《肠杆菌科》PPT课件.ppt

第九章 肠杆菌科（Enterobacteriaceae）,概述 成员：一群生化和遗传性相关的中等大小 G杆菌。包括腐生菌、寄生菌及兼 性寄生菌。 分布：自然界, 大多数寄生在人和动物肠 道，少数生活在植物、腐败物质及 水和土壤中。 致病性：一些有致病性，一些为肠道正常 菌群成员。 分类：本科分为43个属，至少有110种以 上的细菌。,肠杆菌科中与兽医学有关的常见菌属及代表种,第一节 埃希菌属(Escherichia),有8个种，其中大肠埃希氏菌（E.coli），俗称大肠杆菌，与人和动物的关系最为密切，为人、畜肠道正常菌群成员之一。 该菌在环境卫生和食品卫生学上，常被用作粪便直接或间接污染的检测指标。在分子生物学和基因工程中是重要的实验材料和研究对象。,一、主要生物学特性 （一）形态及染色 G中等大小杆菌（23m）。无芽孢。多数菌株有周鞭毛、能运动。有周身菌毛，对人和动物致病的菌株还常有与毒力相关的特殊菌毛。一般无荚膜。,电镜下的大肠杆菌,（二）生长要求与培养特性 1、生长要求 普通培养基 37 有氧培养 2、培养特性 普通肉汤 培养1824h，呈均匀混浊，管底有粘性沉淀。,普通琼脂 生长24h，形成圆形凸起、光滑、湿润、半透明、灰白色菌落，直径23mm。,血琼脂 一些致病性菌株呈溶血。 麦康凯琼脂 形成红色菌落。 远腾氏琼脂 形成带金属光泽的红色菌落。 伊红美蓝琼脂 形成带金属光泽的黑色菌落。 SS琼脂 一般不生长或生长较差，生长者呈红色。,血琼脂菌落 麦康凯琼脂菌落 伊红美蓝琼脂菌落,（三）生化特性 发酵多种糖类产酸产气。大多数菌株能迅速发酵乳糖，仅极少数迟发酵或不发酵（付大肠杆菌）。约半数菌株不分解蔗糖（类大肠杆菌）。 H2S试验，尿素酶试验，吲哚试验， MR试验，VP试验，枸橼酸盐试验， 硝酸盐试验。 三糖铁培养基斜面、柱状部均为黄色。,三糖铁培养基,I(吲哚)、M（MR）、Vi （VP)、 C（枸橼酸盐利用试验）,（四）抗原及血清型 大肠杆菌有三种主要抗原 O抗原 174种 K抗原 80种 H抗原 53种 它们是本菌血清型鉴定的物质基础。,1、菌体抗原 又称O抗原，位于细胞壁上，成分为脂多糖，具有种的特异性，耐热，121加热2h不破坏其抗原性。抗原特异性由LPS中的特异多糖侧链的结构决定。 每个菌株只含有一种O抗原，其种类以阿拉伯数字表示，如O1、02、03等，可用单因子抗O血清做玻板或试管凝集试验鉴定之。,2、荚膜抗原 又称K抗原，位于被膜或荚膜中，个别位于菌毛，是菌体表面的一种热不稳定抗原。 具有K抗原的菌株不能被其相应的抗O血清凝集，称为O不凝集性。 K抗原分成L、A 和 B三型。 一种菌可含12种不同K抗原，也有无 K 抗原的菌株。 在80种K抗原中，除K88和K99是蛋白质抗原外，其余均属多糖抗原。,3、鞭毛抗原 又称 H抗原，是一类不耐热的蛋白抗原，加热至80或经乙醇处理后即可破坏其抗原性。 每种菌仅有一种 H抗原，H抗原也用阿拉伯数字表示，H抗原能刺激机体产生高效价凝集抗体。,4、大肠杆菌的血清型 以 O：K：H 排列表示其血清型。 例如： O8：K23（L）：H19 含有黏附素抗原的大肠杆菌，黏附素抗原应并列写于酸性多糖K抗原之后。如： O8：K87，K88：H19,二、致病性 （一）致病性大肠杆菌及毒力因子 大肠杆菌多数不致病，这类菌只有在特定条件下才可致大肠杆菌病。但少数大肠杆菌是致病性大肠杆菌，正常情况下极少存在于健康机体内。,致病性大肠杆菌的分类 根据毒力因子与发病机制，致病性大肠杆菌可分为2大类： 肠道致病性大肠杆菌（PECII） 肠道外致病性大肠杆菌（ExPEC）,肠道致病性大肠杆菌分6类 产肠毒素大肠杆菌(ETEC) 肠致病型大肠杆菌(EPEC) 肠出血型大肠杆菌(EHEC) 肠侵袭型大肠杆菌(EIEC) 肠聚集型大肠杆菌(EAEC) 弥散粘附型大肠杆菌(DAEC),肠道外致病性大肠杆菌： 主要引起败血症及尿道、生殖道和乳腺感染。 常见的有： 败血性大肠杆菌（SEPEC） 尿路致病性大肠杆菌（UPEC） 新生儿脑膜炎大肠杆菌（NMEC） 禽致病性大肠杆菌（APEC）,1、产肠毒素大肠杆菌(ETEC) ETEC是一类致人和幼畜(仔猪、犊牛、羔羊)腹泻最常见的病原性大肠杆菌。 毒力因子主要由黏附素和肠毒素构成。 初生幼畜被ETEC感染后常因剧烈水样腹泻和迅速脱水死亡，发病率和死亡率均很高。,（1）黏附素 黏附素(adhesin)又称定居因子，是指菌体上能使细菌黏附于宿主上皮细胞表面的结构成分。 ETEC的黏附素是菌体上的一类特有菌毛，能使细菌黏附于宿主小肠黏膜上皮细胞表面。其成分为蛋白质，有良好的抗原性，能刺激机体产生特异抗体。该成分不耐热，100即可破坏其生物学和免疫学活性。,动物源及人源ETEC的主要黏附素： 动物： F4(K88)、 F5(K99)、 F6(987P) F17、 F18 F41、 F42、 F165 人： F2 (CFA)、 F3 (CFA),（2）肠毒素 肠毒素成分为蛋白质，按其对热的耐受性不同分为不耐热肠毒素(LT)和耐热肠毒素(ST)两种。 LT具有免疫原性，对热敏感，65加热30min即被灭活。作用于宿主小肠和兔回肠可引起肠液积蓄，出现水样腹泻。 ST通常无免疫原性，能耐受100加热30min，对人和猪、牛、羊均有肠毒性，引起腹泻。,2、产志贺毒素大肠杆菌(STEC) 又称产Vero细胞毒素大肠杆菌(VTEC)，是一类可产生志贺毒素（STx）的病原性大肠杆菌。 引起婴、幼儿腹泻的EPEC以及引起人出血性结肠炎和溶血性尿毒综合征的肠出血型大肠杆菌（EHEC）都产生这类毒素。 在动物，STEC可致猪的水肿病，犊牛出血性结肠炎及幼兔腹泻。,致猪水肿病的STEC的毒力因子 粘附性菌毛(F18)，是STEC菌株的一个重要的毒力因子，它有助于细菌在猪肠黏膜上皮细胞定居和繁殖。 致水肿病2型志贺毒素(STx-2)，是直接导致该病发生的主要毒力因子。,3、其他毒力因子 内毒素(LPS) K抗原 溶血素 大肠菌素V 血清抵抗因子 铁载体,（二）所致疾病 由大肠杆菌所致疾病统称大肠杆菌病，此病在不同的动物有不同的习惯名称和不同的临床表现。 猪：仔猪黄痢、仔猪白痢、猪水肿病 犊牛：败血型、肠毒血型、肠型 羔羊：败血型、肠型 幼驹：肠道症状，剧烈下痢 人：腹泻,仔猪黄痢：病仔猪死亡、黄色稀粪污染肛门周围,仔猪黄痢：病仔猪排出的黄色粪便,仔猪白痢：病猪腹泻，排出灰白色糊状粪便,仔猪白痢：耐过病猪形成僵猪(下)另一为同龄健康猪,猪水肿病：病猪四肢无力，共济失调，抽搐，卧地,猪水肿病：病猪眼睑水肿,三、微生物学诊断 1、病料采集 败血症 内脏组织 腹泻及猪水肿病 肠内容物、粪便、 肠粘膜刮取物等,2、鉴定程序,病料,分离培养,纯培养,鉴定,生化试验,血清学试验,毒力因子,四、防治 1、母源抗体被动免疫 2、注射大肠杆菌菌苗 3、药物预防,第二节 沙门氏菌属(Salmonella),沙门氏菌属包括一群寄生于人和动物肠道内的革兰氏阴性、无芽孢杆菌。 沙门氏菌对人和动物均有致病性，为人和动物沙门氏菌病的病原，并为人类食物中毒的主要病原之一，在医学、兽医和公共卫生上均十分重要。,一、分类与命名 （一）分类 本属细菌现分为两个种： 肠道沙门氏菌(Senterica) 邦戈尔沙门氏菌(Sbongori) 肠道沙门氏菌又分为6个亚种： 肠道亚种(enterica) 萨拉姆亚种(salamae) 亚利桑那亚种(arizonae) 双相亚利桑那亚种 (diarizonae) 豪顿亚种 (houtenae) 因迪卡亚种 (indica) 共计2500多个血清型。,（二）命名 最初以该菌所致疾病命名，如： 伤寒沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌 后改用最初分离地点命名，如： 都柏林沙门氏菌、圣保罗沙门氏菌 目前以抗原式来命名，如： 28:e,n,x:1,7,一、主要特性 （一）形态与染色 为革兰氏阴性中等大小杆菌，光镜下与大肠杆菌无法区别，除雏沙门氏菌和鸡沙门氏菌无鞭毛不运动外，其余各菌均有周鞭毛、能运动。,(二)生长要求与培养特性 本属多数细菌生长要求同大肠杆菌,个别菌对营养要求稍高。培养基中加入硫代硫酸钠、胱氨酸、血清、葡萄糖、脑心浸液和甘油等均有助于本菌生长。 普通培养基上菌落特征与大肠杆菌相似。但在肠道菌选择培养基上，因不发酵乳糖而形成无色菌落。,(三)抵抗力 与大肠杆菌基本相同。但胆盐、煌绿及其他染料对沙门氏菌的抑制作用比对大肠杆菌的抑制作用小，而四硫磺酸钠可被沙门氏菌用作能量来源、并可促其生长。所以在培养基中加入这些物质，可制备沙门氏菌的增菌培养基，用于分离沙门氏菌。,(四)生化特性 不同沙门氏菌生化反应不同，但比较有规律，因此生化反应对沙门氏菌的鉴别有重要意义。 各种沙门氏菌均不分解乳糖和蔗糖，此点可区别于大肠杆菌。,(五)抗原构造 沙门氏菌具有O、H、Vi抗原。O和H抗原是其主要抗原，是沙门氏菌血清型鉴定的物质基础。,1、O抗原 为菌体抗原,至少有60多种。存在于细胞壁表面，为多糖抗原，100加热2.5h不被破坏，其特异性由LPS多糖侧链末端单糖的排列顺序所决定。 一种血清型的沙门氏菌可具有几种O抗原。O抗原以小写阿拉伯数字表示，例如：O1、O2等。,沙门氏菌O抗原群： 将具有共同O抗原的各个血清型沙门氏菌归入一群，可将沙门氏菌划分为若干群，群以大写英文字母表示。 目前已发现的沙门氏菌可分为A、B、C1C4、D1D3、E1E4、F、G1G2、HZ和051063，以及O65067共计51个O抗原群，包括60多种O抗原。 引起人畜疾病的沙门氏菌98%以上均属AF群。,2、H抗原 为鞭毛抗原，成分为蛋白质，有63种。603060min及酒精作用均可破坏其抗原性，但甲醛不能。鞭毛经甲醛固定后，可将O抗原掩盖，此时菌体不能与抗O血清发生凝集。,H抗原分为第1相和第2相两种 第1相 有较高的特异性，常为一部分血清型菌株所具有，为特异相，以小写英文字母表示。 第2相 特异性低，为许多沙门氏菌所共有，称为非特异相。第2相抗原用阿拉伯数字表示，但其中有少数是用小写英文字母表示的。,多数沙门氏菌具有第1和第2两相H抗原，称作双相菌。 少数沙门氏菌只有其中一相H抗原，称为单相菌。 也有的沙门氏菌无鞭毛,称无相菌。 同一O抗原群的沙门氏菌又根据它们的H抗原的不同再细分成许多不同的血清型菌。,3、Vi抗原 是部分沙门氏菌表面的包膜抗原，相当于大肠杆菌K抗原，但一般认为其与毒力有关，故称为Vi抗原。 该抗原60加热1h即破坏其凝集性和免疫原性。有Vi抗原的菌株不被相应的抗O血清凝集，将Vi抗原加热破坏后则能。在普通培养基上多次传代后易丢失此抗原。,4、抗原式（血清型） O抗原：第1相H抗原：第2相H抗原 鼠伤寒沙门氏菌 1，4，5，12：i：1，2 伤寒沙门氏菌 9，12，Vi：d： 迄今，本菌属至少已有2500个血清型,三、致病性 （一）毒力因子 脂多糖 肠毒素 细胞毒素 侵袭力 毒力基因,（二）致病性类型 根据对宿主的适应性分成三群。 第一群是对宿主有高度适应性的专嗜性沙门氏菌，它们只对人或某种动物产生特定的疾病。属于这群的不多。如鸡白痢沙门氏菌、马流产沙门氏菌、猪伤寒沙门氏菌等。 第二群是在一定程度适应于特定动物的偏嗜性沙门氏菌，多在各自宿主中致病，但也能感染其他动物,如猪霍乱和都柏林沙门氏菌等。,第三群是非适应性或泛嗜性沙门氏菌，能引起人和各种动物的沙门氏菌病，具有重要的公共卫生意义。这群血清型占本属的大多数，鼠伤寒和肠炎沙门氏菌是其中的突出代表。 常见的危害人和动物的泛嗜性沙门氏菌约20余种，加上专嗜性和偏嗜性菌型约30余种。,（三）所致疾病 本属细菌常侵害幼龄、青年动物，使之发生败血症、胃肠炎及其它组织局部炎症。对成年动物则往往引起散发性或局限性沙门氏菌病，发生败血症的怀孕母畜可表现流产，在一定条件下亦偶尔引起急性流行性暴发。 摄入沙门氏菌污染的食品可致人的急性食物中毒。,沙门氏菌所致疾病统称沙门氏菌病，不同的动物有不同的习惯名称和不同的临床表现。 猪：猪霍乱、仔猪副伤寒 禽类：鸡白痢、禽伤寒、禽副伤寒 牛：沙门氏菌病 羊：下痢、流产 马：马流产 人：伤寒、副伤寒、食物中毒,沙门氏菌病：病猪肢体末稍皮肤瘀血,沙门氏菌病：病猪下痢,沙门氏菌病: 病猪腹泻、脱水、消瘦,沙门氏菌病: 病猪生长受阻，往往成为僵猪,鸡白痢：雏鸡下痢，肛门周围附着粪便,鸡白痢：病雏鸡羽毛蓬乱，翅下垂，黄白色稀粪封住肛门,四、微生物学诊断 按照肠道菌分离鉴定程序进行沙门氏菌的分离鉴定。,1、鼠伤寒沙门氏菌(1，4，5，12 ：i ：1，2) 2、猪霍乱沙门氏菌(6，7 ：c ：1，5) 3、猪伤寒沙门氏菌(6，7 ：c ：1，5) 4、都柏林沙门氏菌(1，9，12 Vi ：g，p ：-) 5、肠炎沙门氏菌(1，9，12 ：g , m ：1，7) 6、马流产沙门氏菌(4，12 ：- ：e，n，x) 7、牛病沙门氏菌(6，8 ：r ：1，5) 8、鸭沙门氏菌(3，l0 ：e，h ：1，6) 9、雏沙门氏菌(1，9，12 ：- ：-) 10、鸡沙门氏菌(1，9，12 ：- ：-),五、畜禽常见的沙门氏菌,六、马流产沙门氏菌 现在为沙门氏菌的1个血清型，抗原构造为（4,12：-：e、n、x）。该菌只侵害马属动物，使怀孕母马发生流产或继发子宫炎；公马感染发生髫甲瘘、睾丸炎；幼驹表现关节肿大，下痢，有时还见支气管肺炎。 本菌存在于流产的胎盘、胎儿、和流产母马阴道分泌物及局部炎性灶。,