啤酒中乙醇和还原糖含量的测定

啤酒中乙醇和还原糖含量的测定重铬酸钾氧化分光度法测定啤酒中乙醇的含量乙醇是酒重要的质量指标之一。本实验中，在硫酸介质中，乙醇可定量被重铬酸钾氧化生成绿色的三价铬。最大吸收波长为600nm，其吸光值与乙醇浓度成正，据此建立了测定乙醇的方法，应用于酒量测定简便,实用。实验原理3CH3CH2OH+2K2Cr2O7+8H2SO4=Cr2(SO4)3+3CH3COOH+11H2O材料与方法1 仪器与试剂 (1)722型分光光度计 （2）电热恒温水浴锅 （3）乙醇标准溶液：移取1.25ml优级纯无水乙醇于100ml容量瓶中，加水至刻度线，定容。此溶液每毫升相当于10.00mg乙醇 （4）5%重铬酸钾溶液：称取5g重铬酸钾溶于50ml睡中，加10，ml浓硫酸，放冷，加水至10ml（5）试剂均为分析纯，水为蒸馏水实验步骤1.吸收曲线的绘制：在分光光度计上，用1cm吸收池。以试剂空白溶液为参比，在520-680 nm之间，每隔10nm测定样品溶液的吸光度，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线，从而选择测定铁的最大吸收波长。2.标准.工作曲线的绘制：吸取0.00ml、1ml、2ml、3ml、4ml、5ml乙醇标准溶液分别置于10ml带塞的比色管中，并分别加入2.0ml重铬酸钾溶液，加水至刻度线，在100水浴上加热10min，称取冷却5min，用1cm比色皿与600nm处测定吸光度，以乙醇浓度与对应的吸光度A绘制标准曲线3. 样品的测定：吸取0.5ml，加入2.0ml重铬酸钾溶液，加水至刻度线，在100水浴上加热10min，取出冷却5min，用1cm比色皿于600nm处测定吸光度，与乙醇标准曲线对，求出啤酒中乙醇含量数据记录与处理波长/nm520540560580600620640660680吸光度0.2800.3910.5820.7050.7980.7350.5790.3780.271乙醇浓度/mol/L0001.02.03.04.05.0X（样品）吸光度00.2910.571 0.7920.8861.0080.620数据分析与总结由浓度与吸光度的图中可得: 当A=0.620时 X=2.3mg/ml 啤酒中乙醇的含量=（2.3X10）/0.5 =46mg/ml参考文献1.与配制酒卫生标准的分析方法.GB/T5009.48-2003.S.20032.生.彭榕妹.邓湘卫.等 曙红内酯吸光度法测定酒中的乙醇含量J 李华检验-化学分册.1996.31啤酒中还原糖的测定（前言）实验原理将一定量的碱性酒石酸铜甲，乙液等量混合，立即生成蓝色的氢氧化铜沉淀，.这种沉淀很快与酒石酸甲钠反应，生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。在加热条件下，以次甲基蓝作为指示剂，用样品液滴定，样品液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应，生成红色的氧化亚铜沉淀，待二价铜全部被还原后，稍微过量的还原糖立即把次甲基蓝还原，此时溶液由蓝色变成无色，以次为滴定终点，根据含糖样品溶液滴定的体积，就可以计算出样品中还原糖的含量。样品处理吸取100ML样品，置于蒸发皿中，用（40gmol）氢氧化钠溶液中和至中性，在水浴上蒸发至原体积的14后，移入250ML容量瓶中，加50ML水，摇匀后慢慢加入5ML乙酸锌溶液及5ML10.6%亚铁氰化钾溶液，加水到刻度，摇匀后静置30min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，收集滤液备用。1仪器(1)50毫升碱式滴定管(2)250毫升三角瓶(3)容量瓶（100毫升，250毫升，1000毫升）(4)移液管（5毫升）(5)量筒(6)漏斗板，漏斗，滤纸(7)电炉(8)天平 2试剂(1)碱性酒石酸铜甲液 称取7.5克硫酸铜，及0.025克次甲基蓝，溶于水中并稀释到500毫升(2)碱性酒石酸铜乙液 称取25克酒石酸甲钠 35.5g氢氧化钠，溶于水中，再加入2克氢氧化钾，完全溶解后，用水稀释至500毫升 储存于橡皮塞玻璃瓶中。(3)乙酸锌溶液 称取21.9乙酸锌，加3毫升冰醋酸，加水溶解并稀释到100毫升(4)百分之10.6的亚铁氰化钾 称取10.6克亚铁氰化钾，溶于水中并稀释到100毫升(5)百分之0.1的葡萄糖标准溶液 准确称取0.2500克，经过98到100摄氏度烘干至恒重的无水葡萄糖，加水溶解后转入250毫升容量瓶中，加入5毫升盐酸，用水稀释至250毫升3材料啤酒4验步骤（1） 碱性酒石酸铜溶液的标定 准确吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5ML，置于250ML三角瓶中，加水10ML，加玻璃珠3粒。从滴定管滴加约9ML葡萄糖标准溶液，加热使其在2min内沸腾，准确沸腾30S,趁热以每2S1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去为终点。记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积。平行操作3次，取其平均值，按下式计算。M=pvM-10ML碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量，mgp-葡萄糖标准溶液的浓度，mg/MLV-标定时消耗葡萄糖标准溶液的总体积，ML。（3）样品溶液的预测吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5ML，置于250ML三角瓶中，加水10ML，加玻璃珠3粒。加热使其在2min内沸腾，准备沸腾30S，趁热以先快后慢的速度从滴定管中滴加样品溶液，滴定时要始终保持溶液呈沸腾状态。待溶液蓝色变浅时，以每2S1滴的速度滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点。记录样品溶液消耗的总体积。（4）样品溶液的测定吸取碱性酒石酸铜甲液和乙液各5ML，置于250ML三角瓶中，加水使其在2min内沸腾，准确沸腾30S，趁热以每2S1滴的速度继续滴加样品溶液，直至溶液蓝色刚好褪去为终点。记录样品溶液消耗的总体积。平行操作3次，取其平均值。（5）结果还原糖（以葡萄糖计）含量=M/(M1*V/250*1000)*100%M1-样品质量，gM-10ML碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量，mgV-测定时消耗样品溶液体积，ML250-样品溶液的总体积，ML5数据记录及处理编号数据项目123V(葡萄糖/ml)13.2413.2513.27密度P(mg/ml)1.0000M=pv(mg)13.2413.2513.27样品质量M1(g)100V(样品溶液/ml)6.126.146.15还原糖含量(%)0.54130.53950.5386平均值(%)0.5398IdiI0.00150.00030.0012dr%0.19参考文献食品工艺实验与检验技术食品营养与安全分析测测组员：林华玲、陈燕萍、赖丽芳、杨丽萍