植物激素整理

植物激素的检测方法1. 生物测试生物测试法是最早采用的植物激素测定方法它是利用植物激素 的生理活性通过某些植物的组织和器官对植物激素产生的特异性反 应进行测定的。优点：简便易行也能反映植物激素的生理活性缺点：专一性较差且植物体内含有生长素类似物T拮抗物等影响测定的结果 需在前处理中尽可能纯化所要测定的组分 过程复 杂此外重复性差工作量大2. 免疫检测免疫学技术应用于植物激素的测定有力地促进了激素定量研究的 发展它的基本原理是利用抗原和抗体的特异性竞争结合。优点：了检测灵敏度可检测出10-12 g的微量物质相应其前处理也 得到了简化又改善了测定的专一性。缺点：抗体的制备较复杂。3. 物理化学方法物理化学方法分光谱法和色谱法两种1)分光谱法：主要有紫外吸收光漕红外吸收光谱和荧光法 优点：灵敏度高缺点：专一性差2)色谱法：利用物质在不同介质中的分配原理进行测定的，包括 纸上层析，薄层层析(TLC)，气相色谱(GC)，高效液相色谱(HPLC)以 及气质联用（GC-MS）等，将分离和测定结合起来是色谱法的基本特点。（1）纸上层析和TLC：优点：设备简单易操作缺点：分离效率和灵敏度有限制（2）GC 和 HPLC：是在纸上层析和TLC的基础上装备了商品化的色谱柱和检测器，保证了检测方法的专一、灵敏和准确（3）GC 和 HPLC 方法：分析植物激素,灵敏度和选择性高,重复性好，但对前处理要 求较高；又因保留时间的分辨有一定限制，若达不到所需纯度要 求可能会出现多种化合物的保留时间相同或接近而影响测定结果。 （4）在植物激素的理化检测中仪器联用是当代的发展趋势：最常用的结合系统是气相色谱质谱联用（GCMSD，技术，它是 目前最为可靠的激素检测方法还可验证其它测定方法的可靠性 而且还可鉴定未知物质的结构，但需经冗长的样品纯化程序设 备昂贵，使用和维护成本高。此外有气液相色谱GLCD配以火焰 热离子检测器（FTDD快速灵敏地对植物细胞分裂素定量测定25, 也有薄层色谱与气相色谱结合分析ABA。内源植物激素：植物体内产生的激素主要有：、生长素（auxin）、赤霉素（GA3）、细胞分裂素（CTK）、脱落酸（abscisic acid, ABA）、乙烯（ethyne，ETH）和油菜素甾醇、吲哚乙酸（IAA）玉米素（Z）、玉米素核苷（ZR）反玉米素（ZT）复合胺、褪黑 激素秋水仙素吲哚丁酸外源植物激素：人工合成加到植物中2,4-D（2,4-二氯苯氧乙酸），吲哚丙酸、蔡乙酸、4-碘苯氧乙酸乙稀利水杨酸（SA）茉莉酸b9（必久）矮壮素（ccc）:又叫三西，碌化碌代胆碱 青 鲜素（mh）奈乙酸吲哚丙酸（IPA）吲哚丁酸（IBA） 6-苄基腺嘌吟（BA）激动素（K）蔡乙酸（NAA）实验仪器中文：LC-6A高效液相色谱仪日本岛津制作所产品。，硅胶柱（250mmX5mm）日本岛津制作所产品SPD-6AV紫外-可见光度检测器日本岛津制作所产品C-R3A数据处理机日本岛津制作所产品HPLCWaters公司产Alliance系列HPLC及Premier LCT MS/ MS质谱联用设备加拿大Waters公 司Xterra C18色 谱柱（100 mm x2.1 mm x3.5u m,加拿大 Waters公 司美国HP-5890II型气相色谱仪，配备FID检测器，HP-3395积分仪1100型高效液相色谱仪美国Aglent公司SLC-10A VP高效液相色谱仪日本岛津公司英文：HPLC-UV analysis, an Agilent 1100 series HPLC-UV system (AgilentTechnologies, USA）Both methanol and ethanol（HPLC grade） Merck （Darmstadt, Germany）Acetic acid （analytical reagent grade） Fisher Scientific （Hanover Park, IL, USA）.实验试剂中文：,a-蔡乙酸（NAA）,吲哚乙酸（IAA ）, 6-苄基嘌吟（BA）,K,GA（上海伯奥生物科技公司）ZT （上海丽珠东风生物技术有限公司IBA （英国产，上海化学试剂分装站），IPA（Sigma公 司）褪黑激素、吲哚乙酸（山入）和复合胺（Sigma Chemica公司甲醇和乙腈（HPLC级，加拿大VWR Scientific公司甲酸（分析纯，Sigma公司IAA,GA3，Z （玉米素）和ABAFluka公司GA3 和 ABASigma 公司IAA,ABA,GA中国药品生物制品检定所甲醇、三氯甲烷和乙酸乙酯分析纯赤霉素GA3、生长素、IAA和ABA (纯度大于97%, Sigma公司)冰醋酸(AR，上海化学试剂公司)玉米素核苷(zR)Sigma公司玉米素(z)中国科学院上海生物化学研究所玉米素、赤霉素、生长素、脱落酸Sigma,纯度A99%腺素、激动素、6-苄氨基嘌吟、秋水仙素、吲柴3-丁酸(科密欧，纯度A95%)色谱纯甲醇德国MERCK公司分析纯乙酸、甲醇、乙酸乙酯、石油醚西安化学试剂厂英文：GA3, IAA, ABA (脱落酸)，JA, IBA, NAA, 2,4-D(2, 4-二氯苯酚代乙 酚)，1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide (EDC) and sodium dodecyl sulphate (SDS)Sigma-Aldrich (St. Louis, MO,USA).Z, BA, GA, ABA and IBASigma-Aldrich (Steinheim, Germany)IAA,NAAand 2,4-D PhytoTechnologyLaboratories(Shawnee Mission, USA)植物激素的危害矮壮素：毒理学的研究表明:即使在低于日允许摄入量浓度水平 下，矮壮素对动物的繁殖能力仍有不良影响。美国国家职业安全和健 康研究所发布的化学物质毒性数据库已将矮壮素列为疑似内分泌十 扰物质。赤霉素：赤霉素可能干扰人体正常的内分泌系统袁长期食用会 在人体中蓄积袁造成器官的慢性中毒袁并可能引起癌变袁严重危及 消费者的身心健康。可影响机体的内分泌系统受试动物的甲状腺、 卵巢、肾上腺等内分泌腺重量明显增加使得动物某些激素水平发生 改变，影响动物的生长发育 甚至发生癌变。乙烯利：具有一定的神经毒性、致突变性和弱的激素样作用。对 小鼠的免疫功能具有一定的抑制作用能导致小鼠体细胞、生殖细胞遗 传损伤，使小鼠骨髓细胞微核率和雄性生殖细胞畸形率提高干扰精 子正常生成和成熟过程导致小鼠体细胞染色体畸变和生殖细胞基 因突变。乙烯利对人类具有潜在的诱癌、致畸及其他多方面的危险。蔡乙酸：有一定抑制睾丸细胞增殖活性、诱发睾丸细胞凋亡的作 用。2, 4七：小鼠长期暴露在2, 4 - D的环境中会造成骨骼畸形,致 病率和死亡率增加;2, 4 - D具有急性神经毒性,对皮肤和眼睛有刺 激作用,吸入或接触后,其急性毒性作用主要表现为神经性毒性； 慢性毒性作用表现为对血液、肝、肾的毒性及抑制某些酶的活力,抑 制某些蛋白质的合成。NAA:属于低毒农药，大白鼠急性口服1_。50为1 0005 900mg - kg- 1。对人的眼睛、皮肤、粘膜和上呼吸道有刺激作用吸入后 可引起咳嗽、喘息、喉炎、气短、头痛、恶心、呕吐通过食道引起 中毒，对肝、肾造成损害。青鲜素：可能是致癌物 因为它能引起老鼠的染色体断裂和畸变。多效唑：高剂量的多效唑对动物雄性生殖器官有损伤子代体重 和繁殖指数降低、肝脏受损 可能是致癌物质 应慎用；多效唑粉剂 对皮肤和眼睛有轻微至中等的刺激作用。厂家：上海喜润化学工业有限公司植物组培及激素-上海世泽生物科技有限公司（比较全）