a酵母菌的形态观察PPT学习教案

会计学1a酵母菌的形态观察酵母菌的形态观察 美蓝是一种无毒的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。因此，具有还原能力的酵母活细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色，借此即可对酵母菌的死活细胞进行鉴别。第1页/共13页Scanning electron micrograph of the common bakers and brewers yeast Saccharomyces cerevisiae. Note the budding division and previous bud scars.第2页/共13页第3页/共13页四四 操作步骤操作步骤 1、菌种活化将酵母移种至新鲜的麦芽汁琼脂斜面上，2528培养48 h左右备用。2、美蓝镜片的观察1）在载玻片中央加一滴0.1%吕氏碱性美蓝染色掖，然后按无菌操作用接种环挑取少量酵母菌苔放在染液中，混合均匀。2）用镊子取一块盖玻片，先将一边与菌液接触，然后慢慢将盖玻片放下使其盖在菌液上。3）将制片放置约3min后镜检，先用低倍镜然后用高倍镜观察酵母的形态和出芽情况，并根据颜色来区别死活细胞。4）染色约后再次进行观察，注意死活细胞数量是否增加。 第4页/共13页5）用0.05%吕氏碱性美蓝染液重复上述操作。3、水一碘液镜片的观察在载玻片中央加一小滴革兰氏染色用碘液，然后在其上加3小滴水，取少许酵母菌苔放在水一碘液中混匀，盖上盖玻片后镜检。 注意事项1、加染液不宜过多或过少，否则，在盖上盖玻片时，菌液会溢出或出现大量气泡而影响观察。2、盖玻片不宜平着放下，以免产生气泡影响观察。第5页/共13页六 思考题1、吕氏碱性美蓝染液浓度和作用时间的不同，对酵母菌死细胞数量有何影响？试分析其原因。2、在显微镜下，酵母菌有哪些突出的特征区别于一般细菌？ 第6页/共13页第7页/共13页第8页/共13页第9页/共13页四四 操作步骤操作步骤1、菌种活化将酵母移种至新鲜的麦芽汁琼脂斜面上，2528培养24h左右，然后再转种23次。 2、产孢培养将经活化的菌种转接到麦氏琼脂斜面上，2528培养约1周。 3、制片取经产孢培养的酵母斜面培养物，在净洁载玻片上按常规涂片、干燥、固定。 第10页/共13页4、染色滴加5%孔雀绿染色1min。5、脱色用95%乙醇脱色30s，水洗。6、复染用0.5%番红复染30s，水洗，用吸水纸吸干。7、镜检干后用油镜观察（子囊孢子呈绿色，菌体和子囊呈粉红 色）。第11页/共13页五 注意事项 菌种活化时，要采用新配制、表面湿润的斜面培养基。六 思考题 如何区别酵母菌的营养细胞和释放出子囊外的子囊孢子？第12页/共13页