临床一般检验与临床病原学检验

本资料来源本资料来源v 更多资料请访问更多资料请访问.(.)实验室检查实验室检查教学内容教学内容临床一般检验 1.5学时1临床血液学检验 1.0学时2临床生化检验 2.0学时3临床免疫学检验 1.0学时4临床病原学检验 0.5学时51234临床一般检验临床一般检验 血液一般检查 尿液一般检查粪便一般检验脑脊液一般检验血红蛋白测定 （Hb)红细胞比容测定 (Hct)网织红细胞计数 (Ret)血小板计数 （plt)红细胞沉降率测定 （ESR）白细胞分类计数 （DC）红细胞计数（RBC）血液一般检查血液一般检查血液一般检查血液一般检查-血液分析仪种类血液分析仪种类COULTER LH 750 Hematology AnalyzerSTKS血细胞分析仪血液一般检查血液一般检查-血液分析仪原理血液分析仪原理 白细胞直接地、同时地接受VCS三重检测V（体积）脉冲大小 细胞大小（N、L、M）脉冲数量 细胞数量C（光散射）激光对每个细胞扫描分析（细胞结构）光散射信息（鉴别颗粒），准确分析嗜中性、嗜酸 性和嗜碱性。S（高频传导）根据细胞壁能产生高频电流特性（核浆比例、化学成分），可辨别体积相同而质量不同的两细胞群。如小淋巴与嗜碱性，幼稚淋巴与嗜中性等。血液一般检查血液一般检查-红细胞计数红细胞计数(1)(1)Text in hereText in hereText in hereText in hereText in here血液一般检查血液一般检查-红细胞计数红细胞计数(2)(2)方法参考值临床意义血液分析仪目视计数法成年男性 (4.0-5.5)1012/L成年女性 (3.5-5.0)1012/L新生儿 (6.07.0)1012/L见“血红蛋白测定”血液一般检查血液一般检查-血红蛋白测定血红蛋白测定(1)(1)原卟啉+铁 血红素(Heme)+珠蛋白 HbText in hereText in here方法参考值 临床意义血液分析仪HbHb衍生物波长540nm溶血剂吸光度Hb浓度成年男性 120160 g/L成年女性 110150 g/L新生儿 170200 g/LRBC、Hb 生理性 婴幼儿、老人、妊娠妇女病理性 再障、缺铁、巨幼贫、溶贫RBC、Hb 相对性(血容量)剧烈呕吐、腹泻绝对性(缺氧和造血系统疾病)高原居民 肺心、真红血液一般检查血液一般检查-血红蛋白测定血红蛋白测定(2)(2)方法血液分析仪法目视计数法参考值 成人（410）109/L新生儿 （1520)109/L6月2岁（1112)109/L白细胞总数的增多或减少主要受中性粒细胞数量的影响。白细胞减少 WBC 4 109/L 粒细胞减少症 N 1.5 109/L粒细胞缺乏症 N 0.5 109/L血液一般检查血液一般检查-白细胞计数白细胞计数血液一般检查血液一般检查-白细胞分类计数白细胞分类计数(1)(1)方法：血液分析仪法 血涂片分类法L 20-40%（0.8-4）109/LM 3-8%（0.12-0.8)109/L N 50-70%（2-7)109/L E 0.5-5%（0.05-0.5)109/LB 0-1%(0-0.2)109/L血液一般检查血液一般检查-白细胞分类计数白细胞分类计数(2)(2)L 感染性疾病（病毒）淋巴细胞性恶性疾病等L 接触放射线、先天性免疫缺陷病 获得性免疫缺陷综合症M 生理性增多 病理性增多M 无临床意义E 过敏性疾病、寄生虫病、皮肤病等E 伤寒、大手术、烧伤等应激 状态N 急性感染(化脓性球菌）、急性大出血 白血病及恶性肿瘤N 感染（革兰氏阴性杆菌）血液系统疾病、自身免疫性疾病 单核-吞噬细胞系统功能亢进B CML 转移性癌 骨髓纤维化血液一般检查血液一般检查-血小板计数血小板计数血液分析仪法目视计数法方法（100-300)109/L参考值临床意义Plt(400 109/L)原发性增多、反应性增多血液一般检查血液一般检查-网织红细胞计数网织红细胞计数方法血液分析仪法玻片法、试管法参考值临床意义Ret 骨髓红细胞系的增生旺盛 溶血性贫血（可20%）急性失血后（出血停止恢复正常）缺铁贫、巨幼贫（治疗有效Ret）Ret 骨髓造血功能减低 再生障碍性贫血0.5%急性白血病 淋巴瘤、骨髓瘤相对数 0.5%-1.5%绝对数（24-84)109/L血液一般检查血液一般检查-红细胞比容测定红细胞比容测定方法血液分析仪法温氏法、微量法参考值男性 42-49%女性 37-48%临床意义Hct 各种原因所致的血液浓缩，（如严重呕吐、腹泻、大量出汗）Hct 各种类型贫血血液一般检查血液一般检查-红细胞沉降率红细胞沉降率方法 血沉仪法魏氏法参考值魏氏法 男性 0-15mm/1h 女性 0-20mm/1h临床意义ESR 生理性增快 12岁以下的儿童、妇女月经期 病理性增快（炎症、组织损伤及坏死、良、恶性肿瘤的鉴别）57%内容内容Description of the contents尿液的一般检验尿液的一般检验 外观 尿量 蛋白质检测 葡萄糖检测 酮体检测 显微镜检查尿液的一般检验尿液的一般检验-理学检查（外观）理学检查（外观）正常新鲜尿液肿瘤炎症结核损伤结石PNH蚕豆病恶性疟疾输血反应盐类结晶菌尿脓尿乳糜尿饮水过少胆红素尿药物影响泌尿系统化脓性感染肾周淋巴管阻塞丝虫病红色尿酱油色尿混浊尿深黄色尿白色尿 无尿100ml/d尿液的一般检验尿液的一般检验-理学检查（理学检查（尿量）尿量）少尿2500ml/d参考值 成人 800-2000ml/d 夜尿量 3.5g/d2+3+1+2+3+4+中度增加高度增加参考值 定性 阴性定量 0.1g/L 1.62.0mg/L 产生尿糖可预测糖尿病和少见的肾性糖尿餐后1+4+1020g/L 0.51g/d糖尿病、胃切除后甲状腺功能亢进、肾小管损伤、妊娠和产后1014天尿液的一般检验尿液的一般检验-酮体检测酮体检测酮体 -羟丁酸（80%）丙酮乙酰乙酸参考值 阴性（以乙酰乙酸150mg/L）)1+4+常见于饥饿、运动、糖代谢异常、呕吐、腹泻、周期性呕吐、酮症 性低血糖。可见于高脂饮食、内分泌疾病尿液的一般检验尿液的一般检验-显微镜检测（显微镜检测（1 1）参考值参考值 红细胞3个/HP肾脏疾病：急性肾小球肾炎狼疮性肾炎急进性肾炎等泌尿生殖道疾病参考值参考值 白细胞15%(诊断本病的重要依据）贫血检验贫血检验-铁染色铁染色铁缺乏时正常时外铁 铁粒幼红细胞 环形铁粒幼红细胞食物 Fe3+胃肠道Fe3+Fe2+肠粘膜细胞Fe2+Fe3+血浆转铁蛋白Fe3+单核巨噬 系统贮存 血液RBC骨髓造血 RBC 破坏 出血丢失铁功能铁随细胞脱落丧失来源消化吸收运输再利用排泄贫血贫血-铁代谢胃酸、vitc铜兰蛋白 血清铁血清铁(SI)SI)总铁结合力(TIBC)转铁蛋白饱和度（TS）血清铁蛋白(SF)贫血检验贫血检验-铁代谢检查铁代谢检查在酸性条件下，转铁蛋白中的铁与蛋白分离，将Fe3+还 原成Fe2+，测定血清铁含量 男性:11-30 umol/L 女性:9-27 umol/L 血清铁与转铁蛋白结合力的比（血清铁/总铁结合力）20%50%铁被人体吸收后进入血液，与血中部 分1-球蛋白结合成运铁蛋白至组织中被储存、利用。部分未被结合的1-球蛋白在体外还可与加入的定量铁结合而呈饱和状态，此时加入的最大剂量铁称总铁结合力 男性:50-77 umol/L 女性:54-77 umol/L可容纳铁原子的微量蛋白 男性:15200ug/L 女性:12150ug/L 贫血检验贫血检验-缺铁性贫血缺铁性贫血 Normal red cells 缺铁性贫血骨髓象 缺铁贫反甲Hypochromia Microcytosis 红细胞外在因素脆性试验脆性试验Rous testRous testHam testHam testG-6-PDG-6-PD活性活性血红蛋白电泳血红蛋白电泳CoombCoombs tests test红细胞 内在因素贫血检验贫血检验-溶贫分类溶贫分类RBC膜缺陷RBC酶缺陷血红蛋白异常免疫性溶贫遗球（先天性）PNH（获得性）G6PD缺陷血红蛋白病ProductDescription of the companys products贫血检验贫血检验-RousRous试验试验 原理临床意义游离Hb 肾小管 铁 重吸收 分解 含铁血黄素尿+亚铁氰化钾 细胞脱落 普鲁士蓝正常人呈阴性Rous 阳性：慢性血管内溶血（PNH）贫血检验贫血检验-红细胞孵育渗透脆性试验红细胞孵育渗透脆性试验原理 37孵育24小时RBC 葡萄糖消耗 ATP Na泵出 细胞膨胀 脆性参考值（50%溶血）临床意义未孵育 4.004.45 g/L Nacl 孵育 4.655.9 g/L Nacl孵育脆性 遗传性球形红细胞增多症孵育脆性 珠蛋白生成障碍性贫血 12.12.09IU/gHb(37）贫血检验贫血检验-葡萄糖葡萄糖-6-6-磷酸脱氢酶活性磷酸脱氢酶活性 G6PDG6P NADP 6PGNADPH在340nm处有吸收峰，可通过单位时间生成的的NADPH的量，计算G6PD活性。参考值临床意义G6PD测定用于溶血性贫血的鉴别诊断 G6PD缺乏症、药物反应、蚕豆病等 新生儿AFA2-E DGKJH异常区带+正常区带点样JJ琼脂胶电泳：HbA 95%HbA2 1.63.5%HbF 0.21.0%参考值临床意义用于确诊是否有异常血红蛋白存在，各种Hb的比例。HbA2 是诊断珠蛋白生成障碍性贫血的重要依据 HbA2 缺铁性贫血及铁粒幼细胞性贫血贫血检验贫血检验-HbHb电泳电泳贫血检验贫血检验-CoombCoombs s testtest人血清或蛋白质（不完全抗体）免疫抗人球蛋白和抗补体抗体 （完全抗体）红细胞表面吸附有不完全抗体和补体凝集现象直接抗人球蛋白试验示意图间接抗人球蛋白试验示意图病人血清RBC+抗IgG主要用于Rh或A、B、O血型妊娠免疫性新生儿溶血病母体血清中不完全抗体的检测。自身免疫性疾病、药物免疫性和同种免疫性溶血性贫血贫血检验贫血检验-Ham testHam test受检者RBC+正常血清（补体）稀HCl 3730min溶血(+)说明受检者RBC对补体敏感性很高正常人为阴性Ham是诊断PNH的筛选试验。只有此试验阳性，PNH才能成立，具有特异性慢性再障可有此试验阳性急性白血病的细胞形态学分型常用血细胞化学染色检验慢性白血病的细胞形态学分型再生障碍性贫血（AA）骨髓增生异常综合症（MDS）骨髓细胞学检验骨髓细胞学检验骨髓细胞学检验-POXPOX临床意义 阳性 粒细胞系弱阳性单核细胞系阴性 淋巴细胞系 红细胞系 巨核细胞系原理 H2O2 活性氧 联苯胺 联苯胺蓝 +亚硝基铁氰化钠 蓝黑色颗粒定位于细胞质中MPO骨髓细胞学检验骨髓细胞学检验-NAPNAP -磷酸萘酚钠 -萘酚 +重氮盐 不溶性黑色沉淀原理NAP PH9.4 9.6水解临床意义慢粒与类白血病的鉴别 慢粒0；类白急性白血病类型的鉴别 急淋N；急粒再障与PNH的鉴别 再障；PNH 细菌与病毒感染的鉴别 细菌感染；病毒感染骨髓细胞学检验骨髓细胞学检验-PASPAS原理临床意义良性与恶性淋巴细胞增生性疾病的鉴别正常淋巴-；慢淋、淋巴肉瘤+幼红细胞增生的性质的鉴别红血病和红白血病+某些细胞类型的鉴别Reed-Sternberg -；巨核细胞+；Gaucher细胞+；腺癌+糖原 二醛基 +Schiff 无色品红 紫红色过碘酸氧化骨髓细胞学检验骨髓细胞学检验-AS-DCEAS-DCE原理临床意义阳性 急粒酶活性显著增加阴性 急单、急淋、巨核细胞性白血病 细胞内酯酶水解偶联不溶性有色沉淀氯化醋酸AS-D萘酚萘酚AS-D+坚牢紫酱 GBC骨髓细胞学检验骨髓细胞学检验-NAE+NaFNAE+NaF原理临床意义急单：NAE+；+NaF 抑制急粒：-；+NaF 不抑制-醋酸萘酚-醋酸萘酚酯酶萘酚+重氮盐偶联不溶性有色沉淀分类按白血病细胞分化程度分类1.急性白血病2.慢性白血病按白血病细胞形态分类可分为淋巴细胞型、粒细胞型、单核细胞型。还有少见类型。临床分型1.急性白血病2.慢性白血病3.少见类型白血病4.FAB形态学分类分型细胞形态学分型 Morphological 包括Wright及细胞化学染色免疫学分型 Immunological应用针对人类白细胞分化抗原(CD）系统的多种McAb和免疫化学技术来判别白血病细胞的系统及其分化阶段细胞遗传学 Cytogentics应用高分辨染色体分带技术和生物分子学技术发现特异的染色体异常分子生物学 Molecular biology应用PCR等技术检测白血病细胞的基因重排和融合基因的形成，骨髓细胞学检验骨髓细胞学检验-白血病白血病形态学分型化学染色 ALL-L1：以小细胞为主 ALL-L2：以大细胞为主 ALL-L3：似Burkitt型 POX -PAS +NAP 免疫、遗传、分子B-ALL:HLA-DR+、CD19+、CD10+、CD20+CD19的反应谱广，是鉴别B-ALL敏感和较为特异的标志。T-ALL：CD7+、CD5+、CD3+、CD4+、CD8+分化过程中表达的顺序：CD7 CD2 CD3骨髓细胞学检验骨髓细胞学检验-ALLALL形态学分型ALL-L1ALL-L1ALL-L3ALL-L3骨髓细胞学检验骨髓细胞学检验-AMLAML（1 1）AML-M0型（极微分化型急性髓细胞白血病）形态上不能鉴别，必须用免疫标志物确定AML-M1型（急性原始粒细胞白血病未分化型）原粒细胞90%AML-M2型（急性原始粒细胞白血病部分分化型）-M2a 原粒细胞3089%，早幼粒以下细胞 10%，单核细30%AML-M3型（急性早幼粒细胞白血病）-M3a 粗颗粒型 -M3b 细颗粒型M1M2M3aM3b骨髓细胞学检验骨髓细胞学检验-AMLAML（2 2）AML-M4型（急性粒-单细胞白血病）-M4a 原始和早幼粒为主，原、幼单+单核细胞20%-M4b 原、幼单核为主，原始+早幼粒20%-M4c 原始细胞既有粒系又有单特征的细胞20%-M4E0 除有上述特征外，形态异常的嗜酸性细胞占 530%AML-M5型（急性单核细胞白血病）-M5a 原单80%-M5b 原单+幼单30%,以幼单核细胞为主AML-M6型（急性红白血病）红系50%,形态异常的原始+幼稚 30%AML-M7型（急性巨核细胞白血病）原巨核细胞30%M4M5M6M7临床表现：起病隐匿，病程缓慢，巨脾分期：慢性期、加速期、急变期实验室特点：1.Hb、WBC、BPC2.粒系极度增生，E/G ，粒系以中、晚幼粒、杆状核增 生为主，嗜酸性，嗜碱性 原粒+早幼粒10s以上才有病理意义临床意义血栓与止血的检验血栓与止血的检验-FgFg临床意义血栓与止血的检验血栓与止血的检验-FDPFDP、D-DD-D（1 1）参考值 FDP 5mg/L D-D 0.5mg/L临床意义FDP：原发性纤溶亢进时，FDP 、DIC等所致的继发性纤溶亢进时，FDP D-D：D-D是交联纤维蛋白降解产物之一，为继发性纤溶特有代谢物。作为溶栓 治疗有效的观察指标陈旧性血栓不升高，对新鲜血栓形成有意义血栓与止血的检验血栓与止血的检验-FDPFDP、D-DD-D（2 2）检测方法 凝固法 电磁感应原理比色法全自动血栓与止血分析仪全自动血栓与止血分析仪