南农传染病实习报告范本

.实习报告学院:动物医学院课 程:传染病学实习班级:动医09X班学号: 1XX09XXX 姓 名:大猪妖指导教师:王先炜职称:副教授实习时间20XX5月27日至 20XX6月1日实习地点逸夫楼401720XX6月9日XX农业大学教务处制实习报告一、实习目的1. 以副猪嗜血杆菌病和蓝耳病为模型,学习传染病的临床诊断、猪体剖检的方法,结合病理变化,对患病猪进行初步诊断；2. 通过对感染猪体内病毒和细菌的分离鉴定,学习掌握细菌性猪病、病毒性猪病的实验室诊断方法。3. 掌握畜禽传染病的临床诊断技术。4. 掌握畜禽传染病实验室诊断方案的设计、诊断试剂的准备和检测结果分析判定。5. 掌握畜禽细菌与病毒混合感染的病原分离与鉴定技术。6. 掌握细菌药敏试验指导畜禽临床用药。二、 实习安排时间地点内容周一5月27日白天逸夫楼4017诊断试剂的配制；器皿的准备以及灭菌的处理周二5月28日白天逸夫楼4017病猪的临床诊断；病料的采取与处理；细菌的涂片检查与分离培养周三5月29日白天逸夫楼4017病毒的分离接种病料过滤和接种细胞；分离细菌镜检和增殖周四5月30日晚上逸夫楼4017细菌的生化试验、药敏试验和细菌鉴定；观察接种细胞周五5月31日江浦农场参观学习周六6月1 日下午逸夫楼4017病毒细胞病变观察、菌落鉴定三、 实习内容第一天：王先炜老师讲解本周传染病学实习的主要内容,传染病临床诊断的主要方法,实验器材的准备,实习过程中的注意事项以及实习分组安排,将第一大组所有同学再分为三大组, 9小组。准备实验器材,配制试剂观察动物发病情况检测病毒检测细菌病料匀浆反复冻融平板划线分离、肉汤接种细胞接种纯培养药敏实验生化试验病毒的初步鉴定细胞病变观察实验准备一灭菌消毒用品：手术刀片、手术刀柄、剪刀、大镊子、小镊子、剪刀、黄色枪头一盒、用锡箔纸包好小滤器一组3至5个、玻璃匀浆器、1.5mL离心管、PCR管。二其他用品：解剖盘、酒精灯、酒精棉球、解剖刀、记号笔、注射器、染色缸、乳胶手套、接种环、载玻片、细菌涂布棒、倒置显微镜等。（三） 试剂及配制1. TSA平板：每个组23块,全部9组一起配,按10组量配置,高压后然后分装。 每块TSA平板的成分：TSA2g去离子水50mL121,15-20min,冷却至50左右,加入1.25mL的小牛血清,0.625mLNAD2. TSB液体培养基成分：全部小组依旧一起配制,高压后然后分装, 每管液体培养基的成分：蛋白胨0.04g蛋白示0.04g酵母提取物0.05gTSB0.25g去离子水0.01L混匀后可分装小试管内每管3mL 121,15-20min用之前每只试管加1L血清,1LNAD血清：用前要灭能56, 40min3. 生理盐水：0.45g NaCI 加入50mL去离子水,然后高压灭菌4. 细胞维持液：在50ml的DMEM液中加入1ml的血清和1ml的双抗青、 链霉素；四 倒TSA平板将TSA溶液高压后冷却至60左右,加入1.25mL的小牛血清,0.625mLNAD。然后将平板边沿用酒精灯外焰烧一下后,将TSA倒入平板中,铺满。标记好班级,组号,名称和时间第二天：猪体剖解、细菌学检查和病毒学检查病料取样。王老师给每一大组安排了一位研究生给我们及时的指导。一外部检查观察被毛和营养状况,检查四肢、眼结膜的颜色、皮肤等有无异常,下颌淋巴结是否有肿胀现象,肛门附近有无粪便污染等。触诊：下颌淋巴结,腹股沟淋巴结,髂下淋巴结（二） 宰杀,固定和剖腹检查1. 宰杀：劲动脉放血致死。因为猪对麻醉药不敏感,故不使用麻药,直接放血致死。2. 固定：猪体取背卧位,先切断肩胛骨内侧和髋关节周围的肌肉以部分皮肤与躯体相连,将四肢向外摊开,以保持尸体仰卧位置。3. 腹腔剖开从剑状软骨后方沿腹壁正中线由前向后至耻骨联合切开腹壁,再从剑状软骨沿左右两侧肋骨后缘切开至腰椎横突。将其向两侧分开,腹腔脏器即可全部露出。按照脾、肠、胃、肾的次序检查,并逐一取出腹腔脏器,观察脏器有无病变。4. 胸腔剖开：打开胸腔后先看心包膜有无粘连、是否有纤维状物渗出,看左右肺的大小、质地、颜色等。5. 注意事项：a) 剖检过程中要注意个人防护,剖检人员必须带手套,防止手划伤感染。b) 如病猪已经死亡,要及时进行尸体剖检。c) 剖检中要做记录,将每项检查的各种异常现象详细记录下来,以便根据异常现象做出初步诊断。三部分细菌学实验和病毒学病料处理1 细菌的分离培养：取病猪肺脏冰冻组织需充分解冻,用酒精棉球点燃消毒肺脏表面,无菌手术刀切口,将接种环伸入于肺脏肺泡内,无菌划线接种TSA平板。具体操作如下：a) 右手执笔式持接种环,在酒精灯火焰上灼烧接种环,待冷；b) 左手抓紧琼脂培养基平皿,用手掌将平皿的底固定,用手指将平皿的盖略抬起一些,进行接种。或者,将平皿盖放在试验台上,尽量直立平皿靠近酒精灯火焰；c) 右手接种环在琼脂的一端涂布,划线时,接种环与琼脂表面是30-40的角度轻轻接触,利用腕力动作,切忌划破琼脂表面；d) 接种完毕,盖好平皿盖,在平皿底玻璃上用记号笔注明接种时间,接种者等,然后将平皿的底朝上,放置在37温箱内培养24-48小时培养后可出现多种菌落,注意区分不同培养时间点不同类型菌类形态。2组织触片和染色观察：a) 触片：取一小块肺脏组织,在洁净的载玻片上轻轻地作23 个压迹,制成触片；b) 干燥：将标本面向上,手持载玻片一端的两侧,小心地在酒精灯上高处微微加热,使水分蒸发,但切勿紧靠火焰或加热时间过长,以防标本烤枯而变形；c) 固定：在酒精灯处快速的来回通过2-3秒钟,并不时以载玻片背面接触皮肤,不觉过烫为宜不超过60,放置待冷后,进行染色；d) 初染：在涂片薄膜上滴加草酸铵结晶紫1-2滴,使染色液覆盖涂片,染色约1min；e) 水洗：用洗瓶中自来水冲洗,直至洗下的水呈无色为止；f) 媒染：用100-1000L移液枪吸取约300L碘液滴在涂片薄膜上,使染色液覆盖涂片,染色约1min；g) 水洗：用洗瓶中自来水冲洗,直至洗下的水呈无色为止； h) 脱色：斜置载玻片,滴加95%乙醇脱色,至流出的乙醇不现紫色为止,大约需时20-30S,随即水洗；i) 复染：滴加沙黄染液1-2滴,使染色液覆盖触片约1min；j) 水洗：斜置载玻片,在自来水龙头下用小股水流冲洗,直至洗下的水呈无色为止；k) 干燥、观察：用吸水纸吸掉水滴,待标本片干后置显微镜下,用低倍镜观察,发现目的物后滴一滴浸油在玻片上,用油镜观察细菌的形态及颜色,紫色的是革兰氏阳性菌,红色的是革兰氏阴性菌。3病毒学病料处理a 临床上各种疾病的症状非常相似,而且极易发生混合感染,因此确诊需 依赖于实验室的诊断。病毒性疾病的实验室检验的大致程序如下：临床标本分离培养初步鉴定最后鉴定。b 用剪刀剪取病变明显的肺脏部位,置于小青瓶或平皿中,用小剪刀剪成大小约1mm3的碎块,然后加入等量灭菌生理盐水或PBS,置于玻璃匀浆器中进行匀浆,组织匀浆液倒入小青瓶中,置于-20冰箱冻存备用。c 王老师帮助我们反复冻融三次。 实验结果1. 剖解记录表格时间：2013-5-28地点：逸夫楼4017组号： 第五组品种： 乳猪性别：公年龄： 不详外部检查体表被毛粗乱,体形消瘦；可站立,眼结膜颜色正常；腰臀皮肤可见芝麻到绿豆大的红点,肛门附近无粪便污染状况,耳朵、胸、腹、背、四肢：全身有不同体积的瘀血斑,可视粘膜发绀,关节有轻微肿胀,站立姿势不稳,肛门周围有少量粪便污染。触诊下颌淋巴结肿胀,发红,颜色不均,质地较硬,有结节状结构。腹股沟淋巴结肿胀,横切断面也有出血点,肺门淋巴结肿胀,腹股沟淋巴结肿胀,发红,颜色不均,质地较硬,表面凹凸不平呈结节状变化类似,髂下淋巴结,肿胀明显,表面更不平整。脏器剖检胸腔肺脏有淡红色轻度肉质病变,但不肿胀,表面不光泽,不平整。心脏无明显病变,肝正常肺门淋巴结颜色变红,有肿胀变化和结节状结构。腹腔各个肠断和肝组织基本正常,脾呈紫黑色,边缘卷褶皱,有萎缩,光泽低,表面不是特别平整。肾表面有点状出血点,被膜松软,光泽低, 2. 镜检结果可能由于细菌含量较低,所以只能看见肺组织细胞,未能见到副猪嗜血杆菌,后来对于副猪嗜血杆菌的阳性培养液进行涂片镜检观察,可以见到红色的细短杆菌。肺组织细胞猪肺组织涂片镜检X40副猪嗜血杆菌阳性副猪嗜血杆菌涂片镜检X40第三天：病毒的分离接种病料过滤和接种细胞；分离细菌镜检和增殖一细菌菌落观察,并且挑取单个菌落到TSB液体培养基中具体步骤：在接菌之前,加入100L辅酶A和100L小牛血清,挑取疑似菌落HPS为无色或淡灰色,半透明小菌落接到TSB培养基中,放到摇床,37培养24h。明天观察。（二） 病毒部分：1. 病料的无菌处理a 将保存的组织悬液反复冻融三次后加入EP管中,12000rpm离心15min,取上清。b 将灭菌的小滤器置于无菌的小青瓶上,用注射器吸取离心后的上清,将注射器与滤器相接,用力压注射器活塞,使上清通过滤器,滤液即为无菌的含有病毒的组织上清,置于-20冰箱冻存备用或接种细胞。2 细胞接种a) 镜检观察待细胞板上细胞铺满单层,弃去细胞板中的营养液；b) 在细胞板中加入过滤后的组织上清液200L,同时设定阴阳性对照。c) 使其铺满细胞表面,置于37二氧化碳培养箱孵育半小时；d) 弃去组织滤液,在细胞中加入细胞维持液500L,37C二氧化碳培养箱培养,每天观察细胞生长情况和有无细胞病变。三 结果1. 接种剖解猪的肺脏的病料的培养皿上没有长菌,长的也是污染的菌,因为菌落形态较大,白色。2. 接种阳性病料的板子长了三个菌落,一个较大,可能是杂菌,另外两个较小,疑似副猪嗜血杆菌,所以就用这两个菌落接入TSB液体培养基中3. 另外一块板子上长得菌落稍大,并且在光下,45度角,可见蓝色荧光,所以也来接种鉴定一下。4. 编号1的是阳性疑似副猪,编号2、3为疑似巴氏杆菌的培养,待明天上午观察结果。第四天：细菌的生化试验、药敏试验和细菌鉴定以及观察接种细胞(一) 上午观察TSB培养基中细菌生长情况(二) 晚上观察病毒液接种的细胞,是否有细胞病变。(三) 细菌的药敏试验1. 用涂布棒将1号与3号细菌接种于TSA平板上,将各种抗菌药物圆纸片任选7种分别贴于培养基表面,各片距离要相等,37培养,培养24h检查。2. 药敏试纸片种类：头孢噻肟、头孢曲松、阿米卡星、青霉素G、氨苄西林、头孢唑啉、诺氟沙星、环丙沙星、阿莫西林、阿奇霉素、庆大霉素、新霉素、氯霉素、红霉素、林可霉素、复方新诺明。我们小组选择的是环丙霉素、红霉素、诺氟沙星、阿莫西林、林可霉素、复方新诺明、阿奇霉素3. 结果判定：根据药物纸片周围有无抑菌圈及其直径大小,来判断细菌对药物的敏感程度。无抑菌圈,细菌对该抗生素不敏感；抑菌圈小于10mm,对该抗生素低度敏感。(四) 细菌的生化试验1. 用接种针无菌取分离的细菌24h纯培养物分别接种到含葡萄糖、蔗糖、果糖、半乳糖、D-核糖和麦芽糖培养基的生化管内,开口向下,放灭菌培养皿中,37培养24h,观察结果并记录。2. 同时进行脲酶试验、氧化酶试验和接触酶试验。a) 糖类分解试验：原理：接种细菌若发酵某种糖或醇,可产酸,使培养液颜色由紫色变为黄色；如发酵的同时又产生气体,培养液颜色由紫色变为黄色的同时,在微量发酵管顶部积有气泡。结果判定：接种后24h观察结果。产酸,培养液颜色由紫色变为黄色；产酸产气,培养液颜色由紫色变为黄色,并在微量发酵管顶部积有气泡。b) 脲酶试验原理：细菌分解尿素产生两分子氨,培养基pH升高,指示剂酚红显示出红色,即证明细菌有脲酶。接种方法及结果判定：用接种环将细菌培养物接种与尿素琼脂斜面,不要穿刺到底,下部留作对照。16h观察,有时需要24h到6d。阳性反应,则琼脂斜面有粉红到紫红色。阴性反应,不变色。c) 氧化酶试验原理：氧化酶或称细胞色素氧化酶,是细胞色素呼吸酶系统的终末呼吸酶。作氧化酶试验时,此酶首先使细胞色素C氧化,然后氧化型细胞色素C再使对苯二胺氧化,产生颜色反应。接种方法及结果判定：取白色洁净滤纸沾取菌落。加盐酸二甲基对苯二胺溶液一滴,阳性者呈现粉红色,并逐渐加深,再加-萘酚溶液一滴,阳性者于半分钟内呈现鲜蓝色。阴性于两分钟内不变色。d) 接触酶试验也叫做触媒实验或者过氧化氢酶实验原理：具有过氧化氢酶的细菌,能催化过氧化氢生成水和新生态氧,继而形成分子氧出现气泡。 接种方法及结果判定：取槽置于洁净的试管内或玻片上,然后加3过氧化氢数滴；或直接滴加3过氧化氢于不含血液的细菌培养物中,立即观察结果。有大量气泡产生者为阳性。不产生气泡者为阴性。e) 硫化氢试验：原理：细菌分解含硫氨基酸,产生硫化氢,与培养基中的醋酸铅或硫酸亚铁发生反应,形成黑色的硫化氢或硫化亚铁。结果判定：接种后24h观察结果,培养液变黑为阳性,不变色为阴性。(五) 镜检参照第一天显微镜检查细菌的方法进行操作将接于TSB液体培养基24h生长的细菌用接种环涂布于玻片进行染色镜检,用油镜观察。(六) 细菌的鉴定根据副猪嗜血杆菌16S rRNA的序列设计引物对元代培养的细菌进行PCR可以快速准确的诊断出副猪嗜血杆菌病。引物 HSP1：GTG ATG AGG AAG GGT GGT GT HSP2：GGC TTC GTC ACC CTC TGTPCR体系25L体系 Mix 2 12.5L HSP1 2L25 LHSP2 2L 模板DNA 2L 酶 0.3L 双蒸水 6.2L PCR程序：1. 94 5min2. 94 30s3. 59 30s 34个循环4. 72 45s5. 72 10min取8.0 L的PCR产物进行1%的琼脂糖凝胶电泳,紫外灯下观察。(七) 实验结果1. 细菌生长情况观察结果：浑浊度较高,说明细菌生长情况良好。但由于没有做阴性对照,所以降低了此次试验的科学性。2. 病毒的CPE观察结果：暂时无任何细胞病变,包括阳性也没有病变。第五天：江浦农场参观体验养殖场参观：老师带领我们分别参观了鸡场、奶牛场和猪场鸡场参观主要内容：金陵黑鸡种鸡场,分为育雏舍,青年鸡舍,种鸡舍公母鸡又是分开养的,所以采用的是人工授精。经过调教的公鸡可以很方便的采到精液,给母鸡输一次精可以管一个月。有禽场8幢,其中3幢为鹅场,可按家系饲养；4幢为鸡场,规模化标准化鸡笼和喂食喂水采蛋卫生设施一应俱全；1幢为人工孵化室,全自动控温控光。一般开始下蛋的前几天的蛋不能用来育雏。在鸡场附件的树林中,还有散养模式的鸡舍放于树林中。鸡舍为四周镂空以及有一边的门较高,小鸡和公鸡可以自由出入。奶牛场：养殖中国荷斯坦奶牛奶牛场里牛舍的主要设施主要有牛床、饲槽、走道、粪尿沟。牛床一般m,牛床应有一定的坡度,利于冲洗,同时,坡度不能太大,牛会觉得不舒服。牛的饲槽位于牛床前,通常为固定式统槽。二栏之间还可以设饮水器,一般每2头牛设一个饮水器。牛舍内设一个清粪通道,路面要防止奶牛滑倒。在配种方面,采用人工受精,从而减少了奶牛阴道炎以及子宫炎等疾病的发生,并能确保良种繁育的进行。牛场配有各自的运动场,从而使奶牛有足够的活动空间。而场区设有两条通道,一条为净道,为饲料,用具以及牛奶的出入通道,一条为污道,为牛粪等的通道,从而保证了牛场的卫生。由于近年来牛奶行业食品问题频发,比如三聚氰胺等添加剂的曝光,使得大家对中国本土奶业的质疑声日益升高。很多人选择购买进口奶制品,对国产奶业影响很大,所以渐渐的近几年来养牛的成本不断升高。猪场：育肥猪舍,仔猪舍,母猪舍分娩和饲喂,种猪舍,也是这种流程式管理。在种猪场见到的种猪有长白猪,杜洛克,梅山猪,大约克夏等。首先参观的是保育舍,每个保育床上有10头左右的保育猪。后面是哺育舍,仔猪和母猪在一个哺育床上,而哺育床设计确保小猪不会被母猪压到。随后是种猪舍,种母猪采用单圈饲养,并标注配种时间,和妊娠预测日期。而种公猪很少,优良种公猪的活动空间很大,采用单圈饲养。后面一栋是备用猪舍,选取体型良好的作为后备种母猪或种公猪,发酵床养猪在东北地区推广较好,但参观时发现江浦农场猪舍并没有使用发酵床,可能是由于XX地区夏天比较热,发酵床发酵会产生大量的热量,倒不利于猪的生活。参观的时间不长,中午就结束了,但我们基本了解了鸡舍、牛舍和猪舍的基本构造和日常运转方式。亲眼看到为我们解决了一些心中的疑问,能够更好的理解书本上的内容。第六天：病毒细胞病变观察、菌落鉴定(一) 细菌在血平板上的初步鉴定将副猪嗜血杆菌水平划线接种于鲜血琼脂平板上,再挑取金黄色葡萄球菌垂直于水平线划线,37培养2448小时,呈现出典型的卫星生长现象,并且不出现溶血。(二) 镜检将1号样进行染色镜检油镜观察。(三) 跑胶拍照鉴定我们第五组阳性样跑出结果,但检测样品没有跑出来(四) 观察细胞病变(五) 结果1. 镜检结果可见到短杆状红色杆菌,怀疑是副猪噬血杆菌。2. 细菌在血平板上的初步鉴定如图,左为待测菌,右为阳性菌。纵向划线的为待检菌和阳性菌,横向为金黄色葡萄球菌。阳性对照组的卫星现象很明显,阳性菌菌落很大,金葡菌养分被吸收未长菌。左图可见待检菌落个体也较大,金葡菌菌落很小,可能原因是待检菌中含有副猪嗜血杆菌但有杂菌污染。1. 药敏试验结果药物抑菌圈大小结果副猪药敏结果对照照结果环丙霉素11mm敏感敏感可以看出我们做的菌对这七种抗生素均敏感程度与副猪嗜血杆菌基本相同,但没有完全符合。红霉素7mm不敏感不敏感诺氟沙星12mm敏感未知阿莫西林0mm不敏感不敏感林可霉素10mm敏感不敏感复方新诺明0mm不敏感敏感阿奇霉素0mm不敏感未知2. 生化试验结果：3.试验项目结果阳性对照结果糖类分解葡萄糖 变黄 变黄+ 不变 变黄不变 变黄产酸产气,培养液变黄,并有气泡可以看出虽然脲酶试验、氧化酶、接触酶实验结果与副猪噬血杆菌有高度的一致性,且样品菌可以分解大部分糖,出现颜色变化,也产气,但果糖不产气,D-核糖不变黄,所以和副猪嗜血杆菌阳性对照组生化结果：产酸产气、变黄、并有气泡并不完全符合,可能样品菌还是掺杂了其他菌。蔗糖果糖半乳糖D-核糖麦芽糖脲酶试验- - + - + + -氧化酶-接触酶+硫化氢+鸟氨酸未知乙胺酰胺未知注：表示产酸；表示产气；表示既产酸又产气；表示不产酸也不产气。4. 镜检结果可以见到两个或三四个连在一起的紫色球菌,需要再接板确认。5. 跑胶结果结果可以看出阳性副猪嗜血杆菌跑出结果,但实验样品没跑出结果,说明其不是副猪噬血杆菌。（六） 结果分析该乳猪可能为副猪嗜血杆菌、蓝耳病毒以及四叠球菌的混合感染,依据如下：1. 乳猪的临床症状：身上有瘀血斑,但范围不大,和副猪嗜血杆菌临床病变有相似地方。有些部位的淋巴结肿胀,肺脏和脾脏有一些病变,其中脾脏病变类似圆环病毒感染。总的来说,该猪体表临床症状观察和剖解并不能确诊是何种疫病。2. 细菌性检查：通过取肺脏组织涂片、接种TSA平板、TSB液体培养基扩增,最后再通过镜检鉴定该猪为一种球菌和一种杆菌。随后进行药敏试验、生化试验和血平板培养基接种病菌,以及用PCR扩增以及跑胶试验。确认分离到的是一种未知的球菌和副猪嗜血杆菌。通过询问老师和查阅文献资料,该球菌初步定为四叠球菌。3. 病毒学检查：将匀浆组织液冻融离心后接种Vero细胞,在接种三天后可以明显见到阳性样品的细胞空泡病变,但是并没有进行病毒基因组的提取以及PCR基因扩增的鉴定,因此只能初步定为蓝耳病病毒的感染。（七） 小结1. 通过近一周的传染病诊断实习,对如何规范的诊断畜禽传染病的流程有一个相对清楚的了解。特别是掌握了猪细菌与病毒混合感染的病原分离与鉴定。2. 因为这是实习,不是实验,所以很多实习材料都需要自己配,自己准备。在第一天TSA配制过程中,相关负责的同学没有将TSA摇匀,导致最后倒出来的液体特别粘稠,刚从高压锅拿出来,还没来得急倒,平板就凝固了。而其他组的平板在完全冷却后也没能凝固,最终很多平板不能使用。3. 对猪剖检前,要将猪放血处死,在猪颈部把血管隔断时,还要注意不能将气管割破,不然猪会将血呛到肺中,影响后继检查。4. 进行细菌划线接种时,要先将平板周围在酒精灯外焰下烧一圈,然后左手抓紧TSA平板,用手掌将平皿的底固定,用拇指和食指将平皿的盖略抬起一些,然后右手持接种环,接种环也要先烧一下,然后接触病料,再与平板平面呈30轻轻划线,一定要利用腕力,很多同学将平板划破了,同时注意划线时尽量靠近酒精灯。不过事后好多组的平板上还是有好多杂菌,或者是没有任何菌落。甚至是,有同学用副猪嗜血杆菌进行阳性对照划线培养后依旧没有长菌,说明接种环还未冷却就接触了病料。5. 最重要的是贯彻无菌操作的准则,不然如果有外来病原污染,那么诊断结果肯定是不准确的。a) 操作前,要先带手套,然后开启风扇,开始操作前要用70酒精擦拭手套,然后是实验用品,特别是一些瓶口,管口,盖子。打开前还要在酒精灯外焰灼烧,打开后应迅速,准确的处理,完毕后再进行灼烧,然后快速盖上。b) 小心取用无菌之实验物品,勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,务必将瓶盖朝上放置桌面。c) 进行细胞培养,细菌接种时,特别要细心,动作要熟练准。6. 此次实习是Vero细胞,王老师特别介绍了一些常用的专门为分离特定病毒当做培养基的细胞系,其细胞系的选择都不是随意的,而是根据已有的生长效果而来。王老师另外介绍了培养PRRS用肺泡巨噬细胞PAM,分离PCV-用PK-15,分离PRV可用PK-15、PHA-21,分离PPV可用ST,分离猪瘟可用vero、PK-15、ST等。7. 进行实验时,一定要及时记录一些信息,及时分析。有些是实验结果,有些是关键的操作步骤,倘若结果又问题,可以迅速的联想到可能出错的地方。8. 虽然在此次的实习中有好多内容在以前的微生物课,生化课等相关课程实验课上接触过了,但此次实习发现我们依旧不够熟练,每天都不断出现一些细节上的问题。在此很感谢王老师全称为我们讲解,出现问题的时候也没有显得很不高兴,而是说出错是好事,这样能让大家加深印象,况且也在学校里,争取以后不再重犯就好了。9. 虽然每组同学进行实习操作,总有个别同学不给力,偷懒跑掉,但最后所有小组都完成了实习全过程,大家增加了合作的默契与相互之间的同学之情。实习单位考核意见评语在校内实习本栏不用填：考核等级五级记分制：实习单位指导教师签名：实习单位盖章年 月 日指导教师考核意见评语：考核等级五级记分制：指导教师签名：年 月 日备注.