抗P22血清处置后失活血清处置后失活用抗性品系替代用抗性品系替代LA2敏感品系,在敏感品系,在U型管两端均无野型管两端均无野生型重组体生型重组体LA22是带有是带有P22原噬菌体的溶源性细菌,原噬菌体的溶源性细菌,LA2是对是对P22敏感的非溶源性细菌敏感的非溶源性细菌60Lysogenic LA22 with P22Few LA22 converts into lytic cycleCutting LA2 DNA into fragmentsSynthesis of P22s proteinP22 released from LA22 and infects LA261One fragment of LA2 was packaged into P22Defective P22 turns back to infect LA22DNA from LA2(trp+)was integrated into LA22s chromosome6263641.普遍性转导与作图普遍性转导与作图噬菌体所携带的供体噬菌体所携带的供体(细菌细菌)染色体片段是完全随染色体片段是完全随机的,即供体基因组中一切基因具有同等时机被机的,即供体基因组中一切基因具有同等时机被转导构成部分二倍体,经交换和重组后,构成转转导构成部分二倍体,经交换和重组后,构成转导频率大致相等的不同转导子,这种转导称为普导频率大致相等的不同转导子,这种转导称为普遍性转导遍性转导(general transduction)转导转导局限性转导局限性转导普遍性转导普遍性转导65共转导或并发转导共转导或并发转导(cotransduction):指两个:指两个基因同时转导的景象基因同时转导的景象双因子转导双因子转导(two-factor transduction)实验:就是每次实验:就是每次察看两个基因的转导,经过每两个基因的共转导频察看两个基因的转导,经过每两个基因的共转导频率确定这些基因在染色体上的顺序率确定这些基因在染色体上的顺序假设两个基因共转导的频率愈高,阐明两个基因连假设两个基因共转导的频率愈高,阐明两个基因连锁愈严密,相反共转导频率愈低,那么阐明两个基锁愈严密,相反共转导频率愈低,那么阐明两个基因间隔愈远因间隔愈远66例如,用大肠杆菌的例如,用大肠杆菌的P1噬菌体进展以下转导噬菌体进展以下转导实验,测定实验,测定thr+1eu+aziS的连锁关系的连锁关系三因子转导:只做一次实验就可以推出三因子转导:只做一次实验就可以推出3个基个基因的次序因的次序67P1噬菌体噬菌体E coli(thr+1eu+azir)E coli(thr-1eu-azis)thrleu azileuazithr根本培育基根本培育基不含不含leu100%leu+,50%azir,2%thr+不含不含thr100%thr+,3%leu+,0%azir哪个图正确?哪个图正确?68以大肠杆菌以大肠杆菌trpA+supC+pyrF+细胞作为供体,细胞作为供体,trpA-supC-pyrF-作受体,由作受体,由P1噬菌体作为载体进展转导。噬菌体作为载体进展转导。首先选择首先选择supC+,然后检测然后检测supC+转导过程中其他两个转导过程中其他两个基因被转导的情况,结果如下:基因被转导的情况,结果如下:supC+trpA+pyrF+36supC+trpA+pyrF-114supC+trpA-pyrF+0supC+trpA-pyrF-4536033个基因的次序为个基因的次序为supC trpA pyrF最难转导,中间最难转导,中间发生交换的结果发生交换的结果69共转导频率:共转导频率:supC+trpA+(36114)/603=0.25supC+pyrF+36/603=0.06supC+trpA+pyrF+supC trpA pyrFsupC+trpA+pyrF+supC trpA pyrFsupC+trpA+pyrF+supC trpA pyrFsupC+trpA+pyrF+supC trpA pyrFsupC+trpA+pyrF+36supC+trpA+pyrF114supC+trpA pyrF+0supC+trpA pyrF453d=L(1-x1/3)两个基因严密连锁的物理间隔为:两个基因严密连锁的物理间隔为:d:同一染色体两个基因之间的图距同一染色体两个基因之间的图距L:转导转导DNA的平均长度的平均长度x:两个基因之间的共转导频率两个基因之间的共转导频率71722.局限性转导与作图局限性转导与作图这类噬菌体只能转导供体基因组中的特定基因这类噬菌体只能转导供体基因组中的特定基因如温暖噬菌体如温暖噬菌体作为一种附加体,既可以作为一种附加体,既可以自主形状存在,也可以整合到细菌基因组自主形状存在,也可以整合到细菌基因组(特定位置特定位置attB处处),构成原噬菌体,构成原噬菌体The insertion of phage73The excision of phage7475局限性转导:这种转导仅限于接近原噬菌局限性转导:这种转导仅限于接近原噬菌体附近的基因,即体附近的基因,即噬菌体能专门转导大噬菌体能专门转导大肠杆菌的肠杆菌的galgal或或biobio基因。基因。转导子转导子transductant:经过转导将外源:经过转导将外源基因整合到本身基因组的受体细胞。基因整合到本身基因组的受体细胞。76n接合接合conjugation:两种细菌经过:两种细菌经过F因因子转移子转移DNA的过程。的过程。n性导性导sexduction:经过:经过F因子将供体因子将供体细菌的基因导入受体菌的过程。细菌的基因导入受体菌的过程。n转化转化transformation:外源:外源DNA分子分子直接进入受体细胞的过程。直接进入受体细胞的过程。n转导转导transduction:经过噬菌体将:经过噬菌体将DNA转入宿主细胞并产生新性状的过程。转入宿主细胞并产生新性状的过程。n转染转染transfection:外源基因经过病:外源基因经过病毒进入真核细胞而实现遗传转化。毒进入真核细胞而实现遗传转化。接合?转化?转导?性导?7778总总 结:结:细菌是有性别的细菌是有性别的:F因子因子(F+/Hfr/F);供体和受;供体和受体,一方向传送遗传物质;中断杂交和重组作图体,一方向传送遗传物质;中断杂交和重组作图(Hfr);性导;性导(F)细菌重组的特点:偶数双交换;环状整合细菌重组的特点:偶数双交换;环状整合转化转化(外源外源DNA进入细菌细胞进入细菌细胞);转导;转导(利用噬菌体利用噬菌体转导细菌转导细菌DNA的过程的过程)
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