大鼠离体肺静态顺应性的测定

大鼠离体肺静态顺应性的测定实验目的 学习、掌握肺顺应性的测定方法。加深理解肺顺应性和肺泡表面张力之间的关系。实验原理肺顺应性是指肺在外力作用下的可扩张性，它是衡量肺弹性阻力的一个指标。肺顺应性 与肺弹性阻力呈反向关系，弹性阻力大者扩张性小，即顺应性小；相反，弹性阻力小者则顺 应性大。肺顺应性可用单位跨肺压引起的肺容积变化来表示。因肺容量背景不同其肺顺应性 的特点不同，故以不同跨肺压所引起肺容积变化的关系曲线，即肺顺应性曲线来反映肺顺应 性或肺弹性阻力。实验在离体肺上进行，模拟分段屏气下测定肺的压力-容积变化，并绘制 成曲线。肺弹性阻力主要来源于肺泡内表面少量液体的表面张力和肺内弹性纤维的弹性回缩力， 若分析此两种作用，可向肺内充气或充水，分别测其压力-容积曲线。因为充气时肺泡内存 在气-液界面，而充水时不存在此界面，故测出的压力-容积曲线不同。实验对象大鼠。实验药品20氨基甲酸乙酯溶液、生理盐水仪器与器械哺乳动物手术器械、肺顺应性实验装置(图 8.1-1)，该装置的连接导管用一次性输液器 连接)、10 ml注射器一个(上连一个20 cm的细塑料管)、玻璃平皿一个、滴管一个、棉线。 实验方法与步骤1 气管一肺标本制备 取大约250 g体重的大鼠，用过量氨基甲酸乙酯(5 mlkg-1)麻醉 致死，沿前胸正中线切开皮肤，在胸骨剑突下剪开腹壁并向两侧扩大创口，在肋膈角处刺破 膈肌使肺萎陷，然后向两侧剪断膈肌与胸壁的联系，再沿萎陷的肺缘剪断两侧胸壁直至锁骨， 除去剪下的胸前壁，分离剪断肺底部与膈肌联系的组织。然后，在颈部分离气管，在甲状软 骨下剪断，向下分离并剪断与之联系的组织，直到气管-肺标本全部从胸腔中游离出来，最 后剪掉附着的心脏。在整个手术过程中，所用金属器械不可与肺组织接触，以避免造成肺或 气管损伤而发生漏气。标本游离后放在一玻璃平皿内用生理盐水冲去血迹，在气管断缘处插 入一 Y 型插管，用棉线结扎牢固，至此完成标本制备。2. 仪器连接按照图8.1-1将肺标本连于肺顺应性测定装置3.实验步骤(1) 向肺内注入空气做压力一容积曲线肺组织放在有少量生理盐水的玻璃平皿内，打开调节器1、2及Y型插管3的顶盖5, 将注射器抽入 l0ml 空气后，关闭顶盖 5，便可进行实验。通过螺旋推进器向检测系统中缓 慢注入空气，在水检压计稳定在0、4、8,24cm各段水平处，分别记录各压力水平时 的注入空气容积。每一压力水平的维持都需要进一步注入少量气体，越是高水平压力 ,注入 空气越多，达到稳定所需时间也越长，一般需要45 min。在压力达到2.35 kPa(24 cmHaO) 时开始抽气，按 2.35(24 cmH2O)、1.96(20)、1.57(16)，0 kPa( cmHaO)各阶段依次使 检压计的压力下降，待压力稳定后记录各水平注射器内的空气容积。每一压力水平也需要进 一步抽气而得以稳定，压力越低达到稳定所需时间越长。在整个实验过程中不断向标本上滴 洒生理盐水，保持标本湿润。将所得各压力水平的空气容积，减去检压计液柱升高的容积(预 先测算好)即是进入肺内气体容积，结果记入表8.1-1 内。(2) 向肺内注入生理盐水做压力 -容积曲线 首先将测压系统内充满水并排出空气。用针头上连有塑料管的注射器从水检压计开口处 伸人并注入清水，待水流至Y型插管4处关闭调节器1,并抽出检压计中零点以上的水，使 其液面恰在零点处。然后把装置中的注射器充满生理盐水，打开Y型插管3上的顶盖5,使 管道内充满生理盐水并排出气泡，盖上顶盖。向肺内注入和抽出生理盐水，重复35次， 以冲洗出气管中的分泌物和气泡，打开顶盖将冲洗液和气泡由此排出，接着关闭顶盖，然后 向平皿内倒入生理盐水深达3 cm左右，调节平台使平皿中的液面与水检压计零点同高。开 放调节器1使系统内为0 Pa,这时关闭调节器2,再将注射器内充入生理盐水10 ml连入系 统即可进行实验。与上述实验一样向肺内分阶段注入和抽出生理盐水，将每一压力水平的容 积变化记入表10.1-1内，所不同者是压力变化之阶段以98.1(1)、196.2(2)、588. 6 Pa(6 cmH20)柱为宜，其最大容积变化最好接近上述实验的最大容积水平注意事项1. 制备无损伤的气管-肺标本,是实验成败的关键。因此整个手术过程要非常细心.因肺与 周围脂肪组织颜色近似,应特别注意.若不慎造成一侧肺漏气时，可将该侧的支气管结扎，用 单侧肺进行实验，但实验时抽、注容量应减半。2. 须用新鲜标本，整个实验中要保持肺组织的湿润.实验装置各接头处不可漏气。3. 气或注生理盐水时速度不宜太快，量也不宜过多，一般不超过10 ml (双侧肺)。4. 置肺的平皿要大些，以免悬浮着的肺与平皿壁接触而造成实验误差。可能出现的问题与解释1. 增加气体量时，水检压计读数不增加。(1) 接口处漏气。(2) 制备标本时，肺泡破裂。2. 抽、注生理盐水时水检压计波动明显，不稳定。(1) 接口处漏气。(2) 肺扩张不均匀。实验结果根据表 8.1-1 的数据以检压计内压力(即跨肺压)为横坐标，以各压力水平时的肺容积为表S. 1-1不同跨魁时肺容积变化的略记录表跨肺压注气抽气跨肺压注水抽水cmHaOmlmlcmHaOmlml00418212316420524&注:1 cmH2O=98.1 Pa纵坐标，做气体压力-肺容积曲线和水压力-肺容积曲线（参照图 8.1-2）,并将两曲线加以 比较。讨论肺顺应性与肺泡表面张力的关系。n