生物化学课件：7 酶

酶促反应动力学酶促反应动力学v 酶促反应动力学：酶促反应动力学：主要研究酶催化的主要研究酶催化的反应速反应速度度以及影响反应速度的各种因素的科学。以及影响反应速度的各种因素的科学。v 影响酶反应速度的因素有：影响酶反应速度的因素有：底物浓度、酶浓底物浓度、酶浓度、温度、度、温度、pH值、激活剂、抑制剂值、激活剂、抑制剂等。等。v 在探讨各种因素对酶促反应速度的影响时，在探讨各种因素对酶促反应速度的影响时，通常测定其通常测定其初速度初速度来代表酶促反应速度，即来代表酶促反应速度，即底物转化量底物转化量5%时的反应速度。时的反应速度。酶浓度对反应速率的影响酶浓度对反应速率的影响酶的底物饱合现象酶的底物饱合现象中间络合物学说中间络合物学说酶与酶与底物首先生成底物首先生成一个中间络合物，然后中一个中间络合物，然后中间络合物进一步分解成产物和游离的酶间络合物进一步分解成产物和游离的酶酶反应动力学最简单的模型由酶反应动力学最简单的模型由Lenor Michaelis和和Maude Menten于于1913年年提出，因此又名为提出，因此又名为Michaelis-Menten模型或模型或M-M模型。模型。米氏方程米氏方程推导设定推导设定的的3个条件：个条件：反应速率为初速率反应速率为初速率，因为此时反应速率与酶，因为此时反应速率与酶浓度呈正比关系，避免了反应产物以及其他浓度呈正比关系，避免了反应产物以及其他因素的干扰因素的干扰 酶底物复合物处于酶底物复合物处于稳态稳态即即ES浓度不发生变化浓度不发生变化 符合质量作用定律符合质量作用定律SKSVvmmax S：底物浓度：底物浓度v：不同：不同S时的反应速度时的反应速度Vmax：最大反应速度：最大反应速度Km：米氏常数：米氏常数1925年年Briggs和和Haldame提出了提出了稳态稳态的概念：的概念：所谓所谓稳态稳态是指反应进行是指反应进行一定时间后，一定时间后，ES的生成的生成速度和速度和ES的分解速度相的分解速度相等，此时等，此时ES的浓度不再的浓度不再改变，达到恒态，也称改变，达到恒态，也称稳态。稳态。（1）Km是酶在是酶在一定条件一定条件下的下的特征物理常数特征物理常数，与与酶的性质有关酶的性质有关，与酶的浓度无关与酶的浓度无关。通过测定。通过测定Km的的数值，可鉴别酶。数值，可鉴别酶。米氏常数米氏常数（Km）的意义）的意义与与pH、温度、离子强度、酶及底物种类有关、温度、离子强度、酶及底物种类有关（3）Km可以推断某一代谢物在体内可能的代可以推断某一代谢物在体内可能的代谢谢 途径途径米氏常数米氏常数（Km）的意义（续）的意义（续）（2）不同的酶有不同的不同的酶有不同的Km值；对于同一个酶来值；对于同一个酶来说，每一个底物都有一个相应的说，每一个底物都有一个相应的Km值。值。（4）一般情况下，一般情况下，1/Km可以近似地表示酶对底可以近似地表示酶对底物的亲和力大小，物的亲和力大小，1/Km愈大，表明亲和力愈大，表明亲和力愈大。愈大。（根据根据Km可判断酶的天然底物，可判断酶的天然底物，Km最小的底物称该酶的最小的底物称该酶的最适底物最适底物或或天然底天然底物物）在一定的酶浓度下，在一定的酶浓度下，Vmax是一个常数，它只与是一个常数，它只与底物的种类及反应条件有关。底物的种类及反应条件有关。K3代表酶被底物饱和时，每个酶分子每秒钟转代表酶被底物饱和时，每个酶分子每秒钟转换底物的分子数，称为换底物的分子数，称为转换数转换数（TN，或，或催化常催化常数数，kcat）值越大，表明酶的催化效率越高。值越大，表明酶的催化效率越高。Vmax=K3 E表示酶的实际表示酶的实际催化效率催化效率S/Km=0.01-1.0 maxSKmSEKcatSKmSVvSKm 时：SEKmKcatvKcat/Km可以客观地比较不同的酶或同一种酶催可以客观地比较不同的酶或同一种酶催化不同底物的催化效率。化不同底物的催化效率。抑制作用：抑制作用：使酶的使酶的必需基团必需基团的化学性质改变而的化学性质改变而降低降低酶活性、甚至使酶完全丧失活酶活性、甚至使酶完全丧失活性的作用；性的作用；引起引起作用物质称为作用物质称为变性作用：变性作用：由于酶分子的次级键（酶分子结构）由于酶分子的次级键（酶分子结构）受到破坏而使酶活性下降或失活受到破坏而使酶活性下降或失活。抑制剂对酶反应的影响抑制剂对酶反应的影响 什么是酶的什么是酶的抑制作用抑制作用？不可逆抑制作用不可逆抑制作用可逆抑制作用可逆抑制作用竞争性抑制竞争性抑制非竞争性抑制非竞争性抑制反竞争性抑制反竞争性抑制根据抑制剂与酶作用方式的不同根据抑制剂与酶作用方式的不同能否用透析、超能否用透析、超滤等物理方法除滤等物理方法除去抑制剂，使酶去抑制剂，使酶复活复活抑制作用的类型抑制作用的类型1、不可逆抑制作用：、不可逆抑制作用：抑制剂与酶必需基团以抑制剂与酶必需基团以共价键共价键相连，使酶丧失活性相连，使酶丧失活性,不能用透析、超滤等物理方法除去抑制剂，使酶恢不能用透析、超滤等物理方法除去抑制剂，使酶恢复活性复活性很多为剧毒物质，如很多为剧毒物质，如重金属、重金属、有机磷、有机汞、有机砷、有机磷、有机汞、有机砷、氰化物、青霉素、毒鼠强等。氰化物、青霉素、毒鼠强等。非专一性不可逆抑制剂非专一性不可逆抑制剂（作用于酶分子中的一或作用于酶分子中的一或几类基团几类基团）专一性不可逆抑制剂专一性不可逆抑制剂（作用于某一种酶的作用于某一种酶的 活性部位基团活性部位基团）一般与底物有相似的结构一般与底物有相似的结构对甲苯磺酰对甲苯磺酰-L-苯丙氨酰氯甲酮苯丙氨酰氯甲酮（TPCK）与）与Trypsin底物等对甲苯底物等对甲苯磺酰磺酰-L-赖氨酰甲酯结构相似赖氨酰甲酯结构相似抑制剂与酶非共价键结合，抑制剂与酶非共价键结合，抑制作用可通过透抑制作用可通过透析等方法除去。析等方法除去。可逆抑制可逆抑制竞争性抑制竞争性抑制(competitive inhibition)非竞争性抑制非竞争性抑制(non-competitive I.）反竞争性抑制反竞争性抑制(uncompetitive I.)2.可逆抑制作用可逆抑制作用抑制剂与底物竞争酶的活性中心，从而干扰了抑制剂与底物竞争酶的活性中心，从而干扰了酶与底物的结合，使酶的催化活性降低，称为酶与底物的结合，使酶的催化活性降低，称为竞争性抑制作用竞争性抑制作用。（1）竞争性抑制）竞争性抑制（2）非竞性抑制）非竞性抑制v抑制剂既可以与酶结合，也可以与抑制剂既可以与酶结合，也可以与ES复合物结复合物结合，使酶的催化活性降低，称为合，使酶的催化活性降低，称为非竞争性抑制。非竞争性抑制。非竞争性抑制剂的化学结构不一定与底物的非竞争性抑制剂的化学结构不一定与底物的分子结构类似；分子结构类似；底物和抑制剂分别底物和抑制剂分别独立独立地与酶的不同部位相地与酶的不同部位相结合；结合；抑制剂对酶与底物的结合无影响，故底物浓抑制剂对酶与底物的结合无影响，故底物浓度的改变对抑制程度无影响；度的改变对抑制程度无影响；动力学参数：动力学参数：Km值不变，值不变，Vm值降低值降低。非竞争性抑制的特点：非竞争性抑制的特点：v抑制剂不能与酶结合，只与抑制剂不能与酶结合，只与ES复合物结合并阻复合物结合并阻止产物生成，使酶的催化活性降低，称酶的止产物生成，使酶的催化活性降低，称酶的反反竞争性抑制竞争性抑制。（3）反竞争性抑制）反竞争性抑制酶促反应动力学酶促反应动力学1、温度温度对酶反应速度的影响对酶反应速度的影响2、pH值值对酶促反应速度的影响对酶促反应速度的影响3、酶浓度酶浓度对反应速度的影响对反应速度的影响4、激活剂激活剂对酶活性的影响对酶活性的影响5、抑制剂对酶活性的影响、抑制剂对酶活性的影响温度对酶促反应速度的影响温度对酶促反应速度的影响最适温度不是一个固定的常数，它受底物最适温度不是一个固定的常数，它受底物的种类、浓度，溶液的离子强度、的种类、浓度，溶液的离子强度、pH，反，反应时间等的影响。应时间等的影响。温度系数（温度系数（Q10）：温度升高：温度升高10，反应速，反应速度与原来的反应速度的比值（大多数酶的度与原来的反应速度的比值（大多数酶的Q10一般为一般为12）pH对酶促反应速度的影响对酶促反应速度的影响典型的酶速度典型的酶速度-pH曲线是较窄的钟罩型曲线曲线是较窄的钟罩型曲线酶酶的的活活性性虽然大部分酶的虽然大部分酶的pH酶活曲线是钟形，但也有酶活曲线是钟形，但也有半钟形甚至直线形。半钟形甚至直线形。pH对酶作用的影响机制：对酶作用的影响机制：1.酸、碱可使酶变性或改变构象失活；酸、碱可使酶变性或改变构象失活；2.影响酶活性基团的解离；影响酶活性基团的解离；3.影响底物的解离，影响底物的解离，4.影响影响ES的解离。的解离。凡能凡能提高酶活性提高酶活性的物质都是酶的激活剂的物质都是酶的激活剂1.无机离子无机离子（1）一些金属离子，如）一些金属离子，如Na+、K+、Mg2+、Ca2+、Cu2+、Zn2+、Fe2+等。等。（2）阴离子：如）阴离子：如Cl-、Br-、I-、CN-等等 不同的离子激活不同的酶。不同的离子激活不同的酶。不同离子之间有拮抗作用和可替代作用，如不同离子之间有拮抗作用和可替代作用，如Na+与与K+、Mg2+与与Ca2+之间常常拮抗，但之间常常拮抗，但Mg2+与与Mn2+常可常可替代。替代。激活剂的浓度要适中，过高往往有抑制作用。激活剂的浓度要适中，过高往往有抑制作用。激活剂对酶反应的影响激活剂对酶反应的影响2.有机分子的有机分子的激活作用激活作用 还原剂（如还原剂（如Cys、还原型谷胱甘肽）能激、还原型谷胱甘肽）能激活某些活性中心含有活某些活性中心含有-SH的酶。的酶。金属螯合剂（金属螯合剂（EDTA）能去除酶中重金属）能去除酶中重金属离子，解除抑制作用。离子，解除抑制作用。不合适的表达或激不合适的表达或激活导致细胞的癌变活导致细胞的癌变或死亡！或死亡！酶需要在正确的酶需要在正确的时间和时间和正确的地点有活性正确的地点有活性一、酶的一、酶的“量变量变”1.酶的酶的“量变量变”和和“质变质变”的主要差别的主要差别2.同工酶同工酶3.酶的合成和降解酶的合成和降解二、酶的二、酶的“质变质变”1.别构调节别构调节2.共价修饰调节共价修饰调节3.水解激活水解激活一、酶量的调节一、酶量的调节1、酶的、酶的“量变量变”和和“质变质变”的主要差别的主要差别2、同工酶、同工酶v 催化相同的化学反应，而酶蛋白的分子组成、催化相同的化学反应，而酶蛋白的分子组成、理化性质不同的一组酶称为同工酶理化性质不同的一组酶称为同工酶（isoenzyme）。）。v 其差异可以是在蛋白质的一级结构上，也可以其差异可以是在蛋白质的一级结构上，也可以是在四级结构或翻译后加工上。是在四级结构或翻译后加工上。v 同工酶在体内的生理意义主要在于适应不同组同工酶在体内的生理意义主要在于适应不同组织或不同细胞器在代谢上的不同需要。织或不同细胞器在代谢上的不同需要。实例：实例：高等动物的乳酸脱氢酶（高等动物的乳酸脱氢酶（LDH）有五种形）有五种形式式M4、M3H、M2H2、MH3和和M4。M4由四由四个个M亚基组成，主要存在于骨骼肌，亚基组成，主要存在于骨骼肌，H4由四个由四个H亚基组成，主要存在于心脏。亚基组成，主要存在于心脏。3、酶的合成和降解、酶的合成和降解v 酶基因的表达：基因的表达调控酶基因的表达：基因的表达调控v 蛋白质的酶促降解：泛素介导的依赖于蛋白蛋白质的酶促降解：泛素介导的依赖于蛋白质酶体的蛋白质水解质酶体的蛋白质水解二、酶的二、酶的“质变质变”v别构调节别构调节v共价修饰共价修饰v水解激活水解激活v调节蛋白的结合和解离调节蛋白的结合和解离v单体的聚合和解离单体的聚合和解离1、别构调节（变构调节）：、别构调节（变构调节）：v某些代谢物能与变构酶分子上的某些代谢物能与变构酶分子上的变构部位变构部位特异性特异性结合，使酶的分子构象发生改变，从而改变酶的结合，使酶的分子构象发生改变，从而改变酶的催化活性及代谢反应的速度，这种调节作用就称催化活性及代谢反应的速度，这种调节作用就称为为别构调节别构调节(allosteric regulation)。别构酶多为寡聚酶，分子中有别构酶多为寡聚酶，分子中有催化部位催化部位（结合底物结合底物）与与调节部位调节部位（结合变构剂结合变构剂），这两部位可以在不同），这两部位可以在不同的亚基上，或者在同一亚基的两个不同部位的亚基上，或者在同一亚基的两个不同部位能够进行别构调节的酶称能够进行别构调节的酶称别构酶别构酶(allosteric enzyme)与别构中心结合并调节酶活性的配体称为与别构中心结合并调节酶活性的配体称为别构别构剂剂或或别构效应物别构效应物(effector)，通常为，通常为小分子代谢物小分子代谢物。正效应物正效应物或或别构激活剂别构激活剂负效应物负效应物或或别构抑制剂别构抑制剂调节亚基调节亚基催化亚基催化亚基天冬氨酸转氨甲酰酶天冬氨酸转氨甲酰酶（anspartate transcarbamoylase，ATCase）氨甲酰转移酶的结构及其催化的反应氨甲酰转移酶的结构及其催化的反应 变构调节的方式：变构调节的方式：v变构酶通常为代谢途径的变构酶通常为代谢途径的起始关键酶，而变构剂则起始关键酶，而变构剂则为代谢途径的终产物。为代谢途径的终产物。v变 构 剂 一 般 以变 构 剂 一 般 以 反 馈反 馈(feedback)方式对代谢途方式对代谢途径的起始关键酶进行调节，径的起始关键酶进行调节，最常见的为最常见的为负反馈负反馈调节。调节。酶活性的反馈抑制酶活性的反馈抑制别构酶的结构特点别构酶的结构特点u已知的别构酶都是寡聚酶，通过次级键结合。已知的别构酶都是寡聚酶，通过次级键结合。u具有具有活性中心活性中心和和别构中心，别构中心，活性中心和别构中活性中心和别构中心处在不同的亚基上或同一亚基的不同部位上。心处在不同的亚基上或同一亚基的不同部位上。u不遵循米式方程，动力学曲线是不遵循米式方程，动力学曲线是S型型（正协同（正协同效应）或表观双曲线（负协同效应）。效应）或表观双曲线（负协同效应）。协同效应：协同效应：v多少情况下，当变构酶的一个亚基与其配体结多少情况下，当变构酶的一个亚基与其配体结合后，能够通过改变相邻亚基的构象而使其对合后，能够通过改变相邻亚基的构象而使其对配体的亲和力发生改变，这种效应就称为变构配体的亲和力发生改变，这种效应就称为变构酶的酶的协同效应协同效应。v如果对相邻亚基的影响是导致其对配体的亲和如果对相邻亚基的影响是导致其对配体的亲和力增加，则称为正协同效应；反之，则称为负力增加，则称为正协同效应；反之，则称为负协同效应。协同效应。别构酶调节酶活性的机理别构酶调节酶活性的机理（1）对称或协同模型（）对称或协同模型（symmetry or concerted model,也称也称齐变齐变模型、模型、MWC模型）模型）1965年由年由Monod、Wyman和和Changeux提出。提出。该模型的要点该模型的要点:（2）序变序变模型（模型（sequential model，也称，也称KNF模型）模型）1966年由年由Koshland、Nemethy和和Filmer提出。提出。该模型的要点该模型的要点:2、共价修饰调节、共价修饰调节v是指酶活性因其分子内的某些氨基酸残基发生共是指酶活性因其分子内的某些氨基酸残基发生共价修饰而发生变化的过程。价修饰而发生变化的过程。v修饰酶修饰酶v去修饰酶去修饰酶-OHThrSerTyr酶蛋白酶蛋白H2OPi磷蛋白磷酸酶磷蛋白磷酸酶 ATPADP蛋白质激酶蛋白质激酶-O-PO32-ThrSerTyr酶蛋白酶蛋白酶蛋白的磷酸化修饰与去修饰酶蛋白的磷酸化修饰与去修饰常常见见的的共共价价修修饰饰反应类型反应类型 共价修饰共价修饰 被修饰的氨基酸被修饰的氨基酸残基残基磷酸化磷酸化腺苷酰化腺苷酰化尿苷酰化尿苷酰化Tyr,Ser,ThrTyrTyr甲基化甲基化GluS-腺苷腺苷-MetS-腺苷腺苷-同型同型 Cys共价修饰调节的方式：共价修饰调节的方式：v 共价修饰调节一般与激素的调节相联系，其调节方式共价修饰调节一般与激素的调节相联系，其调节方式为为级联反应级联反应(cascade reaction)。腺苷酸环化酶腺苷酸环化酶 （无活性）（无活性）腺苷酸环化酶（有活性）腺苷酸环化酶（有活性）ATP cAMP 激素激素（胰高血糖素、肾上腺素等）（胰高血糖素、肾上腺素等）+受体受体 PKA(无活性无活性)PKA(有活性有活性)磷酸化酶磷酸化酶b 磷酸化酶磷酸化酶a-P 磷酸化酶激酶磷酸化酶激酶 磷酸化酶激酶磷酸化酶激酶-P 级联放大系统级联放大系统调控糖原分解调控糖原分解级联放大系统级联放大系统调控糖原分解调控糖原分解意义意义：由于酶由于酶的共价修饰反应的共价修饰反应是酶促反应，只是酶促反应，只要有少量信号分要有少量信号分子（如激素）存子（如激素）存在，即可通过加在，即可通过加速这种酶促反应，速这种酶促反应，而使大量的另一而使大量的另一种酶发生化学修种酶发生化学修饰，从而获得放饰，从而获得放大效应。这种调大效应。这种调节方式快速、效节方式快速、效率极高。率极高。磷酸化酶磷酸化酶 a（活性）活性）肾上腺素或肾上腺素或胰高血糖素胰高血糖素1、腺苷酸环化酶腺苷酸环化酶（无活性）（无活性）腺苷酸环化酶（活性）腺苷酸环化酶（活性）2、ATPcAMP3、蛋白激酶蛋白激酶（无活性）（无活性）蛋白激酶（活性）蛋白激酶（活性）4、磷酸化酶激酶磷酸化酶激酶（无活性）（无活性）磷酸化酶激酶（活性）磷酸化酶激酶（活性）5、磷酸化酶磷酸化酶 b（无活性）无活性）6、糖原、糖原6-磷酸葡萄糖磷酸葡萄糖1-磷酸葡萄糖磷酸葡萄糖葡萄糖葡萄糖血液血液ATP ADPATP ADP肾上腺素或肾上腺素或胰高血糖素胰高血糖素132 102 104 106 108葡萄糖葡萄糖456（极微量）（极微量）（大量）（大量）3、水解激活、水解激活J酶原酶原：酶的无活性的前体：酶的无活性的前体J酶原的激活：由无活性的酶原转变为有活性酶原的激活：由无活性的酶原转变为有活性的酶的过程。的酶的过程。J酶原激活的意义：在特定的环境和条件下发酶原激活的意义：在特定的环境和条件下发挥作用；避免细胞自身消化；有的酶原可以挥作用；避免细胞自身消化；有的酶原可以视为酶的储存形式。视为酶的储存形式。G 酶原激活的机理酶原激活的机理:酶酶 原原分子构象发生改变分子构象发生改变形成或暴露出酶的活性中心形成或暴露出酶的活性中心 一个或几个特定的肽键断裂，水解掉一个一个或几个特定的肽键断裂，水解掉一个或几个短肽或几个短肽在特定条件下在特定条件下胰蛋白酶原的激活过程胰蛋白酶原的激活过程甘甘异异赖赖缬缬天天天天天天天天缬缬组组丝丝甘甘异异缬缬组组丝丝肠激酶肠激酶/胰蛋白酶胰蛋白酶在不改变酶浓度的前提下，对已在不改变酶浓度的前提下，对已有的酶的活性进行的调控有的酶的活性进行的调控酶的酶的“质变质变”酶活性的别构调节、共价修饰和水解激活调节的异同酶活性的别构调节、共价修饰和水解激活调节的异同 某些蛋白质能够作为配体与特定的酶结合而调某些蛋白质能够作为配体与特定的酶结合而调节被结合酶的活性，这些调节酶活性的蛋白质节被结合酶的活性，这些调节酶活性的蛋白质称为称为调节蛋白调节蛋白；其中，激活酶活性的调节蛋白称为其中，激活酶活性的调节蛋白称为激活蛋白激活蛋白，抑制酶活性的蛋白称为抑制酶活性的蛋白称为抑制蛋白抑制蛋白。抑制蛋白通常结合在酶的活性中心阻止底物与抑制蛋白通常结合在酶的活性中心阻止底物与活性中心结合而达到抑制的效果。活性中心结合而达到抑制的效果。4、调节蛋白的激活或抑制调节蛋白的激活或抑制蛋白酶与蛋白酶抑制剂蛋白酶与蛋白酶抑制剂抑制蛋白对酶活性的抑制抑制蛋白对酶活性的抑制乙酰乙酰CoA羧化酶的聚合和解离羧化酶的聚合和解离主要内容主要内容v酶的分类酶的分类v酶活性与比活酶活性与比活v酶活性部位酶活性部位v活化能活化能v酶催化机制酶催化机制v米氏方程米氏方程v可逆抑制作用可逆抑制作用v不可逆抑制作用不可逆抑制作用vpH对酶促反应速度的影响对酶促反应速度的影响v酶的条件酶的条件本章小结本章小结v酶反应速度一般以单位时间内（酶反应速度一般以单位时间内（）的变化值）的变化值来表示。来表示。v酶动力学研究的是酶促反应速度、变化规律及其酶动力学研究的是酶促反应速度、变化规律及其影响因素。影响酶促反应速度的主要因素有（影响因素。影响酶促反应速度的主要因素有（）、（）、（）、（）、（）、）、pHpH和（和（）强度以）强度以及有无（及有无（）的存在等。）的存在等。v在一定的温度和在一定的温度和pHpH条件下，当底物浓度过量时，条件下，当底物浓度过量时，酶的浓度与反应速度呈（酶的浓度与反应速度呈（）相关。但温度升）相关。但温度升高如果导致酶（高如果导致酶（），酶活性会急剧下降。），酶活性会急剧下降。本章小结（续）本章小结（续）v酶活性最大时的温度称为酶的（酶活性最大时的温度称为酶的（）温度。）温度。v酶的最适温度不是酶的特征性常数，这是因为它酶的最适温度不是酶的特征性常数，这是因为它与（与（）有关；）有关；pH不仅可影响酶的稳定性，还不仅可影响酶的稳定性，还可影响（可影响（）解离程度，从而影响酶与底物的）解离程度，从而影响酶与底物的结合。结合。v酶也有最适酶也有最适pH，最适，最适pH也不是酶的特征性常数也不是酶的特征性常数，它受（，它受（）、（）、（）、和（）、和（）以及（）以及（）等因素的影响。）等因素的影响。本章小结（续）本章小结（续）v酶动力学研究的核心内容是（酶动力学研究的核心内容是（）对酶促反应）对酶促反应速度的影响。常假定反应为单底物和单产物反应速度的影响。常假定反应为单底物和单产物反应。细胞内大多数酶促反应如果以反应速度对底物。细胞内大多数酶促反应如果以反应速度对底物浓度作图，得到的是（浓度作图，得到的是（）曲线。）曲线。v解释这一类反应可使用（解释这一类反应可使用（）模型，根据此模）模型，根据此模型推导出的方程为米氏方程。米氏反应动力学假型推导出的方程为米氏方程。米氏反应动力学假定（定（）、（）、（）和（）和（）。）。本章小结（续）本章小结（续）v 米氏方程中的米氏方程中的Km是指酶反应初速度为是指酶反应初速度为Vmax（）时）时（）的浓度，为酶的特征常数，在一定条件下，可表）的浓度，为酶的特征常数，在一定条件下，可表示酶与底物的亲和力。一个酶的示酶与底物的亲和力。一个酶的Km越大，意味着该酶越大，意味着该酶与底物的亲和力越（与底物的亲和力越（）；）；Vmax也是酶的特征常数，也是酶的特征常数，但随着（但随着（）浓度的增加而增加。在现实的条件下，一）浓度的增加而增加。在现实的条件下，一个酶促反应很难达到或者根本就达不到个酶促反应很难达到或者根本就达不到Vmax。v Kcat给出了酶被（给出了酶被（）以后，酶催化产物的生成情况，）以后，酶催化产物的生成情况，有时被称为酶的（有时被称为酶的（）数，也称为（）数，也称为（）常数，具体）常数，具体是指在单位时间内，（是指在单位时间内，（）个酶分子将底物转变成产物）个酶分子将底物转变成产物的（的（）总数，因此可以用来表示一种酶的催化效率；）总数，因此可以用来表示一种酶的催化效率；（）则可以反映一个酶的完美程度。）则可以反映一个酶的完美程度。v 直接使用米氏方程中的直接使用米氏方程中的v对对S作图得到的是（作图得到的是（）线，）线，需要将米氏方程进行线性化处理。需要将米氏方程进行线性化处理。本章小结（续）本章小结（续）v酶分子（酶分子（）或抑制剂的作用可导致酶活性的）或抑制剂的作用可导致酶活性的降低或丧失。抑制剂能够以不同的方式作用于酶降低或丧失。抑制剂能够以不同的方式作用于酶，而（，而（）是区分各种作用方式的主要手段。）是区分各种作用方式的主要手段。v酶的抑制剂可分为可逆性抑制剂和不可逆性抑制酶的抑制剂可分为可逆性抑制剂和不可逆性抑制剂。可逆性抑制剂以（剂。可逆性抑制剂以（）键与酶可逆性结合）键与酶可逆性结合，这些键形成得快，断裂得也快，它们并不能永，这些键形成得快，断裂得也快，它们并不能永久性使酶失活，使用（久性使酶失活，使用（）或（）或（）就可除）就可除去，使酶恢复活性；不可逆性抑制剂一般以（去，使酶恢复活性；不可逆性抑制剂一般以（）键与酶不可逆结合，导致酶（）键与酶不可逆结合，导致酶（）的降低，）的降低，因此一旦失活就不可逆转。因此一旦失活就不可逆转。本章小结（续）本章小结（续）v可逆性抑制剂又可分为（可逆性抑制剂又可分为（）抑制剂、（）抑制剂、（）抑制剂和（抑制剂和（）抑制剂。）抑制剂。v竞争性抑制剂不改变（竞争性抑制剂不改变（），但能提高表观（），但能提高表观（）。典型的非竞争性抑制剂不改变酶的（）。典型的非竞争性抑制剂不改变酶的（），降低（，降低（）。反竞争性抑制剂是一类只能与）。反竞争性抑制剂是一类只能与（）结合，但不能与游离的酶结合的抑制剂）结合，但不能与游离的酶结合的抑制剂。反竞争性抑制剂能（。反竞争性抑制剂能（）酶的表观）酶的表观Km，（，（）Vmax。本章小结（续）本章小结（续）v不可逆抑制剂的动力学行为与（不可逆抑制剂的动力学行为与（）可逆性抑）可逆性抑制剂相似，可分为（制剂相似，可分为（）抑制剂、（）抑制剂、（）、）、（）和（）和（）抑制剂。）抑制剂。v（）抑制剂在结构上与底物无相似之处，（）抑制剂在结构上与底物无相似之处，（）底物类似物在结构上相似于底物，（）底物类似物在结构上相似于底物，（）抑）抑制剂是受酶自身激活的不可逆抑制剂。制剂是受酶自身激活的不可逆抑制剂。