课题84：动物的细胞培养与体细胞克隆.ppt

课题84：动物的细胞培养与体细胞克隆,厦门市海沧中学 刘文胜,【课标要求】简述动物的细胞培养与体细胞克隆（知III）。,【教学要求】 1.能简述动物细胞培养的含义； 2.能说出动物细胞培养的所需条件； 3.能简述动物细胞培养的基本程序； 4.能简述动物细胞核移植的概念； 5.能列举某一克隆动物的产生，简述动物细胞核移植的程序； 6.收集通过动物细胞核移植进行克隆的实例； 7.能举例说出动物细胞培养与动物细胞核移植的应用和发展前景。,【考点梳理】,一、动物细胞的培养和克隆 （一）动物细胞的培养 1、含义：从动物体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞的悬浮液，然后，在人工控制的培养条件下，使这些细胞得以生存，并保持生长、分裂（繁殖）乃至接触抑制和有规律的衰老、死亡性能等生命活动的现象。,2、过程（如图）。,3、传代培养的原因：培养到一定时期细胞密度过大和代谢消耗引起营养枯竭。 4、相关概念 （1）原代培养：从机体取出后立即进行的细胞、组织培养。 （2）传代培养：将细胞从一个培养瓶转移或移植到另一个培养瓶的培养。 （3）细胞系：泛指可连续传代的细胞。 （4）细胞株：通过一定的选择或纯化方法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞。细胞株一般具有恒定的染色体组型、同功酶类型、病毒敏感性和生化特性等。,（二）细胞克隆 1、概念：把一个单细胞从群体中分离出来单独培养，使之繁衍成一个新的细胞群体的技术。 2、最基本要求：保证所建成的克隆来源于单个细胞。 3、提高细胞克隆形成率的措施 （1）选择适宜的培养基； （2）添加适宜的培养基； （3）以滋养细胞支持生长； （4）激素刺激； （5）使用CO2培养箱调节pH。,二、动物的克隆繁殖 （一）动物细胞全能性的表现程度：不同细胞全能性的表现程度不同， 如：受精卵胚胎干细胞多能干细胞单能干细胞体细胞。,（二）动物细胞核的移植技术,【基础训练】,1、某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题： （1）将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其他培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量多。 （2）细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液pH。 （3）药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更多。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用胰蛋白酶（胰酶）消化处理。 （4）为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素。 （5）已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A、B两组，A组细胞培养液中加入一定量的药物Y溶液，B组细胞培养液中加入等量的无菌生理盐水，经培养后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的mRNA或蛋白质合成水平的差异，确定抗肿瘤药物Y的药效。,2、（2007宁夏理综32B）现有A和B两个肉牛品种，A品种牛的细胞组成可表示为A细胞核、A细胞质，B品种牛则为B细胞核、B细胞质。 （1）如果要获得一头克隆牛，使其细胞由A细胞核和B细胞质组成，基本步骤是，从A品种牛体内取出体细胞，进行体外培养。然后再从培养细胞中取出细胞核注入B品种牛的去核卵母细胞，经过某些刺激和培养后，可形成胚胎，该胚胎被称为重组胚胎，将该胚胎移入代孕母牛的子宫中，通过培育可达到目的。 （2）一般来说，要想大量获得这种克隆牛比较难，原因之一是卵母细胞的数量不足，为解决这一问题，可以用促性腺激素处理B品种母牛。 （3）克隆牛的产生说明动物体细胞核具有全能性。克隆牛的性状主要表现A品种牛的特征。由A、B两品种杂交得到的牛与克隆牛相比，杂交牛细胞核的遗传物质来自两个亲本，细胞质来自雌性亲本，克隆牛和杂交牛的遗传物质组成不同（相同，不同）。,3、（2007江苏生物29）动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。右图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。从该图提供的信息可以获得的正确结论有（ ） A、正常细胞与癌细胞的增殖速率相同 B、有无血清对正常细胞培养的影响不同 C、培养基中补充血清有助于正常细胞的培养 D、培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大,BCD,