2011作业指导书合本1

作业指导书 文件编号： JSFY-JYK-ZY-001发布日期2011年11月30日B版修订号 O批准日期2011年11月30日标题：丙氨酸氨基转移酶测定操作规程第1页共2页编写人：崔福强审核人：鲍红梅批准人：崔福强 丙氨酸氨基转移酶测定操作规程临床意义 ALT是氨基酸代谢中所涉及的一个酶，分布于很多组织。在肝脏组织与肾脏组织中含量最高。组织破坏会使细胞内的酶进入血液循环。很多种疾病，比如肝炎、单核细胞增多症和肝硬化，都会发现血清ALT升高。但有些疾病例如心肌梗死，ALT不会特别高。因此ALT被认为是肝脏物异性酶。 实验原理 本法为IFCC推荐的动力学测定方法，反应式如下： L丙氨酸酮戊二酸ALT 丙酮酸L-谷氨酸 丙酮酸NADHH+ LDH L-乳酸NAD+ 标本的收集与处理 患者准备：无特殊要求。 类型：无溶血的血清或肝素化的血浆。轻微的溶血不会明显的影响结果，可是，红细胞内的ALT是血清中的35倍。收取标本后尽快分离血清。EDTA血清也可以用。应用EDTA血浆为标本结果乘以1.02将与血清标本的结果一致。 标本的稳定性：血清中的ALT在04C稳定3天。当存放于20C稳定期长于3天。EDTA血浆中的ALT放在室温（1530C）或冰箱（28C）可以稳定7天。 仪器与材料 北京松上A6半自动生化分析仪 山东潍坊三维丙氨酸氨基转移酶（ALT） 参与反应成分的最终浓度： 1.试剂R1 TRIS缓冲液（PH 7.5） 100mmol/L L-丙氨酸 500mmol/L 乳酸脱氢酶（LDH） 1200U/L 2.试剂R2 酮戊二酸 15mmol/L NADH 0.18mmol/L 作业指导书文件编号： JXFY-JYK-ZY-001发布日期2011年11月30日A 版修订号0批准日期2011年11月30日标题：丙氨酸氨基转移酶测定第2页共2页编写人：崔福强审核人：鲍红梅批准人：崔福强 注意1. 可根据仪器要求按比例改变标本、试剂用量。2. 标本中ALT的吸光度变化值A/分0.30时，将标本用生理盐水1：9稀释后再测定，结果乘以10。3. 若试剂空白吸光度小于0.800说明试剂失效，请勿使用。4. 生化仪光径不为1cm时，F4180/光径cm.5. 本试剂中含有叠氮钠，请勿吸入并避免与皮肤、粘膜接触。6. 实验废液因含有血清，须先进行消毒处理，再用大量水冲洗排放。 试剂准备将4份R1与1份R2混合，28C密封避光保存可稳定4周。工作液预先保温至37C 操作程序1. 打开仪器的电源开关（仪器的背面）2. 面板上的屏幕上面板上的屏幕上出现选择测试项目类别，选肝功类进入。3. 进入选择菜单，选ALT项目，然后屏显试验所有参数。4. 等温度达到37C时，进入，然后吸入空白，然后样本测定。 计算无需计算，结果自动以U/L显示。 报告结果参考正常值 男性：42U/L 女性32U/L注意事项操作过程的限制性：ALT的线性范围是01200U/L。样品浓度超过线性范围应稀释重做。可以手工加一份血清4份生理盐水，轻轻地混匀，当常规标本，结果乘以5。作业指导书文件编号： JSFY-JYK-ZY-002发布日期2011年11月30日B版修订号0批准日期2011年11月30日标题：总胆红素测定操作规程第1页共2页编写人：崔福强审核人：鲍红梅批准人：崔福强 总胆红素测定操作规程临床意义总胆红素增高临床上表现有黄疸，超过20.1umol/L时有临床意义，增高到34.2umol/L表现出黄疸体征。红细胞大量破坏、胆道阻塞、肝脏疾病，均可导致血中胆红素增高而引起黄疸。实验原理对氨基苯磺酸HCL+NaNO2氯化重氮苯横酸NaCL总胆红素氯化重氮苯横酸O偶氮胆红素标本的收集与处理患者准备：空腹类型：新鲜不溶血血清或血浆均可，样本收集后应尽快测定，注意避光。仪器与材料 北京松上A6半自动生化分析仪潍坊三维总胆红素定量检测试剂试剂盒的组成：1. 试剂R盐酸 0.7mol/L 对氨基苯磺酸 20umol/L柠檬酸 0.7 mol/L 咖啡因 0.18 mol/L 2. NaNO2溶液 20mmol/L 试剂准备根据用量将试剂R与NaNO2溶液按50：1的比例混合均匀，即为工作液，置28C避光存放，可稳定1个月。基本参数温度 37C 方式 终点法 波长 570nm光径 1cm 试剂量 600UL 标本量 40UL反应时间 5分钟 系数 208操作程序1.打开仪器的电源开关（仪器的背面）2.面板上的屏幕上面板上的屏幕上出现选择测试项目类别，选肝功类进入。 3.进入选择菜单，选DBIL项目，然后屏显试验所有参数。作业指导书文件编号文件编号： JXFY-JYK-ZY-002发布日期2011年11月30日B版修订号0批准日期2011年11月30日标题：总胆红素检测标准操作规程第2页共2页编写人：崔福强审核人：鲍红梅批准人：崔福强 4.等温度达到37C时，进入，然后吸入空白，然后样本测定。计算无需计算，结果自动以umol/L显示。 报告结果 参考正常值 5.020.1umol/L 注意事项1. 试剂量和标本量可因仪器要求按比例增减。2. 本法线性范围可达513.0umol/L超过该范围的标本用生理盐水稀释1倍再测，结果乘以2。3. 血中胆红素对光敏感，保存及实验过程中尽量避光。4. 实验室废液因有血清，须先进行消毒处理，再用大量水冲洗排放。作业指导书文件编号： JSFY-JYK-ZY-003发布日期2011年11月30日B版修订号0批准日期2011年11月30日标题：直接胆红素测定标准操作规程第1页共2页编写人：崔福强审核人：鲍红梅批准人：崔福强 直接胆红素测定标准操作规程 临床意义 直接胆红素经过肝细胞加工后，其实质是由胆红素n分子与1到2个葡萄醛酸分子单独酯化的结构，能易溶于水，可通过肾脏排泄，能直接与重氮试剂反应。在没有加速剂存在时，血清与重氮试剂反应所生成的红色偶氮胆红素为直接胆红素。直接胆红素增高临床上多见于肝细胞受损，对肝内外胆道阻塞、肝炎、急性黄疸、肝萎缩等有重要的临床意义。实验原理 对氨基苯磺酸HCL+NaNO2氯化重氮苯磺酸NaCL 直接胆红素氯化重氮苯磺酸偶氮胆红素 标本收集与处理 患者准备：空腹 类型：新鲜不溶血清或血浆均可。 标本的稳定性：胆红素对光的敏感度与温度有关，血标本应避光置冰箱保存，标本保存冰箱可稳定3天，70C暗处保存，稳定3个月。 仪器与材料 北京松上A6半自动生化分析仪 潍坊三维直接胆红素测定试剂1.试剂R盐酸 0.3mol/L 对氨基苯磺酸 30umol/L2. NaNO2溶液 10mmol/L试剂准备根据用量将试剂R与NaNO2溶液按50：1的比例混合均匀，即为工作液，置28C避光存放，可稳定1个月。基本参数温度 37C 方式 终点法 波长 570nm光径 1cm 试剂量 600UL 标本量 40UL反应时间 5分钟 系数 170 操作程序1.打开仪器的电源开关（仪器的背面）2.面板上的屏幕上面板上的屏幕上出现选择测试项目类别，选肝功类进入。3.进入选择菜单，选TBIL项目，然后屏显试验所有参数。4.等温度达到37C时，进入，然后吸入空白，然后样本测定。作业指导书文件编号： JXFY-JYK-ZY-003发布日期2011年11月30日B版修订号0批准日期2011年11月30日标题：直接胆红素测定标准操作规程第1页共2页编写人：崔福强审核人：鲍红梅批准人：崔福强 计算无需计算，结果自动以umol/L显示。 报告结果 参考正常值 0.36.8umol/L 注意事项5. 试剂量和标本量可因仪器要求按比例增减。6. 本法线性范围可达256.5umol/L超过该范围的标本用生理盐水稀释1倍再测，结果乘以2。7. 血中胆红素对光敏感，保存及实验过程中尽量避光。8. 实验室废液因有血清，须先进行消毒处理，再用大量水冲洗排放。作业指导书文件编号： JSFY-JYK-ZY-004发布日期2011年11月30日B版修订号0批准日期2011年11月30日标题：总蛋白测定操作规程第1页共2页编写人：崔福强审核人：鲍红梅批准人：崔福强 总蛋白测定操作规程临床意义蛋白质为不可渗透的大胶质分子，并带有许多电荷，分为清蛋白和球蛋白二类，对于维持渗透压入保持水份平衡极为重要，并可维持血液的酸碱度。血清总蛋白增加常见于严重腹泻、呕吐、肾上腺皮质功能减退等，血液中水份增加、营养不良、肝脏疾病及肾病综合症可导致总蛋白水平降低。实验原理在碱性溶液中，血清蛋白与二价铜离子反应生成有色复合物（双缩脲反应），颜色深浅与总蛋白的浓度成比例关系。标本收集与处理应为血清，28C保存可稳定1周。仪器与材料北京松上A6半自动生化分析仪潍坊三维总蛋白测定试剂试剂盒组成碘化钾 30mmol/L 酒石酸钾钠 100 mmol/L 硫酸铜 30 mmol/L 氢氧化钠 0.6 mol/L试剂准备无需配制，开瓶即用。基本参数方式 终点法 标本量 10ul 温度 37C试剂量 1.0ml 波长 546nm 反应时间 5分钟操作程序1.打开仪器的电源开关（仪器的背面）2.面板上的屏幕上出现选择测试项目类别，选肝功类进入。3.选择总蛋白，进入测试。等温度达到37C时，然后吸入空白，然后样本测定。计算无需计算，结果自动以umol/L显示。 报告结果参考正常值 60.0-83.0g/L 注意事项1.标本中总蛋白浓度大于100g/L应将标本用生理盐水稀释再测，结果乘以稀释倍数。2.实验室废液因有血清，须先进行消毒处理，再用大量水冲洗排放。作业指导书文件编号： JSFY-JYK-ZY-005发布日期2011年11月30日B版修订号0批准日期2011年11月30日标题：白蛋白测定操作规程第1页共2页编写人：崔福强审核人：鲍红梅批准人：崔福强 白蛋白测定操作规程（溴甲酚绿法） 临床意义 白蛋白是血清中清蛋白，是主要的蛋白质成份，是一个通用的蛋白营养指标，白蛋白降低，常伴随着总蛋白降低，常见于营养不良，慢性胃肠道疾病等，糖尿病、甲状腺功能亢进、高烧、外伤等可造成蛋白消耗过多，高白蛋白血症常见于脱水或血液浓缩。 测定原理 在PH4.2酸性条件下，白蛋白和溴甲酚绿结合，生成绿色复合物，可用比色法测定白蛋白的含量。 标本收集与处理 血清，血清中白蛋白在28C保存可稳定 1周。 仪器与材料北京松上A6半自动生化分析仪 潍坊三维白蛋白测定试剂试剂准备 液体单一试剂，无需配制，开瓶即用。基本参数温度 37C 方式 终点法 波长 570nm试剂量 1500UL 标本量 10UL 反应时间 3分钟 操作程序 操作程序1.打开仪器的电源开关（仪器的背面）2.面板上的屏幕上面板上的屏幕上出现选择测试项目类别，选肝功类进入。3.进入选择菜单，选ALT项目，然后屏显试验所有参数。4.等温度达到37C时，进入，然后吸入空白，然后样本测定。作业指导书文件编号： JXFY-JYK-ZY-005发布日期2011年11月30日B版修订号0批准日期2011年11月30日标题：白蛋白测定操作规第2页共2页编写人：崔福强审核人：鲍红梅批准人：崔福强 计算无需计算，结果自动以umol/L显示。 报告结果 参考正常值 0.36.8umol/L 注意事项9. 试剂量和标本量可因仪器要求按比例增减。10. 本法线性范围可达256.5umol/L超过该范围的标本用生理盐水稀释1倍再测，结果乘以2。11. 血中胆红素对光敏感，保存及实验过程中尽量避光。12. 实验室废液因有血清，须先进行消毒处理，再用大量水冲洗排放。作业指导书文件编号： JSFY-JYK-ZY-006发布日期2011年11月30日B版修订号0批准日期2011年11月30日标题：HBsAg测定操作规程第1页共1页编写人：崔福强审核人：鲍红梅批准人：崔福强 HBsAg测定操作规程（酶联免疫夹心法） 原理 在微孔板条上预包被纯化乙肝表面抗体（抗HBs），配以酶标记抗体（抗HBsHRP）及TMB等其它试剂，采用夹心法原理检测人血或血浆中的乙型肝炎病毒表面抗原 HRP为辣根过氧化物酶 TMB为四甲基联苯胺 标本收集与处理 血清或血浆 试剂 潍坊三维乙肝病毒表面抗原诊断试剂盒 操作步骤1. 配制洗涤液：用蒸馏水或去离子水将浓缩洗涤液1：25稀释至500ml备用。2. 加样：设空白对照1孔，阴、阳对照各2孔。分别加阴、阳性对照各50ul(1滴)和50ul待测样本于相应孔内。3. 加酶：除空白对照孔外，每孔加50ul（1滴）酶标记物，轻轻振荡混匀，用封板膜将板孔封好。4. 温育：置37水浴30分钟。5. 洗涤：手 工：扣去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置20秒，甩干，重复4次后拍干。 洗板机：选择4次洗涤程序，洗板后拍干。6. 显色：每孔加底物液A、B各50ul（1滴），轻轻振荡混匀后，置37避光显色15分钟。7. 测定：每孔加终止液50ul(1滴)，轻拍混匀，用酶标仪单仪波长450nm或双波长450nm/630nm测定各孔OD值（在30分钟内完成测定）；用单波长测定时需空白对照孔凋零。结果判定1. 临界值（C.O.）=2.1阴性对照OD均值（阴性对照OD值小于0.05时，以0.05计算）2. 结果判定：样本OD值S/C.O.1者判为HBsAg阳性；反之判为HBsAg阴性。注意事项1. 试剂及待测样本用前先放室温平衡30分钟左右；未用完的板条应及时封存于加有干燥剂的自封袋中。2. 含血球的标本易出现假阳性，应尽量避免使用。3. 滴加试剂前，应将滴瓶翻转数次混匀，滴加时瓶身应保持垂直并匀速加样。4. 洗涤要充分，各孔均须加满，防止孔口内游离酶不能洗净。若浓缩洗涤液出现结晶，可于37放至溶解。5. 所有样本和废弃物都应按传染源处理。6. 不同批号的试剂不可混用。贮存条件和有效期1.贮存条件：28 2.有效期：12个月作业指导书文件编号： JSFY-JYK-ZY-007发布日期2011年11月30日B版修订号0批准日期2011年11月30日标题：抗HBs测定操作规程第1页共2页编写人：崔福强审核人：鲍红梅批准人：崔福强 抗HBs测定操作规程（酶联免疫夹心法） 原理 在微孔板条上预包被纯化乙肝表面抗原（HBsAg），配以酶标记抗体（HBsAgHRP）及TMB等其它试剂，采用夹心法原理检测人血清或血浆中的乙型肝炎病毒表面抗体（抗HBs）。 HRP为辣根过氧化物酶 TMB为四甲基联苯胺标本收集与处理 血清或血浆 试剂 潍坊三维乙肝病毒表面抗体诊断试剂盒 操作步骤8. 配制洗涤液：用蒸馏水或去离子水将浓缩洗涤液1：25稀释至500ml备用。9. 加样：设空白对照1孔，阴、阳对照各2孔。分别加阴、阳性对照各50ul(1滴)和50ul待测样本于相应孔内。10. 加酶：除空白对照孔外，每孔加50ul（1滴）酶标记物，轻轻振荡混匀，用封板膜将板孔封好。11. 温育：置37水浴30分钟。12. 洗涤：手 工：扣去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置20秒，甩干，重复4次后拍干。 洗板机：选择4次洗涤程序，洗板后拍干。13. 显色：每孔加底物液A、B各50ul（1滴），轻轻振荡混匀后，置37避光显色15分钟。14. 测定：每孔加终止液50ul(1滴)，轻拍混匀，用酶标仪单仪波长450nm或双波长450nm/630nm测定各孔OD值（在30分钟内完成测定）；用单波长测定时需空白对照孔凋零。结果判定3. 临界值（C.O.）=2.1阴性对照OD均值（阴性对照OD值小于0.05时，以0.05计算）4. 结果判定：样本OD值S/C.O.1者判为抗HBs阳性；反之判为抗HBs阴性。注意事项7. 试剂及待测样本用前先放室温平衡30分钟左右；未用完的板条应及时封存于加有干燥剂的自封袋中。8. 含血球的标本易出现假阳性，应尽量避免使用。9. 滴加试剂前，应将滴瓶翻转数次混匀，滴加时瓶身应保持垂直并匀速加样。10. 洗涤要充分，各孔均须加满，防止孔口内游离酶不能洗净。若浓缩洗涤液出现结晶，可于37放至溶解。11. 所有样本和废弃物都应按传染源处理。12. 不同批号的试剂不可混用。贮存条件和有效期1.贮存条件：28 2.有效期：12个月作业指导书文件编号： JSFY-JYK-ZY-008发布日期2011年11月30日B版修订号0批准日期2011年11月30日标题：HBeAg测定操作规程第1页第1页编写人：崔福强审核人：鲍红梅批准人：崔福强 HBeAg测定操作规程（酶联免疫夹心法） 原理 在微孔板条上预包被纯化乙肝e抗体（抗HBe），配以酶标记抗体（抗HBeHRP）及TMB等其它试剂，采用夹心法原理检测人血清或血浆中的乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg） HRP为辣根过氧化物酶 TMB为四甲基联苯胺 标本收集与处理 血清或血浆 试剂 潍坊三维乙肝病毒e抗原诊断试剂盒 操作步骤15. 配制洗涤液：用蒸馏水或去离子水将浓缩洗涤液1：25稀释至500ml备用。16. 加样：设空白对照1孔，阴、阳对照各2孔。分别加阴、阳性对照各50ul(1滴)和50ul待测样本于相应孔内。17. 加酶：除空白对照孔外，每孔加50ul（1滴）酶标记物，轻轻振荡混匀，用封板膜将板孔封好。18. 温育：置37水浴30分钟。19. 洗涤：手 工：扣去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置20秒，甩干，重复4次后拍干。 洗板机：选择4次洗涤程序，洗板后拍干。20. 显色：每孔加底物液A、B各50ul（1滴），轻轻振荡混匀后，置37避光显色15分钟。21. 测定：每孔加终止液50ul(1滴)，轻拍混匀，用酶标仪单仪波长450nm或双波长450nm/630nm测定各孔OD值（在30分钟内完成测定）；用单波长测定时需空白对照孔凋零。结果判定5. 临界值（C.O.）=2.1阴性对照OD均值（阴性对照OD值小于0.05时，以0.05计算）6. 结果判定：样本OD值S/C.O.1者判为HBeAg阳性；反之判为HBeAg阴性。注意事项13. 试剂及待测样本用前先放室温平衡30分钟左右；未用完的板条应及时封存于加有干燥剂的自封袋中。14. 含血球的标本易出现假阳性，应尽量避免使用。15. 滴加试剂前，应将滴瓶翻转数次混匀，滴加时瓶身应保持垂直并匀速加样。16. 洗涤要充分，各孔均须加满，防止孔口内游离酶不能洗净。若浓缩洗涤液出现结晶，可于37放至溶解。17. 所有样本和废弃物都应按传染源处理。18. 不同批号的试剂不可混用。贮存条件和有效期1.贮存条件：28 2.有效期：12个月作业指导书文件编号： JSFY-JYK-ZY-009发布日期2011年11月30日B版修订号0批准日期2011年11月30日标题：抗HBe测定操作规程第1页第1页编写人：崔福强审核人：鲍红梅批准人：崔福强 抗HBe测定操作规程（酶联免疫中和抑制法） 原理 在微孔板条上预包被纯化乙肝e抗体，配以中和抗原和酶标记抗体及TMB等其它试剂，采用中和抑制法原理检测人血清或血浆中的乙型肝炎病毒e抗体（抗HBe）。 HRP为辣根过氧化物酶 TMB为四甲基联苯胺标本收集与处理 血清或血浆 试剂 潍坊三维乙肝病毒e抗本诊断试剂盒 操作步骤22. 配制洗涤液：用蒸馏水或去离子水将浓缩洗涤液1：25稀释至500ml备用。23. 加样：设空白对照1孔，阴、阳对照各2孔。分别加阴、阳性对照各50ul(1滴)和50ul待测样本于相应孔内。24. 加酶标记物及中和：除空白对照孔外，每孔加50ul（1滴）酶标记物和50ul（1滴）中和抗原，轻轻振荡混匀，用封板膜将板孔封好。25. 温育：置37水浴30分钟。26. 洗涤：手 工：扣去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置20秒，甩干，重复4次后拍干。 洗板机：选择4次洗涤程序，洗板后拍干。27. 显色：每孔加底物液A、B各50ul（1滴），轻轻振荡混匀后，置37避光显色15分钟。28. 测定：每孔加终止液50ul(1滴)，轻拍混匀，用酶标仪单仪波长450nm或双波长450nm/630nm测定各孔OD值（在30分钟内完成测定）；用单波长测定时需空白对照孔凋零。结果判定7. 临界值（C.O.）=0.3阴性对照OD均值。对非血清标本：临界值（C.O.）=0.5阴性对照OD均值（阴性对照OD值大于1.5时，以1.5计算）8. 结果判定：样本OD值S/C.O.1者判为抗Hbe阴性；反之判为抗HBe阳性。注意事项19. 试剂及待测样本用前先放室温平衡30分钟左右；未用完的板条应及时封存于加有干燥剂的自封袋中。20. 含血球的标本易出现假阳性，应尽量避免使用。21. 滴加试剂前，应将滴瓶翻转数次混匀，滴加时瓶身应保持垂直并匀速加样。22. 洗涤要充分，各孔均须加满，防止孔口内游离酶不能洗净。23. 所有样本和废弃物都应按传染源处理。24. 不同批号的试剂不可混用。贮存条件和有效期1.贮存条件：28 2.有效期：12个月作业指导书文件编号： JSFY-JYK-ZY-010发布日期2011年11月30日B版修订号0批准日期2011年11月30日标题：抗HBc测定操作规程第1页共1页编写人：崔福强审核人：鲍红梅批准人：崔福强 抗HBc测定操作规程（酶联免疫竞争法） 原理 在微孔板条上预包被纯化乙肝核心抗原（HbcAg），配以酶标记抗体（抗HBcHRP）及TMB等其它试剂，采用竞争法原理检测人血清或血浆中的乙型肝炎病毒核心抗体（抗HBc）。标本收集与处理 血清或血浆 试剂 潍坊三维乙肝病毒核心抗体诊断试剂盒 操作步骤29. 配制洗涤液：用蒸馏水或去离子水将浓缩洗涤液1：25稀释至500ml备用。30. 稀释样本：将待测样本用洗涤液或生理盐水1：30稀释。（样本稀释，检测结果为临床意义；样本原液加样，检测结果为流行病学意义。请用户根据实际情况选择。31. 加样：设空白对照1孔，阴、阳对照各2孔。分别加阴、阳性对照各50ul(1滴)和50ul待测样本于相应孔内。32. 加酶：除空白对照孔外，每孔加50ul（1滴）酶标记物，轻轻振荡混匀，用封板膜将板孔封好。33. 温育：置37水浴30分钟。34. 洗涤：手 工：扣去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置20秒，甩干，重复4次后拍干。 洗板机：选择4次洗涤程序，洗板后拍干。35. 显色：每孔加底物液A、B各50ul（1滴），轻轻振荡混匀后，置37避光显色15分钟。36. 测定：每孔加终止液50ul(1滴)，轻拍混匀，用酶标仪单仪波长450nm或双波长450nm/630nm测定各孔OD值（在30分钟内完成测定）；用单波长测定时需空白对照孔凋零。结果判定9. 临界值（C.O.）=0.3阴性对照OD均值。（阴性对照OD值大于1.5时，以1.5计算）10. 结果判定：样本OD值S/C.O.1者判为抗Hbc阴性；反之判为抗HBc阳性。注意事项25. 试剂及待测样本用前先放室温平衡30分钟左右；未用完的板条应及时封存于加有干燥剂的自封袋中。26. 含血球的标本易出现假阳性，应尽量避免使用。27. 滴加试剂前，应将滴瓶翻转数次混匀，滴加时瓶身应保持垂直并匀速加样。28. 洗涤要充分，各孔均须加满，防止孔口内游离酶不能洗净。29. 所有样本和废弃物都应按传染源处理。30. 不同批号的试剂不可混用。贮存条件和有效期1.贮存条件：28 2.有效期：12个月作业指导书文件编号： JSFY-JYK-ZY-011发布日期2011年11月30日B版修订号0批准日期2011年11月30日标题： 抗HCV测定操作规程第1页共2页编写人：崔福强审核人：鲍红梅批准人：崔福强 抗HCV测定操作规程原理用纯化基因工程丙型肝炎病毒（HCV）抗原和人工合成肽抗原相配比包被的微孔板与酶标特异性抗人IgG及其它试剂组成。应用间接法原理检测人血清或血浆中的HCV抗体。适用于献血员筛查及临床HCV抗体检测。标本收集与处理1. 非NaN3防腐的血清或血浆样品2. 短期（1周）内进行检测的血清或血浆样品可存放于28，如果需要长期保存，应置于20。避免反复冻融。试剂珠海丽珠丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒操作步骤1. 加样：将所需数量的板条固定于板架，每次实验设空白对照1孔（不加任何液体），阳性对照2孔、阴性对照3孔分别加入阳、阴性对照各100ul其余孔加入100ul样品稀释液，再加入10ul待测样品。2. 温育：振荡混匀，置37温育30分钟。3. 洗涤：弃去孔内液体，将稀释后的洗液注满各孔，静置3060秒，弃去孔内洗液，重复洗6次后拍干。4. 加酶：空白对照孔不加酶标记物，其余孔加入酶标记物100ul5. 温育：置37温育20分钟。6. 洗涤：弃去孔内液体，将稀释后洗液注满各孔，静置3060秒，弃去孔内洗液，重复洗6次后拍干。7. 显色：每孔加入底物缓冲液50ul，再加入底物液50ul，振荡混匀，置37温育10分钟。8. 终止：每孔加入终止液50ul，轻拍混匀。9. 读值：用酶标仪读值，在单波长450nm（须以空白对照孔调零）或双波长450nm/630nm下读取各孔值。结果判定1. 要求：阳性对照A值应0.5 阴性对照A值应0.122. 临界值（C.O.）计算 临界值（C.O.）0.12阴性对照平均A值 备注：阴性对照值平均A值小于0.05按0.05计算，大于0.05按实际值计算。3. 结果判断：样品A值临界值（C.O.）为HCV抗体阳性样品A值临界值（C.O.）为HCV抗体阴性 注意事项作业指导书文件编号： JSFY-JYK-ZY-011发布日期2011年11月30日B版修订号0批准日期2011年11月30日标题：抗HCV测定操作规程第2页共2页编写人：崔福强审核人：鲍红梅批准人：崔福强 31. 试剂及待测样本用前先放室温平衡30分钟左右；未用完的板条应及时封存于加有干燥剂的自封袋中。32. 含血球的标本易出现假阳性，应尽量避免使用。33. 滴加试剂前，应将滴瓶翻转数次混匀，滴加时瓶身应保持垂直并匀速加样。34. 洗涤要充分，各孔均须加满，防止孔口内游离酶不能洗净。若浓缩洗涤液出现结晶，可于37放至溶解。35. 所有样本和废弃物都应按传染源处理。36. 不同批号的试剂不可混用。37. 结果判读必须以酶标仪读数为准。贮存条件和有效期1.贮存条件：28 避光 2.有效期：12个月作业指导书文件编号： JSFY-JYK-ZY-012发布日期2011年11月30日B版修订号0批准日期2011年11月30日标题： 抗HIV测定操作规程第1页共2页编写人：崔福强审核人：鲍红梅批准人：崔福强 HIV测定（ELISA法）标准操作规程 1、检验目的 应用双抗原夹心酶联免疫法原理（ELISA）定性检测人血清、血浆标本中的HIV（1+2）型抗体的测定，用于HIV感染的辅助诊断，抗HIV药物治疗的效果的监测。2、原理 采用夹心ELISA方法检测血清或血浆标本中人类免疫缺陷病毒HIV（1+2）型抗体，预包被高纯度基因重组HIV（1+2）型抗原，可与标本中的抗-HIV抗体反应，加入HRP标记HIV（1+2）型抗体抗原结合，形成抗原抗体酶标抗原复合物，然后加入TMB底物产生显色反应。通过酶标仪检测吸光度（OD值），根据OD值判断HIV抗体的存在与否。3、性能参数 灵敏度高（0.5ng/ml）4、标本要求（1）标本类型：血清，血浆。（2）标本采集：见标本采集手册（3）标本储存和运输：室温放置不超过8小时，2-8不超过72小时，-20可长期保存，应避免反复冻融（4）标本拒收状态：细菌污染，严重溶血或脂血标本不能作测定。 5、容器和添加剂类型 6、试剂（1）试剂名称：人类免疫缺陷病毒HIV(1+2)型抗体诊断试剂盒。（2）试剂生产厂家：珠海丽珠试剂股份有限公司（3）包装规格： 96T/Kit（4）试剂盒组成：、HIV酶标板；、HIV酶标试剂；、HIV（1+2）型阳性及阴性对照血清；、显色剂A液和B液；、此外还有浓缩洗涤液、终止液、自封袋、封板膜、说明书等。 7、仪器设备：酶标仪：UTIT-600酶标仪 桂林优利特医疗电子有限公司，每年由计量单位进行一次校准。洗板机：URIT-670洗板机 桂林优利特医疗电子有限公司，每年由国家计量单位进行一次校准。移液器：上海大龙，大龙医疗设备（上海）有限公司，每年由国家计量单位进行一次校准。8、 校准程序 9、操作步骤、配液：将50ml浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释至1000ml备用。、编号：将样品对应微孔按序编号，每板设阴性对照2孔、阳性对照3孔，空白对照1孔。作业指导书文件编号： JSFY-JYK-ZY-012发布日期2011年11月30日B版修订号0批准日期2011年11月30日标题：抗HIV测定操作规程第2页共2页编写人：崔福强审核人：鲍红梅批准人：崔福强 、加样：空白对照孔（不加任何液体），阳性对照、阴性对照分别加入阳、阴性对照各50l，其余孔加入50l待测样品，用封板膜封板后置37温育60min。、洗涤：弃去孔内液体，将稀释后的洗液注注满各孔，静置3060秒，弃去孔内液体，重复洗6次后拍干。或用洗板机选择6次程序，洗板后在干净纱布上拍干。、加酶：每孔加酶结合物50l（空白对照孔除外），充分混匀，用封板膜封板后置37温育30min。、洗涤：弃去孔内液体，将稀释后的洗液注注满各孔，静置3060秒，弃去孔内液体，重复洗6次后拍干。或用洗板机选择6次程序，洗板后在干净纱布上拍干。、显色：每孔加入底物缓冲液50l，再加入底物液 50l，轻轻振荡混匀，封板后置37温育30分钟。、测定：每孔加终止液50l，轻轻振荡混匀。设定酶标仪单波长为450nm（须以空白孔调零）或使用双波长的酶标仪比色，参考波长450nm/630 nm，读取各孔A值。、判断结果： 1.要求：阳性对照A值应0.80 阴性对照A值应0.12 2.临界值（C.O.)计算： 临界值（C.O.) 0.15+阴性对照平均A值。 备注：阴性对照值若小于0.08以0.08计算，大于0.08按实际值算。3.结果判断： 样品的A值Cut off值为HIV抗体反应阳性。 样品的A值Cut off值为HIV抗体反应阴性。 注意：对于筛查阳性标本，应重新取样双孔复试，如果复试中任何一孔为阳性则样品视为HIV抗体阳性，对复试阳性者应按照全国HIV检测管理规范送HIV确证实验室进行确证试验。10、质量控制： 每块板设阴阳性及空白对照，并于每次试验用自制或购买的质控血清作质控，将质控血清孔OD值采用“即刻法”计算或标在质控图上，如质控有效，表明试验可靠；如失控，则要检查试剂效期、储藏温度、试验温度是否正常、操作步骤是否正确，直至重新试验使其在控。11、干扰和交叉反应12、生物参考区间 正常人阴性。13、患者检验结果的可报告区间 阳性表示HIV病毒感染。14、临床意义 用于HIV感染的辅助诊断，抗HIV药物治疗的效果的监测。15、其它： 必须按规定使用经中国药品生物制品检定所检定并贴有检定合格防伪标签的试剂。作业指导书文件编号： JSFY-JYK-ZY-013发布日期2011年11月30日B版修订号 O批准日期2011年11月30日标题：恒温水浴箱、冰箱的使用、操作和维护第1页共1页编写人：崔福强审核人：鲍红梅批准人：崔福强 恒温水浴箱、冰箱的使用、操作和维护程序1、目的：正确操作使用仪器设备，确保检验质量，充分发挥仪器效应和效率2、范围：恒温水浴箱、冰箱等3、使用程序：3.1、仪器设备的使用授权3.1.1、仅有本实验室工作人员有权使用实验室的仪器设备。3.1.2、仪器设备的使用者在使用前首先必须熟悉仪器设备的操作使用程序并经主任考核认可。3.2、仪器的设备的使用管理。3.2.1仪器设备的使用严格遵守分区使用管理。3.2.2仪器设备的使用必须严格遵循仪器设备的标准操作规程。3.2.3主要仪器使用时每次工作应有相应的使用记录。4、作用及维护程序：4.1、恒温水浴箱 4.1.1恒温水浴箱应置于坚固的水平台上，电源电压须匹配。 4.1.2打开电源开关，把温度控制器的温度调节旋钮至设定温度。 4.1.3当恒温水浴箱测定温度达到设定温度时，加热中断，指示灯熄灭。 4.1.4恒温水浴箱工作温度波动范围原控制在设定温度10C以内。 4.1.5恒温水浴箱应内外保持清洁，外壳忌用腐蚀性溶液擦试。4.2、冰箱： 4.2.1、每日上下班必须观察冰箱温度。 4.2.2、做好冰箱温度记录。作业指导书文件编号： JSFY-JYK-ZY-014发布日期2011年11月30日B版修订号0批准日期2011年11月30日标题： 总胆固醇测定操作规程第1页共2页编写人：崔福强审核人：鲍红梅批准人：崔福强 总胆固醇测定操作规程临床意义血清中胆固醇的测定可用于肝脏功能、胆汁功能、肠吸收功能和冠状动脉疾病的诊断指标。它在高脂蛋白血症的诊断和分类方面也有着重要的意义。实验原理方法为比色法测定总胆固醇的酶学方法反应式如下：胆固醇H2O 胆固醇酯酶 胆固醇脂肪酸胆固醇O2 胆固醇氧化酶 4胆甾烯3酮H2O2 2 H2O2苯酚4氨基安替比林 过氧化物酶红色化合物4 H2O标本患者要求：采血前2周患者应保持平时的饮食习惯，最好停止服用影响血脂的药物数于或数周，否则应记录用药情况。应空腹12小时后采血，采血前24小时不饮酒、不做剧烈运动。标本要求：采取后的血液及时分离血清，避免溶血。重度乳糜血、溶血、黄疸及含有抗坏血酸的标本对测定有干扰。类型：新鲜不溶血血清或血浆，血浆只能用肝素或EDTA抗凝，标本在28可稳定7天。仪器与材料 北京松上A6半自动生化分析仪潍坊三维总胆固素定量检测试剂试剂盒的组成：GOODs缓冲液（PH6.7） 50mmol/L 苯酚 5mmol/L4氨基安替比林 5m mol/L 胆固醇酯酶 200U/L胆固醇氧化酶 100U/L 过氧化物酶 3U/L标准液 5.17 mmol/L基本参数温度 37C 方式 终点法 波长 500nm试剂量 1ml 标本量 10ul 比色杯光径 1cm操作程序5. 打开仪器的电源开关（仪器的背面）6. 面板上的屏幕上出现棋盘样方格。设定日期和时间，按OK进入主菜单。7. 选择运行，进入选择菜单，选CHO,屏显下载方法后，选择不打印方法，OK进入。等温度达到37C时，进入，然后进行测定。作业指导书文件编号： JSFY-JYK-ZY-014发布日期2011年11月30日B版修订号0批准日期2011年11月30日标题： 总胆固醇测定操作规程第2页共2页编写人：崔福强审核人：鲍红梅批准人：崔福强 计算无需计算，结果自动以mmol/L显示。 报告结果 参考正常值 正常5.2mmol/L临界水平5.26.2 mmol/L高胆固醇血症6.2 mmol/L 注意事项13. 试剂量和标本量可因仪器要求按比例增减。14. 样品中胆固醇浓度大于19.39 mmol/L，应将样品用生理盐水稀释后再测试，结果乘以稀释倍数。15. 本试剂中含有叠氮钠，请勿吸入并避免与皮肤粘膜接触。16. 实验室废液因有血清，须先进行消毒处理，再用大量水冲洗排放。作业指导书文件编号： JSFY-JYK-ZY-015发布日期2011年11月30日B版修订号0批准日期2011年11月30日标题： 甘油三脂测定操作规程第1页共2页编写人：崔福强审核人：鲍红梅批准人：崔福强 甘油三脂测定操作规程临床意义甘油三脂属于脂类，它是从食物中吸收和由碳水化合物在体内代谢产生而得来的。测定甘油三脂的重要意义在于诊断和处理高脂血症。这些疾病可能是原发性的，或是继发于其它疾病如肾病、糖尿病和内分泌失调。甘油三脂升高己被证实是冠状动脉硬化性心脏病的危险因素。实验原理方法为比色法测定甘油三脂的酶学方法。反应式如下：甘油三酯 脂蛋白脂酶甘油脂肪酸胆油ATP 甘油激酶 甘油3磷酸ADP甘油3磷酸+O2 甘油3磷酸氧化酶H2O2ADP2 H2O24-氨基安替比林4氯苯酚 过氧化物酶红色化合物4 H2O标本的收集与处理患者准备：清晨空腹采血类型：空腹血清或血浆，标本不应溶血。标本在28可稳定3天。仪器与材料 北京松上A6半自动生化分析仪潍坊三维甘油三脂测定试剂盒试剂盒的组成：GOODs缓冲液（PH6.7） 50mmol/L 4氯苯酚 4mmol/LATP 4mmol/L Mg2+ 15mmol/L甘油激酶 0.4KU/L 过氧化物酶 2KU/L脂蛋白脂酶 4kU/L 4-氨基安替比林 0.4 mmol/L甘油3磷酸氧化酶 0.5KU/L 标准液 2.28 mmol/L(200mg/dl)基本参数方式 终点法 温度 37C 波长 500nm标本量 10ul 试剂量 1ml 反应时间10分钟操作程序8. 打开仪器的电源开关（仪器的背面）9. 面板上的屏幕上出现棋盘样方格。设定日期和时间，按OK进入主菜单。作业指导书文件编号： JSFY-JYK-ZY-016发布日期2011年11月30日B版修订号0批准日期2011年11月30日标题： 高密度脂蛋白胆固醇测定操作规程第1页共2页编写人：崔福强审核人：鲍红梅批准人：崔福强 高密度脂蛋白胆固醇测定操作规程临床意义高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）是血浆脂蛋白的重要组成部分，临床上通过测定HDL-C反映HDL的水平。HDL的水平与冠心病的风险增加呈负相关，因此，血清HDL-C的测定是识别高风险病人的一个有用指标。实验原理样品中的低密度脂蛋白（LDL）、极低密度脂蛋白（VLDL）与试剂中的聚阴离子选择性的结合，而特殊的表面活性剂抑制胆固醇酯酶（CEH）、胆固醇氧化酶（COD）与LDL、VLDL起反应，从而选择性作用于高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）,生成醌亚胺化合物，通过检测546nm的吸光度可得HDL-C的含量。标本的收集与处理患者要求：采血前2周患者应保持平时的饮食习惯，最好停止服用影响血脂的药物数于或数周，否则应记录用药情况。应空腹12小时后采血，采血前24小时不饮酒、不做剧烈运动。标本要求：采取后的血液及时分离血清，避免溶血。血清中HDL-CD 20-25保存可稳定1天，28保存可稳定1周，20保存可稳定3个月。重度乳糜血、溶血、黄疸及含有抗坏血酸的标本对测定有干扰。仪器与材料 北京松上A6半自动生化分析仪浙江伊利康高密度脂蛋白检测试剂盒试剂盒的组成：R1GOODs缓冲液 120mmol/L HSDA 2.5 mmol/L表面活性剂 适量 防腐剂 适量R2胆固醇酯酶 1 KU/L 胆固醇氧化酶 0.8 KU/L过氧化物酶 10 KU/L 4氨基安替比林 0.42 mmol/L试剂的准备使用前将R1与R2按3：1的比例混合成工作液。基本参数温度 37C 方式 直接法 波长 546nm光径 1cm 试剂量 1000UL 标本量 10UL反应时间 10分钟 因子数 3.532操作程序作业指导书文件编号： JSFY-JYK-ZY-016发布日期2011年11月30日B版修订号0批准日期2011年11月30日标题：高密度脂蛋白胆固醇测定操作规程第2页共2页编写人：崔福强审核人：鲍红梅批准人：崔福强