种子检验学 实验材料

扦样一一从大量的种子中，随机取得一个重量适当、有代表性的供检样品。种子发芽(germination)是指在适宜条件下(通常在检验室内)幼苗出现和生长达到一定阶 段，其主要构造表明在田间的适宜条件下能否进一步生长成为正常的植株。种子的这种在适 宜条件下发芽并长成正常植株的能力称之为发芽力(germinability)。发芽力通常用发芽势和 发芽率来表示。发芽势(germination potential)是指在规定的条件下，初次计数时间内长成的正常幼苗数占 供检种子数的百分率。发芽率(percentage germination)是指在规定的条件下，末次计数时间内长成的正常幼苗数 占供检种子数的百分率。初次样品(primary sample)，是指对种子批的一次扌千取操作中所获得的一部分种子。 混合样品(composite sample)，是指由种子批内所扌千取的全部初次样品合并混合而成的样品。 次级样品(sub-sample)，是指通过分样所获得的部分样品。送验样品(submitted sample)，是指送达检验室的样品，该样品可以是整个混合样品或是从 其中分取的一个次级样品。备份样品(duplicate sample)，是指从相同的混合样品中获得的用于送验的另外一个样品， 标识为“备份样品”试验样品(working sample，简称试样)，是指不低于检验规程中所规定重量的、供某一检验 项目之用的样品，它可以是整个送验样品或是从其中分取的一个次级样品。扦样扦样是种子检验的重要环节，扦取的样品有无代表性，决定着种子检验结果是否有效。(1) 扦取多少样品才算重量适当？纯度测定重量：GB/T 3543.5-1995做了规定(P225)水分：需磨碎的种子100g，不需磨 碎种子50g其他项目测定重量。(2) “代表性”含义： 获得一个重量适当的样品； 与种子批有相同的组分； 这些 组分的比例与种子批组分比例相同。(二) 关系1、玉验样品可以是整个混合样品或是从其中分取的一个次级样品。2、试验样品可以是整个送验样品或是从其中分取的一个次级样品。 混合样品三送验样品三试验样品3、“次级样品”是一个“小样品对大样品”的相对概念，如送验样品对混合样品，试验样品 对送验样品。四、扦样的原则为了获得样品的代表性，扦样过程的毎一步操作都必须遵守以下原则：1、被扦种子批 均匀一致。如果种子批存在异质性，都不可能扦到有代表性的样品。2、采取适宜的扦样器 和扦样技术扦取样品。扦样三要素：扦样频率、扦样点分布和每个扦样点扦取相同数量的种 子。3、按照对分递减或随机抽取原则分取样品。4、保证样品的可溯性和原始性。5、扦样 员应当经过培训。第2章扦样与分样技术第一节扦样准备和条件一、种子批均匀度实际上种子批是不可能完全均匀一致的。不同容器之间、同一容器内部都有差异。这种 差异程度由种子和其他物质存在的比例及这些组分的差异和在种子批内的不同分布所决定。 在种子的处理和加工过程中，甚至贮藏期间，种子的均匀度都会发生变化。种子灌入容器和运输过程中，大粒种子一般先在容器基部，然后形成圆锥形，再从圆锥形的 底边充满容器的边缘；小粒种子保持在容器中央；轻种子和稃壳落在容器的上部和边缘。 种子收获时，混杂物处于最高值，均匀性最不一致。种子批一旦通过了正常的清选和加工， 就认为符合检验规程所规定的“均匀度”要求，达到了扦样技术所规定的能扦取到有代表性 样品的要求。二、种子批和容器的封缄与标识封缄一一指封口，即将种子批的容器的开口采用一种方式封好后，除非损及原来的封缄或者 遗留启封的痕迹，否则不可能把它们打开接触到种子。种子批的每一容器应有批号或其他标识，才能实现样品溯源，检验结果才能既反映种子批， 否则检验结果只能代表样品，不能代表种子批。三、处于易扦取状态扦样员至少能接触到种子批的两个面。否则的话，必须移动种子批。四、种子批的定义种子批一一同一来源、同一品种、同一年度、同一时期收获的质量基本一致、在规定数量之 内的种子。同一来源是一个相对概念，种子批可以是同一种子田收获的种子，也可以是由同一农场不同 种子田收获的种子混合而成。五、种子批大小种子批与数量有很大的关系，一批种子数量过大，其可靠程度就愈差，要取得一个有代表性 的送验样品就愈难，因此种子批有数量方面的限制。种子越大，种子批越大。若一批种子超过了规定重量（其容许差距为5%）时，则须分成若干 个种子批，分别给予不同的批号加以识别。如：水稻种子：25000kg,加5%容许差距后为26250kg玉米种子：40000kg,加5%容许差距后为42000kg第二节扦样器具与使用方法袋装种子扦样器散装种子扦样器袋装种子扦样器一、袋装种子扦样器（一）单管扦样器及其使用单管扦样器是目前最常用的扦样器，适用于中、小粒种子。选择扦样器的原则：扦样器的长 度略短于被扦容器的斜角长度。扦样程序为：1、确信扦样器与盛样器请洁干净；2、确信种子袋不要超过两货盘高；3、扦样时，用扦样 器尖端拔开袋一角的线孔，扦样器凹槽向下，自袋角处尖端与水平成30向上倾斜地慢慢 插入袋内，直至到达袋的中心；4、手柄旋转180。，使凹槽旋转向上，稍稍振动，使种子 落入孔内，使扦样器全部装满种子；5、抽出扦样器，即可打开孔口，将种子倒入盛样器中; 6、用扦样器尖端在扦孔处画一十字，拨好扦孔。也可以用纸粘好扦孔；7、确保混合样品 在混合和分样时不会发生混杂。（二）双管扦样器的使用:1. 确信扦样器与盛样器清洁干净；2.确信种子袋不要超过两货盘高；3.旋转手柄，使孔 关闭；4.扦样时，用扦样器尖端拔开袋一角的线孔，自袋角处尖端与水平成30向上倾斜 地慢慢插入袋内，直至到达袋的中心；5手柄旋转180，打开孔口稍稍振动，使种子落入 孔内，使扦样器全部装满种子；6.关闭孔口，注意不要关得太紧，以免使某些种子被压碎 而被归于杂质；7.抽出扦样器，即可打开孔口，将种子倒入盛样器中；8.用扦样器尖端在 扦孔处画一十字，拨好扦孔。也可以用纸粘好扦孔；9.确保混合样品在混合和分样时不会 发生混杂。二、散装种子扦样器（一）长柄短筒圆锥形扦样器1. 确信长柄短筒圆锥形扦样器和盛样器干净；2.关闭进谷门，插入袋中；3.到达一定深 度后，用力向上一拉。使活动塞离开进谷门，略加振动，种子即掉入门内；4.关闭进谷门， 然后抽出扦样器，把种子倒入盛样器中；5.从不同层次（上、中、下层）扦取样品。（二）自动扦样器自动扦样器可以定时从种子流动带的加工线上扦取样品。扦样间隔和每次扦取的种子数量通常是可调节的。混合样品的大小取决于加工速率、初次样 品的频率和扌千取初次样品的时间。（三）用手工方法从种子流中扦样（适用于均匀和连续的种子流）1.从种子流中取得初次样品，放入一个横截面宽于种子流的容器，不允许种子进入扦样容 器后反弹出来；2.确信扦样容器和盛样器干净;3.在加工时以相同的间隔扦取初次样品， 确信种子样品有代表性。第三节从种子批扦取送验样品程序一、准备器具；二检查种子批；三、确定扦样频率；四、选择扦样方法和仪器扦取初次样品； 五、配制混合样品；六、送验样品的制备和处理；七、填写扦样单一、准备器具根据被扦作物种类，准备好各种扦样必需的仪器：扦样器、盛样器、送验样 品袋、供水分测定的密封容器（密实袋）、扦样单、标签、封条、粗天平等。二、检査种子批1、种子批大小2、种子批处于便于扦取状态3、检查种子袋封口和标识4、检查种子批均匀度1、种子批大小农作物种子检验规程规定了 124个作物种类的种子批最大重量（其容许差距为5%, P101）,如果种子批重量超过规定要求，应分成几批，并分别扦样。2、种子批处于便于扦取状态：至少能从种子批堆放的两个面进行扦样。如果达不到要求， 必须移动种子批。3、检査种子袋封口和标识：所有盛装的种子袋必须封口，并有一个相同的批号或编码的标 签。4、检查种子批均匀度：如果扦样时能看出异质性比较明显，则应拒绝扦样。如发生怀 疑，按规定的异质性测定（P113）方法进行测定；确信种子批已进行适当混和、掺匀和加 工，尽可能达到均匀一致，没有异质性的文件记录或其他迹象，可扦样。三、确定扦样频率扦取初次样品的频率，要根据扦样容器（袋）的大小和类型而定，主要有以下几种情况：1、袋装种子2、小包装种子3、散装种子或种子流4、包衣种子1、袋装种子1、袋装种子在一定量值范围内的定量包装，其质量的量值范围在15kg-100kg之间（含 100kg）。对于袋装种子，依据种子批袋数的多少确定扦样袋数，表7-4 （P106）规定的扦样频 率应作为最低要求。2、小包装种子小包装种子在一定量值范围内装在小容器中的定量包装，其质量的量值范围等于或小 于 15 kg。对于小包装种子扦样，采用以100kg重量的种子作为扦样的基本单位，小容器合并组成基本 单位，基本单位总重量不超过100 kg。如6个15kg的容器，20个5kg的容器，33个3kg 的容器或100个1kg的容器。将每个基本单位视为一“袋装”然后按表7-4规定确定扦样 频率。对于具有密封的小包装（如瓜菜种子），这些小包装种子重量只有200g、100g和50g或更 小的，则可直接取一小包装袋作为初次样品，并根据规定所需的送验样品数量来确定袋数， 随机从种子批中抽取。四、选择抒样方法和仪器抨取初次样品根据种子种类、包装的容器选择适宜的方法和扦样器抒取初次样品。送验样品的处理：供净度分析等测定项目的送验样品应装入纸袋或布袋，贴好标签，封口。 对于供水分测定的样品，应将其装入防湿密封容器中。与发芽试验有关的送验样品不得装入 密封容器。送验样品应由扦样员尽快送往种子检验室进行检测，不得延误。七、填写扦样单 扦样单一般可以一式两份，一份交检验室，一份交被扦单位保存。如果 是监督检验，扦样单必须一式三份，承检机构和被抽查企业各留存一份，报送下达抽查任务 的农业行政主管部门一份。第四节分样器具与使用方法一、横格式分样器与使用方法二、钟鼎式分样器与使用分样三、离心式分样器及使用方法一、横格式分样器与使用方法1、横格式分样器主要适用于大粒种子和有稃壳的种子，也有一些横格式分样器适用于小粒 种子2、操作程序：（1）检查分样器和盛样器是否干净；（2）确信分样器处于比较坚固的水 平表面；（3）把盛样器A和B放在分样器两边；（4）把混合样品放入盛样器C,把C沿着 整个漏斗等速倒入分样器，使每一边有同样的种子；（5）把A和B的种子倒入C重新混合, A和B放在分样器两边，把C再倒入漏斗中；（6）对于易流动种子，重复第5步骤一次； 对于带稃壳种子，重复两次；如果分取的样品满足要求，则到此为止，否则继续进行如下步 骤：（7）把A中种子放入另一盛样器后，把A放在漏斗下，移去B,用空C代替；（8）倒 B至漏斗，这样A有四分之一种子，C有四分之一种子；（9）把A移到另一盛样器中，把 空A和B放在漏斗下；（10）把C倒入漏斗中；（11）继续这一过程，直至取得规定重量的 样品为止。如果没有足够种子构成规定的样品重量，不要采用拿小量种子来补充，缺少部分只能从混合 样品的其余部分分取。不小心溅撒在外面的种子不能拣回来。二、钟鼎式分样器与分样1、钟鼎式分样器的构造由漏斗、圆锥体及一组把种子通向两个出口的档格组成。这些档格 形成相间的凹槽通向一个出口，空格则通向相对的出口。在漏斗底部有一个活门或开关以控 制种子。当活门开放时，种子由于重力下落到圆锥体上而均匀分布到凹槽及空格内，然后经 过出口落到盛接盘内。2、操作程序关键点 把混合样品放入盛样器C,把C的种子放入漏斗，铺平，用手很快拨开活门，使种子迅速 下落；如果没有足够种子构成规定的样品重量，千万不要采用拿小量种子来补充。缺少部 分只能从混合样品的其余部分分取达到规定的送验样品重量。不小心溅在外面的种子不 能拣回来三、离心式分样器1、离心分样器是应用离心力混和并把种子撒布在分离面上。离心分样器中，种子经过漏斗 到浅橡皮杯或旋转器内向下流动。由马达带动旋转，种子即被离心力抛出落下。种子落下的 圆周或面积由固定的隔板相等地分成两部分。因此，大约一半种子流到一个出口，其余一半 流到另一出口。2、操作程序（1）将全部样品倒入漏斗盒，当装入漏斗时，种子必须始终倒在中心；（2）启动旋转器, 使种子流入盛接器；（3）取出装有种子的盛接器，换上空盛接器，将两个盛接器内装有的种 子一起倒入漏斗，再启动旋转器；（4）重复第3步骤一次；（5）取出装有种子的两个盛接器 分别换上空盛样器，将一个装有种子的盛接器搁置不用，将另一盛接器内的种子倒入漏斗， 然后启动旋转器；（6）重复这一程序，直至分得与规定数量相当的送验样品。第五节分样程序一、试验样品的最低重量进行种子质量检测前，应依据检测项目要求分出有代表性的试验样品，供检验某一检测 项目之用。供水分测定的试样重量，需磨碎的种类为10Og,不需磨碎的种类为50g；供发 芽试验的试样为400粒种子等。二、机械分取法利用分样器采用多次对分法从充分混和的送验样品中分取试验样品。分取备份样品时，须独 立分取，即从送验样品一分为二的另一部分中分取。三、徒手减半分取法四分法（1）将种子均匀的倒在光滑清洁的平面上；（2）用平边刮板将种子充分混匀；（3）将整堆 种子摊平成四方形，用分样板划2条对角线，取对角线的两个对角的三角形的样品合并为一 份样品。（4）重复分样，直至分得所需的样品重量为止。第六节多容器种子批异质性测定一、测定目的和适用情况:1、种子批异质性是指种子批内各成分的分布极不均匀一致，未达到随机分布的程度。2、异 质性测定的目的是衡量种子批的异质性，以表示所测定的项目用混和方法是否达到随机分布 的程度。3、只在扦样时对种子批的均匀度产生怀疑时才进行异质性测定。4、在实际工作中, 如果种子批的异质性明显到扦样时能看出袋间或初次样品的差异时，则应拒绝扦样。对于存 在异质性的种子批，即使按检验规程取得送验样品，也不会有代表性。实验3种子发芽试验（二）发芽试验的目的与意义1、种子发芽试验的目的是测定和评估种子批的种用价值。2、在生产上，根据发芽率的高低确定播量的多少。例如：发芽率为P的种子，要一播全苗， 毎穴需要几粒？如果条播，在行距为D的情况下，毎亩播量需要多少粒？3、在加工和储藏过程中，发芽率为确定正确的加工、贮藏程序提供依据。在田间条件下，环境错综多变，发芽条件的不一致性导致结果各异，重演性差。但在实验室 内，发芽条件可人为控制，并做到标准化，使该种子的大多数样品得到最整齐、最迅速、最 完全的发芽，结果准确可靠。因此，作为判断理想状况下种子能否发芽的种子发芽试验便显 得尢为重要。二、幼苗结构与幼苗鉴定标准（一）幼苗的结构与幼苗生长习性1.幼苗结构（1）双子叶幼苗的主要构造（大豆）双子叶幼苗的主要构造包括子叶出土型和子叶留土型两 类。子叶出土型幼苗（如大豆、菜豆等）的主要构造包括初生根、次生根、下胚轴或上胚轴、 子叶、初生叶和顶芽等部分（图3-1）。子叶留土型幼苗（如豌豆、蚕豆等）的主要构造包括初生根、次生根、上胚轴、子叶、初生 叶、鳞叶和顶芽等。（2）单子叶幼苗的主要构造（玉米）单子叶幼苗的主要构造与双子叶幼苗的主要构造有所 不同，其构造通常高度特化和专一化，也可分为子叶出土型和子叶留土型两类。子叶出土型幼苗（如洋葱等）的主要构造由初生根、不定根和管状子叶等组成。子叶留土型幼苗（如玉米、小麦和水稻等）的主要构造包括初生根（种子根）、次生根、不 定根、中胚轴、胚芽鞘和初生叶等（图3-2）。（3）多子叶幼苗的主要构造针叶树种类（如松科等）的幼苗具有多枚针状子叶，故称为多 子叶植物。其幼苗的主要构造由初生根、下胚轴、子叶和顶芽等组成（图3-3）。2幼苗生长习性（1）子叶出土初生根伸出后，下胚轴特别伸长，初期弯曲成弧型，拱出土面后逐渐伸直， 最后将子叶和幼梢带出土面，子叶变绿，展开并形成幼苗的第一个光合作用器官，接着上胚 轴和顶芽生长。菜豆种子生长发育过程详见图3-4。（2）子叶留土单子叶多数植物（如禾本科）、豆科的一些大粒种子（如蚕豆和豌豆种子）和 一些树种（如栎属）属于留土型发芽。发芽期间下胚轴几乎不伸长，子叶留在土壤中的种皮 内，直至内部养料耗尽而逐渐解体。种子发芽时，胚芽鞘和中胚轴伸长或上胚轴伸长，几乎 看不到下胚轴伸长，首先进行光合作用的是初生叶或胚芽中长出的第一片真叶。豌豆种子生 长发育过程详见图3-5。（二）幼苗鉴定标准种子萌发后长成的幼苗可分为正常幼苗和非正常幼苗，此外可能还有一 部分是不发芽种子。只有正常幼苗才用于计算种子的发芽率。1正常幼苗正常幼苗是指生长在良好土壤及适宜的水分、温度和光照条件下，具有继续生长成为正常植 株潜力的幼苗。把正常幼苗分为三类，即完整幼苗、带有轻微缺陷幼苗和次生感染幼苗。凡 符合下列类型之一者为正常幼苗。（1）完整正常幼苗幼苗王要构造生长良好、完全、匀称和健康。因种不同，应具有下列一些构造：具有发育良好的根系，其组成如下：细长的初生根，通常长满根毛，末端细尖。在规 定试验时期内产生的次生根。 在燕麦属、大麦属、黑麦属、小麦属和小黑麦属中，由数 条种子根代替一条初生根。具有发育良好的幼苗茎轴，其组成如下：出土型发芽的幼苗，应具有一个直立、细长并 有伸长能力的下胚轴。留土型发芽的幼苗，应具有一个发育良好的上胚轴。在有些出 土型发芽的一些属（如菜豆属、花生属）中，应同时具有伸长的上胚轴和下胚轴。在禾 本科的一些属（如玉米属、高粱属）中，应具有伸长的中胚轴。具有特定数目的子叶： 单子叶植物具有一片子叶，子叶可为绿色和呈圆管状（葱属）， 或变形而全部或部分遗留在种子内（如石刁相、禾本科）。双子叶植物具有二片子叶，在 出土型发芽的幼苗中，子叶为绿色，展开呈叶状；在留土型发芽的幼苗中，子叶为半球形和 肉质状，并保留在种皮内。 在针叶树中，子叶数目218枚不定，通常其发育程度因种 而不同。子叶呈绿色而狭长。具有展开、绿色的初生叶：在互生叶幼苗中有一片初生叶，有时先发生少数鳞状叶，如 豌豆属、石刁柏属、蚕豆属。 在对生叶幼苗中有两片初生叶，如菜豆属。具有一个项芽或苗端，其发育程度因所检验的种而不同。在禾本科植物中有一个发育良好、直立的芽鞘，其中包着一片绿色初生叶延伸到顶端，最后 从芽鞘中伸出。（2）第二类带有轻微缺陷的正常幼苗初生根：初生根局部损伤，或生长稍迟缓。初生根有缺陷，仅次生根发育良好，特别 是豆科中一些大粒种子的属（如菜豆属、豌豆属、巢菜属、花生属、豇豆属和扁豆属）、禾 本科中的一些属（如玉米属、高粱属和稻属）、葫芦科所有属（如甜瓜属、南瓜属和西瓜属） 和锦葵科所有属（如棉属）。燕麦属、大麦属、黑麦属、小麦属和小黑麦属中只有一条强 壮的种子根。下胚轴、上胚轴和中胚轴局部损伤。子叶（采用“50%”规则）：子叶局部损伤，但子叶组织总面积的一半或一半以上仍保持 着正常的功能，并且幼苗顶端或其周围组织没有明显的损伤或腐烂。双子叶植物仅有一 片正常子叶，但其幼苗顶端或其周围组织没有明显的损伤或腐烂。初生叶：初生叶局部损伤，但其组织总面积的一半或一半以上仍保持着正常的功能（采 用“50%规则”）。顶芽没有明显的损伤或腐烂，有一片正常的初生叶，如菜豆属。菜 豆属的初生叶形状正常，大于正常大小的四分之一。芽鞘：芽鞘局部损伤。芽鞘从顶端开裂，但其裂缝长度不超过芽鞘的三分之一（对于 玉米，如果胚芽鞘有缺陷，但第1叶完整或仅有轻微缺陷的幼苗仍可分为正常幼苗）。受 内外稃或果皮的阻挡，芽鞘轻度扭曲或形成环状。芽鞘内的绿叶，虽然没有延伸到芽鞘 顶端，但至少要达到胚芽鞘的一半。（3）第三类次生感染的正常幼苗由真菌或细菌感染引起，使幼苗主要构造发病和腐烂，但有证据表明病源不来自种子本身。2非正常幼苗非正常幼苗分为三类，即受损伤的幼苗、畸形或不匀称的幼苗和腐烂幼苗三类。（1）第一类受损伤的幼苗由机械处理、加热、干燥、冻害、化学处理、昆虫损害等外部因 素引起种子伤害，使幼苗构造残缺不全或受到严重损伤，以致不能均衡生长者。如子叶或苗 端破裂或幼苗其他部分完全分离，引起不正常；下胚轴、上胚轴或子叶有裂缝和裂口；胚芽 鞘损伤或顶端破损；初生叶有裂口，缺失或发育受阻等症状。（2）第二类畸形或不匀称的幼苗由于种子老化等内部因素引起种子发芽的生理紊乱而造成 幼苗生长细弱，或存在生理障碍，或主要构造畸形，或不匀称者。不正常幼苗特征包括初生 根生长发育迟缓或变得过于纤细；下胚轴、上胚轴或中胚轴缩短或变粗，形成环状、扭曲或 呈螺旋状；子叶卷曲、变色或坏死；胚芽鞘缩短和畸形或形成裂口、环状、扭曲或呈螺旋状； 反向生长（芽弯曲向下，根具有负向性）；缺乏叶绿素（幼苗黄化或白化）；幼苗过于纤细或 呈玻璃透明状水肿。（3）第三类腐烂幼苗由初生感染（病源来自种子本身）引起，使幼苗主要构造发病和腐烂， 并妨碍其正常生长者。3不发芽种子在发芽试验末期仍不发芽的种子，可分为以下几种情况：（1）硬实：由于不能 吸水而在试验末期仍保持坚硬的种子。（2）新鲜种子：在发芽试验条件下，既非硬实，又不 发芽而保持清洁和坚硬，具有生长成为正常幼苗潜力的种子。（3）死种子：在试验末期，既 不坚硬，又不新鲜，也未产生生长迹象的种子。第二节种子发芽的条件与设施一、发芽的条件：1、水：需水量、需水阶段、水质（pH） 2、温度：最低、最咼、最适；恒温、变温。3、氧气4、忌光（黑麦草）、喜光（萬苣）、光不敏感二、发芽床和发芽器皿（一）发芽床（germination medium）发芽床也称发芽基质，是持续供应种子发芽和幼苗初 期生长发育所需水分的衬垫物。通常采用纸、砂、蛭石、纱布、毛巾和海绵等。它都应具备 保水性、通气性好，无毒质，无病菌和一定强度的基本要求。1纸床纸床是种子发芽试验中使用最多的一类发芽床。纸床多用于中、小粒种子的发芽。供 作发芽试验的纸类主要有专用发芽纸、滤纸和纸巾等。有不同颜色的发芽纸，如蓝色、棕色 和白色等，但幼根在蓝色发芽纸上呈现得更清楚。发芽纸应满足以下要求。纸床主要有三种使用方法：纸上（TP）、纸间（BP）和褶折纸（PP）。2砂床（1）选用无任何化学药物污染的细砂或清水砂为材料，砂的pH值应在6.07.5范围 内。（2）过筛选择大小适宜的砂粒，砂粒直径在0.050.8mm范围内。在此范围内的砂粒 既具有足够的持水力，又能保持一定的空隙，透气性好。（3）使用前需洗涤和高温处理。用 清水洗涤砂粒，除去污染物和有毒物质，随后摊放在托盘内，130C高温下烘干2h,以杀死 病菌和砂内的其它种子。砂床有两种使用方法：砂上（TS）和砂间（S）。砂上方法是将种子压入砂的表面，湿砂厚度23cm，适用于小粒种子的发芽试验。砂中方 法是将种子播放在平整的湿砂上，湿砂厚度24cm，然后根据种子的大小加盖12cm厚 度的湿砂。此法适用于大、中粒种子。（二）发芽皿、发芽盘、发芽盒发芽皿（培养皿）要易清洗和易消毒，并配有盖，可采用高度为510cm的透明聚乙烯盒， 其容积可因种子大小而异。三、发芽设备（一）数种设备1活动数粒板2真空数种器3.电子自动数粒仪（二）发芽箱与发芽室发芽箱和发芽室是为种子发芽提供适宜条件（即温、湿、光）的设备。它们必须满足以下条 件： 维持温度变化在1C范围内，注意不包括开门引起的温度变化。当变换温度时， 一般应能在30min内迅速转换过来。如果试验的物种需要光照，必须有光控功能。如 果发芽种子没加盖或封起来，应有加湿装置，以保证发芽床的湿润。但在没有加湿装置的情 况下，往往进行人工加湿。发芽箱1光照发芽箱2人工气候箱3发芽室第三节标准发芽试验方法一、种子发芽前的准备（一）发芽床、发芽温度的确定按各种作物种子发芽技术规定，选用最合适的发芽床和发芽温度。（二）种子发芽前的处理及样品的准备1. 种子发芽前的处理一般种子发芽前不进行任何处理，如果种子处于休眠状态或带有大量霉菌可进行处理。（1）打破休眠处理按置床时间可分三类：种子置床前先进行破除休眠处理，如去壳、加温、机械破皮、预 先洗涤、硝酸钾浸渍等处理，然后置床发芽。例如花生果先剥壳，预先加温处理；稻属种子 经预先加温或硝酸钾浸种处理等。 种子置床后进行破除休眠处理，如预先冷冻处理。例 如葱属、云薹属等的种子，需先冷冻处理。 湿润发芽床处理，如使用硝酸钾、赤霉素处 理时，可使用0.2%KNO3溶液或0.05%0.10%GA3溶液湿润发芽床。主要作物种子休 眠的破除方法见表。 温度处理温度处理主要包括预先冷冻、加热干燥、开水烫种和温水处理四类。预先冷冻是在试验前，将各重复种子放在湿润的发芽床上，510C预冷处理数天数月。 如麦类种子在510C处理3d。加热干燥是将发芽试验的各重复种子摊成一薄层，放在通气良好的条件下，于3040C干 燥数天。各种作物种子加热干燥的温度和时间见表。开水烫种适用于棉花和豆类的硬实。温水处理是除去生理抑制物质的有效方法。甜菜、菠菜等种子单位的果皮或种皮内有发芽抑 制物质时，可把种子浸在温水或流水中预先洗涤，甜菜复胚种子洗涤2h，遗传单胚种子洗 涤4h,菠菜种子洗涤12h。 机械损伤处理机械损伤处理可以改变种皮结构的状况和消除种皮对萌发的阻碍作用，是破除硬实的有效方 法。小心地把种皮刺穿、削破、锉伤或砂皮纸摩擦，切割和去壳均是行之有效的方法，特别 是林木种子。豆科植物种子硬实解除方法可用针直接刺入子叶部分，也可用刀片切去部分子 叶。机械损伤处理在大麦、棉花和牧草种子休眠破除上也得到成功应用。 化学试剂处理硝酸钾是破除种子休眠最常用的化学试剂，适用于禾谷类、茄科等许多种子。对大多数物种， 常用0.2%KNO3湿润发芽床。如果出现根发育迟缓或矮化，则应将其浓度调至0.1 %。外源激素，如赤霉素和乙烯等，也是破除种子休眠的常用方法。赤霉素浸种破除作物休眠的 使用浓度因种而异（表）。0.0029%的乙烯利湿润发芽床适合许多物种。此外，双氧水、硝酸和硫酸也是破除种子休眠的有效方法。 层积处理。对于要求在低温湿润条件下才能完成胚后熟的种子，常采用层积处理打破休眠。包括低温层 积和变温层积两类。低温层积是目前广为使用的一种技术。层积时种子必须混合水、砂、蛙 石和泥炭土等介质，温度以510C为宜。低温层积处理所需时间因植物种类而有很大的差 异，蔷薇科种子常需34月。变温层积也称为湿温/湿冷作用。有些植物种子需要较高的温 度使胚后熟或胚根长出，然后需要低温打破休眠。如一些百合、牡丹等的种子上胚轴休眠现 象。（2）消毒处理种子表面带霉菌较多时，容易引起发芽的失败。可以用0.1%HgC12处理10-15分钟，然后 冲洗干净。或用1%的次氯酸钠处理10分钟，然后冲洗发芽。2. 样品的准备试验样品必须从充分混合的净种子中，用数种设备或手工随机数取400粒种子。为了使幼苗生长有足够的空间，一般小、中粒种子（如水稻、小麦和油菜等）以100粒为一 重复，试验设4个重复；大粒种子（如玉米、大豆和棉花等）以50粒为一副重复，试验设 8个副重复；特大粒种子（如花生和蚕豆等）可以25粒为一副重复，试验设16个副重复。（三）发芽床及器皿的准备发芽床初次加水量应根据发芽床的性质和大小而定。对于纸床，发芽纸吸足水分后，沥去多余水。对于砂床，加水量应为其饱和含水量的6080%，即100g干砂中加入1826ml的水级， 切不可出现手指一压即出现水层。特别值得注意的是，不能将干砂先倒入发芽容器，再加水。 发芽器皿事先洗净、晾干或烘干、消毒。二、种子置床、发芽期间管理（一）种子置床的要求与方法置床要求种子试样均匀分布在发芽床上，每粒种子之间应留有足够的空间，一般保持其1 5倍种子的间距，以防止种子携带的病菌或污染菌的相互感染，并保持足够的生长空间。 禾谷类种子应当胚朝上。种子置床后，应在发芽皿侧面或内侧贴上标签，注明品种名称、样品编号、重复次数及置床 时间等，然后盖好盖子或套上一薄膜塑料袋，移至规定条件下发芽培养。（二）发芽期间管理最好每天检查水分、温度和霉菌等情况，及时发现并排除问题。1. 水分管理2温度管理：发芽温度应保持在所需温度的1C范围内。如作变温发芽，则应按规定及时 变换温度，一般先高温后低温，分别持续8h和16h。3霉菌管理：如发现霉菌滋生，应及时取出发霉种子，洗净后再将种子放回原处。当发霉种 子超过5%时应及时更换发芽床，以免霉菌继续感染。如发现腐烂死亡种子，则应立即去除 并做好记载。此外，除忌光种子外，必须满足其发芽的光照需求。（三）发芽数据记载表3-1的第5、6栏中规定了初次记数和末次记数时间。在初次记数时，把发育良好的正常幼苗应从发芽床（这里仅指纸床）中拣出，对可疑的或损 伤、畸形或不均衡的幼苗，通常留到末次记数。末次计数应按正常幼苗、不正常幼苗、硬实、 新鲜不发芽种子和死种子定义进行鉴定、分类、分别计数和记载。（四）幼苗鉴定按第一节中幼苗鉴定的标准鉴定。三、结果计算与检验报告（一）结果计算1、计算：试验结果用正常幼苗数的百分率来表示。计算时，以100粒种子为一重复。2、结果处理：计算四次重复的正常幼苗平均发芽率，在同一试验4次重复之间的最大容许 差距表中，査找对应的容许的差距。Xmax-XminW最大容许差距，贝U表明试验结果是可靠 的；如果超过最大容许差距，要进行重新试验。重新试验后，比较两次试验的平均结果， 用同一实验室相同送验样品不同发芽试验的容许差距表处理，要求两次试验的平均数差W 最大容许差距。正常幼苗、不正常幼苗、硬实、新鲜不发芽种子和死种子的百分率之和为100%，各百分率 修约至最近似的整数，0.5修约进入最大值。（二）结果报告结果须填报正常幼苗、不正常幼苗、硬实、新鲜不发芽种子和死种子的平均百分率，若其中 有任何一项结果为零，则需填入符号“ -0-”。同时还须填报采用的发芽床、温度、试验持续时间以及种子发芽前的处理方法，以提供评价 种子种用价值的全部信息。发芽结果可与标签值比较，a-x W最大容许差距，（三）重新试验当试验出现以下所列情况之一时，须进行重新试验。1.发现有较多的新鲜不发芽种子，怀疑种子有休眠，种子发芽潜力还未全部发挥出来，则 应破除休眠重新试验，将得到的最佳结果填报，应注明所用的方法。2由于真菌或细菌的蔓延而使试验结果不一定可靠时，可采用砂床或土壤进行试验。如有必 要，应增加种子之间的距离。3、当正确鉴定幼苗数有困难时，可采用表3-1中规定的一种或几种方法在砂床或土壤上进行 重新试验。4当发现试验条件、幼苗鉴定或计数有差错时，应采用同样方法进行重新试验。5当发现不正常幼苗因化学处理中化学试剂或其它毒素危害所致，采用砂床或土壤重新试 验，将得到的最佳结果填报。6.重复间的差距超过表3-6中最大容许差距时，应采用同样的方法进行重新试验。第四节快速发芽试验快速发芽试验的原理：加速吸水、提高温度、提高透气。1、玉米切果柄并撕去胚部种皮法：数取玉米种子4份，各50粒种子，在40C温水下浸种34h，取出种子胚朝下用锋利刀片 切下胚部尖端果柄，但不能切断胚部种皮，用手指捏住果柄撕下胚部外边果种皮，再置于砂 床中，35C下培养2d计算发芽率。2、禾谷类、豆类高温盖砂法：取试样4份，禾谷类每份100粒种子，豆类每份50粒，在 30C水中浸种4h （玉米浸6h,水稻浸24h）,然后取出种子播于砂床，禾谷类种胚朝上，轻 压种子使之与砂面平齐，其上盖一层湿纱布，再盖上0.5cm 2cm湿砂，放在高温条件下发 芽（粳稻32C,籼稻、玉米35C37C，花生30C，麦类、豆类25C28C），经2d （粳 稻4d），揭去纱布和砂，计算种子发芽率。3、棉花硫酸脱绒切割法：棉花种子须用浓硫酸脱绒，清水冲洗干净，在合点端切去1/4或 一小口，切口向下直接播于砂床，其上盖一层湿纱布，再盖上0.5cm2cm湿砂，放在35C 高温条件下发芽培养2d,揭去纱布和砂，计算种子发芽率。4、水稻去颖法：水稻种子用出糙机脱去谷壳，取完整米粒100粒，24次重复，放在30C 水中浸泡3h，然后置于纸床，30C下培养。因米粒失去谷壳保护，易发霉，须每天检查， 如有发霉及时洗涤，并做好记载。籼稻培养2d,粳稻培养3d,计算发芽率。实验5测定种子水分的标准方法通常用湿重为基数的水分百分率来表示 试样烘前重（g）-试样烘后重（g）X100%种子水分（）=试样烘前重（g）种子水分测定的重要性：各国在种子质量控制上都明确规定了各种正常型种子安全贮藏水分 的最高限度。如禾谷类种子的安全水分一般为12%14%以下，油料作物种子为9%10%以 下。水分测定的时期：种子入库前、包装运输前、药剂熏蒸前 种子水分测定方法2. 铝盒恒重在水分测定前预先准备。将待用铝盒（含盒盖）洗净后，于130C的条件下烘干 1h,取出后冷却称重，再继续烘干30min，取出后冷却称重，当两次烘干结果误差小于或等 于0.002g时，取两次重量平均值；否则，继续烘干至恒重。3. 预调烘箱温度按规定要求调好所需温度，使其稳定在1032C，如果环境温度较低时， 也可适当预置稍高的温度。4. 样品制备供水分测定的送验样品必须符合GB/T3543.2的要求。需磨碎种子的最低重量为 100克，不需磨碎种子的最低重量为50克。用下列一种方法进行充分混合，并从送验样品 中取 15-20g。（1）用匙在样品罐内搅拌。（2）将盛有样品罐的罐口对准另一个同样大小的空罐口，把种子在两个容器间往返倾倒。5. 烘干称重（二）高温烘干法2、取样磨碎或切片或整粒测定高恒温烘干法须磨碎种子的种类有燕麦属、水稻、甜养、苦养、黑麦、高粱属、小麦属、 玉米、菜豆属、豌豆、西瓜、巢菜属、羽扇豆属、锦鸡儿属、岩黄芪属。禾谷类的细度要 求达到至少有50%的磨碎成分通过0.5mm筛孔的金属丝筛,而留在1.0mm筛孔的金属丝筛上 不超过10%。豆类需要粗磨,至少有50%的磨碎成分通过4.0mm筛孔。此法是在较高的温度下，加速样品内的水分蒸发，在短时间内测得样品水分，因此使用时应 严格控制烘干的温度和时间。如温度过高或时间过长，易使种子中的干物质氧化而降低样品 重量，使水分测定结果偏高。二、高水分预先（二次）烘干法第二次将已初步烘干的种子磨碎，从中称取4.5005.000g试样两份，用低温或高温烘干 法烘干、冷却、称重、计算百分率。实验2种子净度和其他植物种子数目的测定（一）种子净度分析1. 称取送验样品：用规定感量的天平称取规定重量的送验样品水稻400g （M）。2. 检査重型混杂物：过筛或手拣挑出送验样品中的重型混杂物、称重（m）后将其分为大 型其它植物种子（ml）和重型杂质（m2）,并称重。3 分取试验样品试样分取方法：（1）检查分样器和盛样器是否干净；分样器放水平面上。（2）将样品通过分样器2次，使 之充分混匀。（3）用钟鼎式或横格式分样器从送验样品中独立分取两份试样或两份半试样， 可经过多次分样，以达到或接近试样规定最低重量（水稻220g）。若所分样品低于规定的样 品重量，缺少部分只能从送验样品的其余部分分取达到规定的试验样品重量。（4）根据其规 定重量确定所用感量的天平称重。4. 试样的筛理与分析试样筛理：两层筛子，上层长孔筛，下层小孔筛，倒入半试样，加盖后筛选器上筛理2min。 注意：确保长孔的走向与筛孔的运动方向一致；筛后不要急于打开筛盖，以免尘土飞扬, 影响结果。试样分析：将留在各层的筛上物分别倒入样品盘内，根据标准挑拣出杂质、其它植物种子 和净种子分别放入相应容器内。以同样的方法筛理分析第二份半试样。5. 各种成分称重将每份半试样的净种子、其它植物种子、杂质分别称重。注意称重精确度6. 结果计算与处理（1）检査重量增失：各成分的重量之和与样品原重量之差应V试样原重的5%。（2）百分率计算：净种子的百分率（P1）,其它植物种子的百分率（OS1）及杂质的百分 率（I1）：P1=（净种子重量三各成分重量之和）X 100%OS1=（其它植物种子重量-各成分重量之和）X 100%11=（杂质重量各成分重量之和）X 100%分母是各成分重量之和。半试样各成分的百分率计算到小数点后2位。以同样的方法处理第二份半试样。（3）核对容许差距两半试样对应的各成分百分率相差不得超过容许差距。若所有成分的实际差距都在容 许差距内，则计算各成分的加权平均值。否则，按下列程序处理： 再分析成对半试样，直到一对半试样的各成分数值在容许范围内为止（但全部分析不必 超过4对）。 凡一对成分数值间的相差超过容许差距的2倍时，该对数值略去不计。 各成分百分率的最后记录，应从全部保留的几对对应数值加权平均数计算。（5）百分率的修正若原结果百分率取两位小数，可经四舍五入保留一位小数，各成分的百分率相加应为 100.0%，如为100.1%或99.9%，则在最大成分上减去超过或加上不足之数，如果此修正值 大于0.1%，则应检查计算上有无差错。7. 填写种子净度分析结果报告净度分析的最后结果精确到1位小数，如果某成分的百分率低于0.05%，则填报微量, 如某种成分的含量为零，贝I填报“ 一0.0”（二）其它植物种子数目测定1 称取试样按要求取试验样品（水稻400g），将其倒在样品盘内，逐粒进行观察，找出所有其他植 物种子或指定种的种子，并计出每个种的种子数。2.计算每千克样品中所含的其他植物种子数（完全检验）