肺炎衣原体肺炎的检验诊断

肺炎衣原体肺炎的检验诊断肺炎衣原体肺炎是由肺炎衣原体引起的急性肺部炎症，常累及上下呼吸道。常在聚居场所的人群中流行。但3岁以下的儿童少见。陔病原体亦可见于5%10%的医院获得性肺炎，但 对其流行病学了解甚少。1临床表现肺炎衣原体引起的临床表现与肺炎支原体相似，包括咽炎、支气管炎和肺炎，主要发生于较 大儿童和青年人。通常症状较轻，表现为发热、寒战、肌痛、干咳，非胸膜炎性胸痛，头痛、 不适和乏力，少有咯血。发生咽喉炎者表现为咽喉痛、声音嘶哑，有些患者可表现为双阶段 病程：开始表现为咽炎，经对症处理好转， 13 周后又发生肺炎或支气管炎，咳嗽加重。持 续性咳嗽是本病的主要特点。肺炎衣原体在激发哮喘中亦可能发挥作用。2 检验诊断实验室检查对肺炎衣原体肺炎的诊断有重要的参考价值，主要包括呼吸道标本直接涂片找衣 原体包涵体，肺炎衣原体培养，肺炎衣原体抗原、抗体、核酸等的相关检测。2.1 一般检验2.1.1白细胞计数和分类多数肺炎衣原体肺炎白细胞正常，但也有少数超过10.0x109/L,分 类常见淋巴细胞轻度增多。2.1.2直接涂片检查(1) 检测方法：直接涂片、革兰染色。(2) 标本：痰液、肺泡灌洗液。(3) 临床诊断价值和评价：典型衣原体在宿主细胞质内可出现包涵体，用光学显微镜在痰液或 肺泡灌洗液中观察到衣原体包涵体有一定的诊断意义。此方法简单易行且快速，但存在假阳 性反应，因而在诊断疾病时应慎重。检查时应设阳性和阴性对照。2.2特殊检验2.2.1衣原体培养(1) 检测方法：组织细胞培养、鸡胚卵黄囊培养。(2) 标本：痰、肺泡灌洗液。(3) 临床诊断价值和评价：在痰液或肺泡灌洗液中培养出肺炎衣原体对诊断有较大意义，细胞 培养的敏感性为80%90%，特异性为100%，是诊断肺炎衣原体肺炎的确诊方法，属金标 准方法，可用该方法来评价其他方法的准确性。但肺炎衣原体培养所需时间较长，且不能在 无生命的培养基中生长，对培养要求较高，在临床上难以开展。2.2.2衣原体抗原的检测检测方法：ELISA、胶体金免疫测定。(2) 标本：痰液、肺泡灌洗液。(3) 临床诊断价值和评价：用胶体金、荧光素或酶标记的抗肺炎衣原体的单克隆抗体来检查标 本的肺炎衣原体抗原，简便、快速，已有商品试剂盒供应。样品中衣原体的含量、取样的方 法和患者的情况(如年龄、性病史、有无症状等)都对衣原体的检出有影响。当标本量采集少 时会造成假阴性，而因与其他病原菌存在交叉反应，可造成假阳性。2.2.3 肺炎衣原体 TWAR 株特异性核酸检测检测方法：PCR、分子杂交。(2)标本：痰液、肺泡灌洗液。(3)临床诊断价值和评价：肺炎衣原体 TWAR 株特异性核酸检测可以对肺炎衣原体肺炎进行早 期诊断。采用Pstl限制制性内切酶对TWAR株DNA进行酶切后，可以获得474bp的特异核酸 片段，采用 PCR 或分子杂交可准确地检测出，从而对肺炎衣原体 TWAR 株做出准确的诊断， 敏感性和特异性都非常高。2.2.4 肺炎衣原体特异性抗体检测(1) 检测方法：补体结合试验、免疫荧光试验、 ELlSA 法等。(2) 标本：血清。(3)临床诊断价值和评价1)微量免疫荧光试验(MIF)是检测肺炎衣原体抗体的敏感性方法之一，该试验以TWAR株的原 体为抗原，检测血清中的特异性抗体。患者血清中的IgM抗体效价1： 128提示近期感染。 急性感染时双份血清抗体效价有4倍以上升高，既往感染时IgG抗体效价在1： 81： 256之 间。用此法有利于区别近期感染和既往感染，也有利于区别原发感染和再感染。IgG抗体阳 性但效价不升高为既往感染，因为IgM通常在感染后26个月逐渐消失，而IgG抗体则持续 存在，此抗体可用来作为肺炎衣原体感染的普查。2)急性感染的抗体反应包括两种方式：一为初次感染(原发感染)后的免疫反应，多见于青年 人，补体结合试验所测衣原体抗体早期迅速升高，MIF所测衣原体抗体出现较缓慢。二为再 次感染(重复感染)后的免疫反应，多见于年龄较大的成年人， IgG 抗体通常在 12 周内出现 且效价升高很快，而补体结合抗体及IgM抗体不能出现或效价很低。原发感染IgM出现早， 效价高，IgG出现较晚，IgA反应较弱或不出现。因此，抗体的检测结合临床资料分析有助于 区分感染的类型。2.4应用建议非特异的血常规检测可有助于鉴别肺炎的类型，区别细菌性肺炎与非细菌性肺炎。对疑似病 例可通过痰液或肺泡灌洗液的直接涂片寻找肺炎衣原体包涵体，若找到肺炎衣原体包涵体， 可进行支原体培养进行确诊。在不能进行支原体培养的情况下，对肺炎衣原体TWAR株可用 分子生物学方法来检测，也可通过免疫学方法来对肺炎衣原体的特异性抗原、抗体进行检测 以助于诊断及判断病程。参考文献1汪天柱小儿肺炎的病因及早期诊断J中国医师进修杂志,1986年12期.鲁继荣,张一宁，王玥，刘桂英,傅文永，王敏儿童肺炎衣原体肺炎病原学检测及其临床应用J. 中华儿科杂志,2001年10期.